不同生化分析儀檢測系統(tǒng)的結(jié)果比對研究

謝漢輝

三明市清流縣總醫(yī)院檢驗科,福建三明 365300

心肌酶的檢測是臨床心功能檢測的重要項目[1-2]。本科生化室共有兩套不同的檢測系統(tǒng)，分別為OlympusAU2700自動生化分析儀和美國強生V250自動干式生化分析儀。實驗室內(nèi)不同檢測儀器對同一檢測項目進(jìn)行測定，其結(jié)果間是否具有可比性是共同關(guān)心的問題[3-4]。由于儀器的損耗程度不同，測定結(jié)果可能有一定的差異。因此，本研究選取天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、 乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、心肌激酶同工酶(CK-MB) 4種心肌酶，參照文獻(xiàn)[1]文件留取標(biāo)本，對此進(jìn)行比對測試。

1 材料與方法

1.1儀器與試劑 Olympus AU2700自動生化分析儀和美國強生V250自動干式生化分析儀及配套試劑，兩個檢測系統(tǒng)工作性能穩(wěn)定。AST由上海科華-東菱診斷用品有限公司提供,LDH、CK由中生北控生物科技股份有限公司提供，CK-MB為G-cell公司提供。

1.2校準(zhǔn)品及質(zhì)控品 AST、LDH、CK標(biāo)準(zhǔn)品及質(zhì)控品由上海復(fù)星長征醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)有限公司提供，CK-MB標(biāo)準(zhǔn)品及質(zhì)控品由G-cell公司提供。美國強生V250自動干式生化分析儀全部配套美國強生公司校準(zhǔn)品及質(zhì)控品，其精密度和準(zhǔn)確度均良好，參加室間質(zhì)評成績優(yōu)秀。

1.3標(biāo)本采集 本院門診及住院患者當(dāng)天血清，無溶血、無脂濁，隨機(jī)與當(dāng)天待檢標(biāo)本同等條件下進(jìn)行測定。選取的標(biāo)本濃度根據(jù)參考值范圍盡量選取高、中、低3組數(shù)值。每臺儀器比對項目每天測定2次，取均值為比對結(jié)果，共分析40個標(biāo)本。

1.4方法 以檢測系統(tǒng)Olympus AU2700自動生化分析儀作為比較方法(X),以檢測系統(tǒng)美國強生V250自動干式生化分析儀為實驗方法(Y)，進(jìn)行方法間的比對試驗。實驗前對儀器進(jìn)行常規(guī)維護(hù)與保養(yǎng)，校準(zhǔn)和質(zhì)控后再進(jìn)行標(biāo)本測定。選取高、低值質(zhì)控品測定AST、LDH、CK，采用混合血清測定CK-MB，分別在兩個檢測系統(tǒng)上重復(fù)測定20次。批間精密度試驗時進(jìn)行隔日測定，批內(nèi)精密度試驗時在1 d內(nèi)測完。然后計算AST、LDH、CK、CK-MB的變異系數(shù)(CV)，并分析其批間精密度和批內(nèi)精密度。數(shù)據(jù)收集和處理按文獻(xiàn)[5]文件進(jìn)行方法間離群值檢查，保留符合要求的結(jié)果。檢驗X的測定范圍是否合適，可用相關(guān)系數(shù)(r)作粗略估計，如r≥0.975或r2≥0.950,則認(rèn)為X取值范圍合適，直線回歸統(tǒng)計的斜率和截距可靠。如r<0.975或r2<0.950則說明Y的精密度較差或X范圍不合適，直線回歸統(tǒng)計的斜率和截距不可靠，需改善方法的精密度后重新試驗[6]。線性回歸方程為Y=bX+a 。以CLIA′88對室間評估的允許誤差為判斷依據(jù)[7]，由儀器間比較評估的系統(tǒng)偏差不大于允許誤差的1/2為臨床可接受水平，即2臺儀器間的測定結(jié)果具有可比性。

1.5統(tǒng)計學(xué)處理 采用Microsoft Excel 2003進(jìn)行相關(guān)分析和方法間的偏差計算。如r≥0.975或r2≥0.950，將各個項目給定的醫(yī)學(xué)決定水平濃度代入回歸方程。計算Y和X之間的相對偏差,若r<0.975，則使用配對t檢驗對檢測結(jié)果進(jìn)行分析，并計算Y和X均值處的相對偏差。

