呼吸道病原體抗體檢測在呼吸道感染中的應用效果

韋瑋

濟寧市第一人民醫院檢驗科，山東濟寧 272100

呼吸道感染是由致病微生物侵入呼吸道并進行繁殖所致的疾病，可分為上呼吸道與下呼吸道感染，其中上呼吸道感染主要為喉部及以上部位的感染，例如急慢性鼻炎、喉炎與咽炎；下呼吸道感染為喉部以下部位的感染，包括急慢性氣管炎、急慢性肺炎、支氣管炎[1]。有研究[2]發現，上呼吸道感染以病毒為常見病因，少數由細菌所致；下呼吸道感染則由細菌、病毒、衣原體、支原體、軍團菌等微生物所致。由于呼吸道感染可以誘發諸多疾病，加之臨床癥狀各有不同，相同病原體能夠導致多種疾病，而一種疾病也可能由諸多病原體所致[3]。所以，及時明確呼吸道感染患者的病原體類型，對于進一步診療工作具有至關重要的作用。該研究選擇2018年8月—2020年2月該院1 800例呼吸道感染患者作為研究對象，利用間接熒光免疫法對其不同呼吸道8種病原體IgM抗體進行早期檢測，旨在為呼吸道感染防治工作提供可靠的依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇該院收治1 800例呼吸道感染患者作為研究對象，其中男性985例，女性815例；年齡1~84歲，平均（45.6±12.8）歲。納入標準：所有患者均符合《實用內科學》15版中的診斷標準，經診斷包括支氣管肺炎、支氣管哮喘、急性上呼吸道感染等疾病；該次研究已向患者進行充分的告知；該次研究經醫院倫理委員會審核并批準。排除標準：自身免疫性疾病；其他系統急慢性感染；惡性腫瘤；白血病。

1.2 方法

所有患者均采集靜脈血1~2 mL，以低速離心機離心5 min，血清分離后，以間接免疫熒光法對8種呼吸道病原體IgM抗體進行檢測，包括：甲型流感病毒（IFA）、乙型流感病毒（IFB）、肺炎支原體（Mp）、呼吸道合胞病毒（RSV）、嗜肺軍團菌（LP）、腺病毒（ADV）、肺炎衣原體（CP）和副流感病毒（PIVS）。具體操作嚴格按照說明書執行。為了保證試驗結果的科學性與有效性，每組試驗均設立陽性與陰性對照。通過熒光顯微鏡觀察結果。儀器與試劑：醫用臺式低速離心機（型號TD-6）；三用恒溫水箱（型號S-HH-W21）；轉移脫色搖床（型號：XK-8）；微量移液器（型號：KHB）；正置熒光顯微鏡（型號BX51TR-32FB3-F01）；免疫熒光分析檢測試劑盒購自上海貝西生物科技有限公司，由美國海德診斷有限公司生產，國械注進20193402864。

1.3 觀察指標

①觀察 患者呼吸道8種病原體IgM抗體陽性結果分布情況。②觀察該組呼吸道8種病原體IgM抗體多重感染陽性分布情況。③對比不同年齡段患者呼吸道8種病原體IgM抗體檢測的陽性率。

1.4 統計方法

采用SPSS 20.0統計學軟件處理數據資料，計數資料以頻數及百分比（%）表示，組間差異比較以χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 該組患者呼吸道8種病原體IgM抗體陽性結果分布情況

該組1 800例呼吸道感染患者共有655例IgM抗體為陽性，陽性率為36.39%，其中Mp IgM抗體陽性檢出率最高，其他依次為RSV、ADV、CP、IFA、IFB、PIVS、LP。見表1。

表1 該組患者呼吸道8種病原體IgM抗體陽性結果分布情況

2.2 該組呼吸道8種病原體IgM抗體多重感染陽性分布情況

該組呼吸道8種病原體IgM抗體單一感染陽性率61.83%、二重感染25.19%、三重感染11.45%、四重感染1.53%。見表2。

表2 該組呼吸道8種病原體IgM抗體多重感染陽性分布情況

2.3 不同年齡段患者呼吸道8種病原體IgM抗體檢測的陽性率對比

該組年齡<18歲患者Mp IgM抗體檢測的陽性率高于年齡18~59歲、≥60歲（P＜0.05）。其他年齡組RSV、ADV、CP、IFA、IFB、PIVS、LP IgM抗體檢測的陽性率對比差異無統計學意義（P＞0.05）。見表3。

