血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7聯(lián)合檢測在診斷子宮腺肌病中的臨床價(jià)值

單 君，李 莉

復(fù)旦大學(xué)附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院婦科，上海 200090

子宮腺肌病是婦科常見的良性疾病，是常見的不孕原因之一，臨床上常有痛經(jīng)、經(jīng)量過多和經(jīng)期延長等癥狀，痛經(jīng)在月經(jīng)開始時(shí)出現(xiàn)，疼痛持續(xù)到月經(jīng)結(jié)束，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量[1]。近年來發(fā)現(xiàn)，糖類抗原125(CA125)對子宮腺肌病的診斷具有一定的價(jià)值，但其靈敏度和特異度不高。趨化因子是一類細(xì)胞分泌的信號蛋白，具有誘導(dǎo)特定的細(xì)胞趨化能力，參與細(xì)胞病理生理過程[2]。趨化因子配體(CXCL)-12在多種細(xì)胞中廣泛的表達(dá)，與趨化因子受體(CXCR)-4或CXCR-7結(jié)合，激活多種細(xì)胞信號通路，參與了細(xì)胞的病理生理過程[3]。現(xiàn)已知CXCL-12、CXCR-4在子宮內(nèi)膜異位癥中具有重要作用，但是否對子宮腺肌病具有影響仍不清楚[4-5]。本研究通過檢測子宮腺肌病患者血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7水平，觀察其在診斷子宮腺肌病的臨床價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年1月至2020年1月在本院就診且病理確診為子宮腺肌病的96例患者作為子宮腺肌病組，年齡26～56歲，平均(3.86±6.24)歲，體質(zhì)量指數(shù)(BMI)為(23.94±2.15)kg/m2。選取同期在本院行手術(shù)治療且病理診斷為子宮肌瘤的75例患者作為子宮肌瘤組，年齡23～57歲，平均(43.27±5.21)歲，BMI為(23.19±2.06)kg/m2。另選取同期本院體檢健康者45例作為健康對照組，年齡25～55歲，平均(43.92±5.28)歲，BMI為(23.62±1.78)kg/m2。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)子宮腺肌病和子宮肌瘤均經(jīng)病理證實(shí)；(2)均簽署知情同意書。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核通過。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)其他生殖系統(tǒng)疾病如惡性腫瘤和盆腔炎等；(2)3個(gè)月內(nèi)服用性激素類藥物；(3)合并內(nèi)分泌和神經(jīng)系統(tǒng)疾病；(4)精神性疾病和智力障礙；(5)免疫性和血液性疾病。3組年齡和BMI等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1子宮腺肌病病理分級 根據(jù)子宮內(nèi)膜浸潤子宮肌層的不同程度及子宮內(nèi)膜侵入淺肌層、子宮肌層中部和超過肌層中部分為Ⅰ級、Ⅱ級和Ⅲ級。

1.2.2痛經(jīng)程度評估 入院后患者采用視覺模擬評分，根據(jù)評分標(biāo)準(zhǔn)總分為0～10分，分?jǐn)?shù)越高疼痛越嚴(yán)重。根據(jù)疼痛評分總分分為輕度：0～2分；中度：3～6分；重度：7～10分。

1.2.3血液標(biāo)本的留取 子宮腺肌病組、子宮肌瘤組患者入院時(shí)和健康對照組研究對象同期在清晨抽空腹肘部靜脈血約5 mL，將標(biāo)本靜置約30 min予以離心，離心速度3 000 r/min，離心半徑為15 cm，離心15 min，留取上清液。

1.2.4血清CXCL-12、CXCR-4、CXCR-7和CA125水平檢測 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測血清CXCL-12、CXCR-4、CXCR-7和CA125水平，按照購買的試劑盒說明書操作，采用CXCL-12、CXCR-4、CXCR-7和CA125抗體制成固相抗體，將抗體包被微孔板，并將加入含有CXCL-12、CXCR-4、CXCR-7和CA125的待測樣本，形成抗原抗體復(fù)合物及酶結(jié)合物，在充分溫育后進(jìn)行洗滌，并加入顯色劑，并終止反應(yīng)，在450 nm處測定吸光度，根據(jù)吸光度查標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算出血清CXCL-12、CXCR-4、CXCR-7和CA125水平。所有的試劑盒購自武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司。

