系統性紅斑狼瘡患者PDCD1基因表達與焦慮的相關性*

吳雙， 董海榮

(1.呼和浩特市第一醫院 皮膚科, 內蒙古 呼和浩特 010050； 2.呼和浩特市第一醫院 科教科, 內蒙古 呼和浩特 010050)

程序性細胞凋亡1(programmedcelldeath-1,PDCD1)與自身免疫、感染及腫瘤等疾病高度相關的基因，如在淋巴瘤、腦脊髓炎及系統性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)等疾病中都發揮著重要作用[1]。PDCD1基因表達使PDCD1分子通過其胞漿區的2個酪氨酸殘基與下游的信號分子作用而發揮對免疫應答的負性調控作用，在免疫反應的起始部位和效應部位雙重抑制免疫反應，可防止過度的免疫損傷及自身免疫性疾病的發生[2]。在PDCD1基因缺失的小鼠會出現類似SLE的癥狀，臨床將SLE的神經系統表現歸納為中樞神經、周圍神經及精神癥狀3個方面，當SLE導致健康狀況出現問題時, 就會出現輕度的社會心理障礙包括焦慮和抑郁[2]。有研究報道，PDCD1基因低表達可能與神經系統損傷有關，而且SLE患者往往有嚴重的心理障礙，常表現為焦慮、抑郁等[3]，目前SLE患者PDCD1基因表達是否與焦慮情緒相關未見報道。本研究通過探討SLE患者PDCD1基因表達與焦慮情緒的相關性，為緩解患者的焦慮情緒提供科學依據。

1 對象與方法

1.1 研究對象

隨機選取2018年1月1日—2021年1月1日收治的SLE患者100例。納入的所有對象為成年人，未患有其他免疫缺陷病；未患有交感性眼炎、強直性脊柱炎、乙型肝炎等可能與PDCD1基因表達有關的疾病；未患有疼痛疾病，如痛風急性期等；未患有嚴重精神疾病，如精神分裂癥、狂躁癥等。所有研究對象均知曉本研究且同意參加調查。排除突然發生嚴重疾病的患者。

1.2 實驗方法

1.2.1外周血PDCD1 mRNA的表達水平[4]采用實時熒光定量PCR (quantitative real-time PCR，qPCR)檢測，受試者于入院時抽取外周血5 mL，EDTA.2K抗凝，采用TRIzol法提取血液中的總RNA，利用primer 5.0進行引物設計，逆轉錄合成cDNA，反應體系為10 μL，反應條件為37 ℃ 15 min，85 ℃ 5 s；然后以cDNA為模板，采用SYBR Premix Ex Taq Ⅱ進行qPCR，反應體系為20 μL；反應條件為在95 ℃預變性30 s，95 ℃變性5 s、60 ℃退火30 s，共40個循環；以GAPDH為內參，采用2-ΔΔCt法表示PDCD1 mRNA的表達水平。qPCR試劑盒購自日本TaKaRa公司。

1.2.2焦慮評估方法[5]采用焦慮自評量表(SAS)評分評估患者的焦慮狀態，該量表共有20個條目，每個條目滿分4分，最低1分，總條目粗分滿分80分，粗分乘于1.25得到標準分；標準分低于50分為正常、50～59分為輕度焦慮、60～69分為中度焦慮、≥70分為重度焦慮，≥50分為處于焦慮狀態。

1.3 觀察指標

比較PDCD1低表達與PDCD1高表達患者焦慮的發生情況，比較無焦慮、輕度焦慮、中度焦慮以及重度焦慮患者外周血PDCD1基因表達水平；采用Logistic回歸評估SLE患者發生焦慮情緒的影響因素。

1.4 統計學分析

2 結果

2.1 SLE患者血液PDCD1表達水平與焦慮發生

結果顯示，PDCD1低表達組患者的焦慮發生率明顯高于PDCD1高表達組患者，差異有統計學意義(P=0.001)，見表1。

表1 SLE患者血液PDCD1表達水平與焦慮發生情況[n(%)]

