Hp感染狀態、IL-6-174基因多態性與HDL水平的相關性研究*

崔曉容，熊 瑋

(陸軍軍醫大學第一附屬醫院老年醫學科，重慶 400038)

近年來人口老齡化進程日益加劇，老年健康問題也成為社會關注的焦點之一。消化不良是一種常見的癥候群，癥狀含反復或持續性發作的上腹部不適、飽脹、早飽、灼熱、隱痛等，經上消化道內鏡、肝膽胰影像學、生化檢查均無明顯異常為功能性消化不良，老年群體生理機能的退化很容易引發此病。對于老年功能性消化不良患者而言，多數存在幽門螺桿菌(Hp)感染，而Hp感染與動脈粥樣硬化性血清脂質變化有關[1-4]；此外，Hp感染可引起多種細胞因子反應，包括白細胞介素-6(IL-6)的釋放[5]，而血清IL-6水平升高又能導致類脂物代謝作用的改變[6]。早在20世紀，FISHMAN等[7]就認為基因5′側翼區IL-6基因啟動子-174(IL-6-174)多態等位基因G/C(rs1800795)與血清IL-6水平升高有關，只是有學者認為IL-6-174多態性與血清IL-6水平之間的關系似乎隨著參與者群體的變化(不同年齡、種族等)而有所不同[8-10]；然而FERNNDEZ-REAL等[11]研究發現IL-6-174多態性與血脂異常存在一定的聯系。但國內關于老年患者Hp感染、IL-6-174多態性與血脂相關性的研究相對較少。鑒于此，本研究對老年功能性消化不良患者進行潰瘍、血脂檢查、Hp檢測及IL-6-174基因型分析，以探討老年患者Hp感染、IL-6-174基因多態性與血清高密度脂蛋白(HDL)水平關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年8月至2019年12月本院行內窺鏡檢查的298例老年功能性消化不良患者為研究對象。納入標準：(1)涉及符合RomeⅢ診斷標準的消化不良癥狀，即3個月內出現餐后飽脹、早飽感、上腹痛或上腹燒灼感；(2)年齡60歲以上。排除標準：(1)患有免疫抑制性疾病或惡性疾病；(2)既往接受過Hp根除治療、免疫抑制治療或抗凝藥物治療；(3)曾接受過胃外科手術、或正在進行抗生素治療；(4)患有代謝性疾病、慢性炎性疾病的患者。

1.2 方法

1.2.1檢測內容

(1)Hp感染情況；(2)HDL水平；(3)IL-6-174基因多態性。

1.2.2Hp檢測

碳13呼氣試驗(13C-UBT)檢測Hp：患者晨起空腹及口服1粒尿素[13C]膠囊(深圳市中核海得威生物科技有限公司)，靜坐30 min，全力向集氣袋吹氣。通過集氣袋收集氣體，通過分析呼氣中碳13標記的CO2的含量來判斷是否存在幽門螺桿菌感染。Hp陽性(Hp+)參考值為DOB≥4.0%，反之為Hp陰性(Hp—)。

1.2.3HDL檢測

采用Global Site全自動生化分析儀(深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司)，通過超速離心結合ALBK法測定血清HDL水平(HDL<1.04 mmol/L為低HDL水平[12])。根據HDL水平將其分為正常HDL水平患者和低HDL水平患者。

1.2.4IL-6-174基因多態性檢測

提取患者血液中DNA，基于限制性片段長度多態性方法(RFLP)，通過限制性內切酶NlaⅢ、PCR引物(上游引物5′-GCG CAA TTC TCC GTG ACA G-3′，下游引物5′-CGA GAA GGT CTG ATT GGA C-3′)、PCR儀、電泳儀聚丙烯酰胺配制試劑等檢測上述DNA標本IL-6-174基因多態性。

1.3 統計學處理

2 結 果

2.1 患者一般資料

正常HDL水平與低HDL水平患者的胃潰瘍、Hp感染狀態比較，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 患者一般資料(n=298)