1.2.5觀察指標(biāo) 觀察各組血清CXCL-12、 CXCR-4、CXCR-7和CA125水平變化；血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7水平對子宮腺肌病的診斷效能及其與病理分級、痛經(jīng)程度和各指標(biāo)之間的相互關(guān)系。

2 結(jié) 果

2.1各組血清CXCL-12、CXCR-4、CXCR-7和CA125水平比較 子宮腺肌病組血清CXCL-12、CXCR-4和CA125水平明顯高于子宮肌瘤組和健康對照組，而血清CXCR-7水平明顯低于子宮肌瘤組和健康對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；子宮肌瘤組血清CXCL-12、CXCR-4和CA125水平高于健康對照組，而血清CXCR-7水平明顯低于健康對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 各組血清CXCL-12、CXCR-4、CXCR-7和CA125水平比較

2.2血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7水平在診斷子宮腺肌病的靈敏度和特異度比較 血清CXCL-12(Z=4.470，P<0.01)、CXCR-4(Z=4.019，P<0.01)和CXCR-7(Z=3.685，P<0.01)水平在診斷子宮腺肌病的效能明顯優(yōu)于CA125，將CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7進(jìn)行二元Logistic回歸分析，方程Y=0.67×XCXCL-12+0.23×XCXCR-4-3.18×XCXCR-7-13.09，CXCL-12+CXCR-4+CXCR-7聯(lián)合檢測的靈敏度為85.4%，特異度為96.0%，AUC為0.953，明顯高于單個(gè)指標(biāo)的檢測結(jié)果[CXCL-12(Z=4.221，P<0.001)、CXCR-4(Z=4.595，P<0.001)和CXCR-7(Z=4.628，P<0.001]，而單個(gè)指標(biāo)的檢測結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見圖1、表2。

圖1 血清CXCL-12、 CXCR-4和CXCR-7水平在診斷子宮腺肌病的ROC曲線分析

表2 血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7水平在診斷子宮腺肌病的效能比較

2.3子宮腺肌病患者血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7水平與病理分級的關(guān)系 從表3可知，子宮腺肌病患者血清CXCL-12和 CXCR-4水平隨著病理分級升高而升高(P<0.05)，而CXCR-7水平隨著病理分級升高而降低(P<0.05)。

表3 子宮腺肌病患者血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7水平與病理分級的關(guān)系

2.4子宮腺肌病患者血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7水平與痛經(jīng)程度的關(guān)系 從表4可知子宮腺肌病患者血清CXCL-12和CXCR-7水平隨著痛經(jīng)程度升高而升高(P<0.05)，而血清CXCR-4水平隨著痛經(jīng)程度升高而降低(P<0.05)。

表4 子宮腺肌病患者血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7水平與痛經(jīng)程度的關(guān)系

2.5子宮腺肌病患者血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7水平的相關(guān)性分析 子宮腺肌病患者血清CXCL-12和 CXCR-4水平與CXCR-7呈負(fù)相關(guān)(r=-0.682、-0.816，P<0.01)，而血清CXCL-12水平與CXCR-4呈正相關(guān)(r=0.742，P<0.01)。

3 討 論

子宮腺肌病是一種雌激素依賴性疾病，CXCL-12是趨化因子CXC亞家族的成員之一，定位于10號染色體，是一種由68個(gè)氨基酸組成的小分子細(xì)胞因子，具有較高的穩(wěn)定性[6]。CXCL-12具有兩種表達(dá)形式CXCL-12a和CXCL-12b，在多種器官中表達(dá)，如心臟、腎臟、脾臟和子宮內(nèi)膜等，這些組織無須炎癥刺激，能夠持續(xù)分泌CXCL-12[7]。CXCL-12的主要功能具有調(diào)節(jié)血管，促進(jìn)腫瘤組織侵襲和轉(zhuǎn)移等重要作用；此外，CXCL-12參與了誘導(dǎo)免疫細(xì)胞活化、募集和遷移，對機(jī)體的免疫平衡具有一定的作用[8-9]。CXCL-12參與血管生成可能與CXCR-4和CXCR-7結(jié)合后，啟動下游的信號通路，誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生增殖、遷移和刺激血管的形成有關(guān)[10]。本研究發(fā)現(xiàn)子宮腺肌病組血清CXCL-12水平明顯高于子宮肌瘤組和健康對照組，并且發(fā)現(xiàn)隨著病理分級的升高和痛經(jīng)程度升高出現(xiàn)明顯升高，說明CXCL-12參與了子宮腺肌病的病理生理過程。與其他報(bào)道結(jié)果接近[11]。本研究顯示血清CXCL-12>9.24 pg/L時(shí)，在診斷子宮腺肌病的靈敏度為70.8%，特異度為88.0%，AUC為0.843，明顯高于CA125的AUC。