3 討論

呼吸道感染屬于臨床常見病之一，誘發該病的病原體種類較多，而針對不同的病原體感染，臨床所采取的治療方法也有所不同[4]。然而，不同病原體感染后的臨床表現十分相近，僅依靠臨床表現的癥狀與常規經驗判斷無法有效區分，所以必須采用實驗室檢測病原體類型，以便合理選擇有效的藥物，避免抗生素濫用，促進疾病盡早康復[5-6]。目前，實驗室主要的檢測方法包括病原體分離培養、酶聯免疫吸附試驗、組織培養、分子生物學檢測、快速膠體金、基因芯片等實驗，但上述方法均有較大的局限性[7]。培養法是早期用于病原體分離的方法，其根據病原體細菌嗜性，選取合適的組織與細胞進行接種，基于感染細胞表現的蛋白標志物，以免疫學與血細胞吸附法對病原體增殖情況進行檢測與鑒定[8]。雖然病毒分離培養法能夠客觀分離感染病毒的種類，然而該方法步驟繁瑣，檢測時間長、成本高，且易出現假陰性，檢測結果受各類因素的影響，所以臨床應用率并不高[9]。分子生物學檢測具有較高的敏感度與特異度，但易被污染，對于實驗室環境要求較高，不利于基層醫院開展。酶聯免疫吸附試驗每次僅能夠檢測一種病素[10]?；蛐酒夹g是在基因探針技術的基礎上發展而來的新興技術，具有快捷、高效、高度準確性與靈敏性等優勢，但該技術成本昂貴、操作復雜，無法在臨床廣泛推廣[11]?？焖倌z體金檢測操作簡單、快捷，不需要特殊的儀器與設備，但不能準確定量，準確性與靈敏度較低，易出現假陰性，易導致部分病原體感染漏診[12]。

近年來，隨著免疫標記技術的不斷完善，免疫熒光技術也在臨床得到了廣泛的應用[13]。免疫熒光技術是在生物化學、免疫學與顯微鏡技術的基礎上，基于抗原抗體反應原理所建立的新型技術。在檢測過程中，其將已知的抗體或抗原標記上熒光標記物，再以熒光抗體作為探針檢測組織內相應抗原或細胞，使形成的抗原抗體復合物上包含熒光素，之后通過熒光顯微鏡對標本進行觀察，明確抗體或抗原的含量、性質[14]。由于抗原抗體結合后可以在相應位置形成特殊的熒光模型，陽性與陰性標本的熒光強度存在明顯差異，所以利于觀察到檢測結果[15]。目前，臨床主要采用間接免疫熒光法檢測IgM抗體，這是因為機體感染后所出現的免疫反應主要為體液免疫，而IgM抗體是抗原刺激機體后形成體液免疫應答過程中最早的抗體，血清內IgM抗體水平升高往往說明存在近期感染，這為呼吸道感染的早期診斷提供了準確的信息，利于指導臨床合理用藥[16]。

司序等[17]通過間接免疫熒光法對1722例呼吸道感染就診住院患者進行了8項呼吸道病原體檢測，其中陽性822例，占全部受檢群體的47.7%，單項感染患者409例（49.8%），雙重感染264例（32.1%），三重感染137例（16.7%），四重感染12例（1.4%）。該文研究結果顯示，1 800例呼吸道感染患者共有655例IgM抗體為陽性，陽性率為36.39%，其中Mp IgM抗體陽性檢出率最高，其中單一感染陽性率61.83%、二重感染25.19%、三重感染11.45%、四重感染1.53%。結果可見，8項呼吸道病原體的IgM抗體篩查試劑將病原體作為抗原包，可以有效檢測出血清內的IgM抗體，并以吸附劑對血清進行處理，進一步提高了呼吸道感染病原體的檢測效果。廖冰潔等[18]收集了2062例呼吸道感染患者的血清，以間接免疫熒光法對呼吸道病原體IgM抗體進行檢測，結果顯示<18歲，18~50歲以下，≥50歲陽性病例年齡組患者Mp IgM抗體陽性率分別為45.4%、20.9%、21.6%，其中<18歲組的陽性率高于其他組。該文研究結果與上述結果相近，該次研究中年齡<18歲患者Mp IgM抗體檢測的陽性率83.64%高于年齡18~59歲73.04%、≥60歲70.97%（P＜0.05）。Mp是兒童時期肺炎與其他呼吸道感染的重要病原體，其屬于病毒與細菌之間的病原微生物，能夠通過呼吸道飛沫傳染，小兒免疫系統尚未發育成熟，一旦抵抗力降低，極易因Mp誘發呼吸道感染[19]。由于Mp對于大環內脂類抗菌藥物十分敏感，而對于氨奉糖苷類與β內酰胺類耐藥，所以病原體的檢測對于合理應用抗菌藥物具有至關重要的意義，可以有效避免病毒感染時抗菌藥物不合理應用所致的繼發耐藥菌株二重感染[20]。

表3 不同年齡段患者呼吸道8種病原體IgM抗體檢測的陽性率對比[n（%）]

綜上所述，Mp是引起呼吸道感染的重要病原體，采用間接免疫熒光法檢測呼吸道病原體IgM抗體對于呼吸道感染患者早期診斷具有顯著的意義，能夠有效避免抗菌藥的盲目應用。