2.2 不同變量與低HDL水平的相關性

通過logistic回歸模型調整相關混雜因素后，結果顯示男性、Hp+、胃潰瘍與低HDL水平相關(P<0.05)，見表2。

表2 不同變量與低HDL水平的logistic回歸分析

2.3 不同Hp感染狀態下IL-6-174基因型與低HDL水平的相關性

通過logistic回歸模型調整相關混雜因素后，結果顯示Hp+患者中，CC基因型與低HDL水平相關(P<0.05)，見表3。

表3 不同Hp感染狀態下IL-6-174基因型與低HDL水平的logistic回歸分析

2.4 不同IL-6-174基因型下Hp感染與低HDL水平的相關性

通過logistic回歸模型調整相關混雜因素后，結果顯示CC基因型患者中，Hp+與低HDL水平相關(P<0.05)，見表4。

表4 不同IL-6-174基因型下Hp感染狀態與低HDL水平的logistic回歸分析

3 討 論

因胃動力障礙引起的消化不良主要分為器質性消化不良(因某種器官病變-如肝病、膽道等引起的癥狀)和功能性消化不良[2]，臨床上對消化不良患者行消化道內鏡、肝膽胰影像學及生化檢查判斷檢查結果有無明顯異常以便對癥治療；對于無明顯異常的患者及功能性消化不良患者，繼續進行Hp檢測(若為Hp+則行根除治療)[13-14]。考慮Hp感染后機體非特異炎性反應會伴隨著細胞因子、炎性介質參與[15]，其中IL-6對機體多種細胞功能都能產生一定影響[16]，且IL-6基因啟動因子多態性(174G/C、572C/G)對IL-6基因轉錄和表達水平產生的影響會隨著機體狀態的改變而變化[17]，故非常有必要對Hp感染患者IL-6基因位點多態性進行研究。有研究表明，Hp感染會引起脂質代謝異常、白細胞介素或多種黏附因子等的表達增強進而導致血脂代謝紊亂，因而其與血脂異常存在一定的關聯[18-19]。而血脂異常是心血管疾病的主要風險因素[20]，同時，鑒于國內少有關于Hp感染患者IL-6-174基因多態性(GG、GC、CC)與血脂關系的研究，故本研究對此進行了分析。

本研究在對低HDL水平的影響因素進行logistic回歸分析發現，Hp+是低HDL水平發生的獨立影響因素。血清HDL可抵抗動脈粥樣硬化，是冠心病的保護因子，其能促進消除外周組織中的膽固醇，HDL增高有利于防止動脈粥樣硬化、預防冠心病，然而血清HDL水平偏低會增加冠心病發病率[6,21]。臨床上血脂異常(主要是HDL偏低)的重要致病原因之一是細菌感染，Hp感染會加劇炎性細胞(中性粒細胞、單核細胞)聚集以促進腫瘤抑制因子、IL-6等細胞因子表達抑制肝脂蛋白酶活性，從而進一步增加載脂蛋白的分泌，最終使得患者血清HDL水平偏低[22-23]，這一影響機制可以總結為Hp感染后一系列炎性活動導致血脂代謝紊亂。

基于IL-6-174基因多態性(GG、GC、CC)分組分析發現，IL-6-174 CC基因型患者中Hp感染與低HDL水平明顯相關，而在GG和GC基因型患者中，未發現類似相關性；且僅在Hp+患者中發現IL-6-174 CC基因型與低HDL水平相關。這些發現也可以理解為CC基因型患者Hp感染會增加低HDL水平的發生率。TSAI等[24]研究表明Hp感染及消化性潰瘍與IL-6表達增強有相關性，而高血清IL-6水平與低HDL水平存在一定關聯，且IL-6的表達可以減少脂蛋白脂肪酶的活性，這一活性的降低會進一步誘發血清HDL水平下降[25]，這一系列的反應最終形成IL-6和血清HDL間相互作用的一種可能機制。OBERBACH等[26]認為運動僅可能降低IL-6-174 C等位基因攜帶者的血清IL-6水平，同樣，較IL-6-174 G等位基因攜帶者而言，運動結合生活方式干預可以明顯增加IL-6-174 C等位基因攜帶者血清HDL水平[27]。此外，本研究發現IL-6-174 CC基因型Hp感染者血清HDL水平更容易呈降低趨勢。基于這些結果，IL-6-174 CC基因型個體血清HDL水平異常與否很有可能在一定程度上取決于外部因素(如運動、Hp感染)。

本研究不足在于研究群體皆為老年個體，且未能對IL-6-174 CC基因型多態性與血清LDL升高關系進行分析[28]；此外，本研究大多數老年患者均無運動習慣，且所有患者在血清標本采集前2 h無任何運動，暫不清楚運動對血清HDL水平影響時效，故對該研究結果可能產生一定影響。

綜上所述，Hp感染與低HDL水平有相關性，且相對IL-6-174 GG/CC基因型而言，IL-6-174 CC基因型患者Hp感染更有可能增加低HDL水平的發生率。這一結果可為臨床上對Hp+個體實施以抑制IL-6釋放進而降低HDL偏低發生率為目標的相關干預提供參考。