CXCR-4是由人染色體2q21基因編碼7次的跨膜G蛋白偶聯(lián)受體，其由352個(gè)氨基酸組成，廣泛存在于各種器官的細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)中，主要在內(nèi)皮細(xì)胞、白細(xì)胞和單核細(xì)胞中[12]。CXCR-4與CXCL-12結(jié)合后，通過改變自身的構(gòu)象，導(dǎo)致異三聚體G蛋白活化，激活下游的多條信號通路，引起一系列的生物效應(yīng)，在血管生產(chǎn)和惡性腫瘤增殖和轉(zhuǎn)移中具有重要作用[13]。本研究顯示，子宮腺肌病組血清CXCR-4水平明顯高于子宮肌瘤組和健康對照組，并且隨著痛經(jīng)程度和病理分級升高而升高，說明CXCR-4參與了子宮腺肌病的病理生理過程。有研究發(fā)現(xiàn)，CXCR-4水平較高可以激活CXCL-12/CXCR-4軸，增加子宮內(nèi)膜異位癥的侵襲性[14-16]。本研究還發(fā)現(xiàn)CXCR-4>54.36 pg/mL時(shí)，其診斷子宮內(nèi)膜異位癥的靈敏度為65.6%，特異度85.3%，AUC為0.826，說明其在診斷子宮內(nèi)膜異位癥具有重要診斷價(jià)值。

CXCR-7定位于2q37上，與CXCR-4具有同源性，與CXCL-12具有高度親和力[17]。現(xiàn)已知CXCR-7與CXCL-12結(jié)合的親和力較CXCR-4更高，并且CXCL-12與CXCR-7結(jié)合后，無法再與CXCR-4結(jié)合，但功能上不能介導(dǎo)蛋白偶聯(lián)，無法激活信號通路[18]。CXCL-12/ CXCR-7信號軸在不同的組織具有不同的效應(yīng)，在多種腫瘤的血管內(nèi)皮細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞中高表達(dá)，促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展，但在子宮內(nèi)膜異位癥中并未促進(jìn)病情發(fā)展，并且發(fā)現(xiàn)CXCR-7還可以通過內(nèi)吞形式進(jìn)入人體的CXCL-12微環(huán)境中，發(fā)揮對CXCR-4的拮抗作用[19-20]。本研究顯示,子宮腺肌病組血清CXCR-7水平明顯低于子宮肌瘤組和健康對照組，并且發(fā)現(xiàn)隨著子宮腺肌病的病理分級和痛經(jīng)程度升高而降低，說明血清CXCR-7水平在子宮腺肌病發(fā)生發(fā)展過程中具有重要作用。本研究發(fā)現(xiàn)，CXCL-12+CXCR-4+CXCR-7聯(lián)合檢測的靈敏度為85.4%，特異度為96.0%，AUC為0.953，明顯優(yōu)于單個(gè)指標(biāo)CXCL-12、CXCR-4和 CXCR-7，并且發(fā)現(xiàn)血清CXCL-12和 CXCR-4水平與CXCR-7呈負(fù)相關(guān)，而血清CXCL-12水平與 CXCR-4呈正相關(guān)，說明3個(gè)指標(biāo)間具有聯(lián)系，且具有明顯的互補(bǔ)性。

總之，血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7水平與子宮腺肌病的嚴(yán)重程度具有密切關(guān)系，其聯(lián)合檢測在診斷子宮腺肌病方面具有較高的靈敏度和特異度。