2.2 SLE患者焦慮程度與外周血PDCD1 mRNA表達水平

不同焦慮程度患者外周血PDCD1表達水平比較，無焦慮組>輕度焦慮組>中度及重度焦慮組患者，差異有統計學意義(P<0.05)；中度焦慮組和重度焦慮組患者比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 不同焦慮程度的SLE患者外周血PDCD1 mRNA表達水平

2.3 SLE患者焦慮發生的影響因素

以焦慮(賦值：1=正常，2=焦慮)作為因變量，將年齡(賦值：1=<30歲，2=≥30歲)，性別(1=男，2=女)、家庭所在地(1=城鎮，2=農村)、家庭年收入(1=≤20 000元，2=>20 000元)、文化程度(1=高中/中職及以下，2=大專/大學及以上)以及PDCD1表達水平(1=高表達，2=低表達)作為自變量，采用Logistic逐步回歸分析，結果發現，家庭年收入(OR=1.422，95%CI為1.067～1.893)、PDCD1低表達(OR=2.439，95%CI為1.286～3.153)是SLE患者焦慮發生的危險因素(P<0.05)。見表3。

表3 SLE患者焦慮程度影響因素的Logistic逐步回歸分析

3 討論

PDCD1及其配體結合后的抑制途徑在T細胞反應階段起到關鍵作用重要，若阻斷PDCD1或者阻斷其與受體結合，T細胞將缺失有效的負性調節信號，可能會發生免疫功能障礙，導致免疫性疾病發生[6-10]。研究表明，PDCD1基因缺失的小鼠出現類似SLE的癥狀，而且發現人體PDCD1分子的基因多態性與其SLE相關[2,11]。但目前未見PDCD1表達與SLE患者焦慮情緒相關性的報道。因此，分析SLE患者PDCD1基因表達與焦慮情緒的相關性具有一定的探索性。

本研究中大多數SLE患者出現了焦慮現象，其發生率為73.0%，其中中度焦慮與重度焦慮的發生率分別為24.0%和28.0%。國內外研究發現，SLE患者的焦慮現象非常常見，其中SLE患者發生焦慮的概率為4.1%～84.9%[12-15]。

本研究發現，PDCD1低表達的SLE患者焦慮的發生率高于PDCD1高表達的SLE患者。朱騰等[16]發現泛發性膿皰性銀屑病患者的PDCD1表達水平明顯高于健康對照者；也有研究發現，SLE患者的焦慮程度越嚴重，SLE患者的癥狀較嚴重[5, 17-18]。提示臨床上可以根據SLE患者的焦慮程度及時發現其病情的變化，并采取相應的醫療措施，以更好地控制SLE患者的病情。

本研究Logistic回歸分析結果發現，家庭年收入、PDCD1低表達是SLE患者處于焦慮狀態的的危險因素，家庭所在地不影響SLE患者的焦慮程度。即SLE患者家庭收入低的發生焦慮的風險是家庭收入高的發生風險的1.422倍，而PDCD1低表達的SLE患者發生焦慮的風險是PDCD1高表達的SLE患者的2.439倍。目前尚無根治SLE的藥物，而且SLE患者的病情容易反復，糖皮質激素治療帶來的不良反應多，而且SLE患者會出現脫發，臉浮腫等癥狀，也容易并發紅斑狼瘡腎炎，同時SLE患者的治療費用昂貴，經濟負擔較重，綜合上述因素導致焦慮的發生[5,19-20]。PDCD1表達水平以及經濟因素與SLE患者的焦慮情緒相關，但PDCD1表達水平更能反映SLE患者的焦慮程度。

綜上所述，本研究分析了100例SLE患者的PDCD1表達水平與其焦慮狀態的關系，結果發現PDCD1低表達的SLE患者焦慮的發生率高于PDCD1高表達的SLE患者，因此可以根據SLE患者的焦慮情緒的變化，及時發現其病情變化，采取科學的醫療措施以控制病情，減輕患者生理和心理負擔。