2 結(jié) 果

2.1兩個檢測系統(tǒng)測定AST、LDH、CK、CK-MB的批內(nèi)及批間CV兩個檢測系統(tǒng)測定AST、LDH、CK、CK-MB的批內(nèi)及批間精密度差異不明顯。見表1。

表1 兩個檢測系統(tǒng)測定AST、LDH、CK、CK-MB的批內(nèi)及批間CV(%)

2.2兩個檢測系統(tǒng)測定AST、LDH、CK、CK-MB的相關(guān)性 兩個檢測系統(tǒng)測定AST、LDH、CK、CK-MB的相關(guān)性與回歸性良好。見表2。

表2 兩個檢測系統(tǒng)測定AST、LDH、CK、CK-MB的相關(guān)性

2.3兩個檢測系統(tǒng)測定AST、LDH、CK、CK-MB臨床可接受性評價 將各個項目給定的醫(yī)學(xué)決定水平濃度代入回歸方程。計算Y和X之間的相對偏差，以CLIA′88對室間評估的允許誤差為判斷依據(jù)，由儀器間比較評估的系統(tǒng)偏差不大于允許誤差的1/2為臨床可接受水平，除LDH外，其他項目的相對偏差均小于1/2CLIA′88的允許誤差范圍,見表3。

表3 兩個檢測系統(tǒng)測定AST、LDH、CK、CK-MB臨床可接受性評價

2.4LDH的回歸校正 將LDH的回歸方程Y=2.581 5X+34.593 0輸入兩個檢測系統(tǒng)中，選擇5份濃度不同的新鮮血清，計算校正后兩個檢測系統(tǒng)測定LDH的結(jié)果間的相對偏差。校正后兩個檢測系統(tǒng)測定5份新鮮血清LDH的結(jié)果間的相對偏差均小于1/2 CLIA′88的允許誤差范圍，結(jié)果見表4。

表4 校正后LDH檢測結(jié)果的相對偏差

3 討 論

本研究結(jié)果顯示，Olympus AU2700自動生化分析儀和美國強生V250自動干式生化分析儀都具有較好的批間精密度和批內(nèi)精密度，所以良好的室內(nèi)質(zhì)控是保證檢驗結(jié)果一致性的基礎(chǔ)[8]。各檢測系統(tǒng)間的r2均大于0.950,說明X的取值范圍合適，直線回歸統(tǒng)計的斜率和截距可靠，可用其去估計方法間的系統(tǒng)誤差,并以醫(yī)學(xué)決定水平處的系統(tǒng)誤差來判斷方法間是否具有可比性。除LDH外，AST、CK、CK-MB測定結(jié)果的相對偏差均小于1/2 CLIA′88的允許誤差范圍，即在比較范圍內(nèi)Y和X的測定結(jié)果具有可比性。

LDH測定結(jié)果的相對偏差均遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于1/2 CLIA′88的允許誤差范圍，主要原因是兩個檢測系統(tǒng)測定LDH的原理不同，Olympus AU2700自動生化分析儀是利用乳酸氧化成丙酮酸，同時氧化型輔酶還原成還原型輔酶，引起340 nm處吸光度的增高，吸光度的增高速率與標(biāo)本中LDH活力呈正比關(guān)系，即L-乳酸+氧化型輔酶→丙酮酸+還原型輔酶法，參考值范圍為104～245 U/L；而美國強生V250自動干式生化分析儀則是將丙酮酸還原成乳酸，同時還原型輔酶氧化成氧化型輔酶，引起340 nm處吸光度的降低，即丙酮酸還原法。用反射強度變化測出還原型輔酶的氧化率，再將其轉(zhuǎn)化成乳酸脫氫酶的活力，參考值范圍為313～618 U/L。為了使兩個系統(tǒng)測定LDH結(jié)果具有可比性，根據(jù)回歸方程對美國強生V250自動干式生化分析儀進(jìn)行了校正，校正后LDH檢測結(jié)果的相對偏差均小于1/2 CLIA′88的允許誤差范圍，說明校正后LDH檢測結(jié)果具有可比性，能被臨床接受。

綜上所述，即使每臺儀器的工作性能穩(wěn)定，室內(nèi)質(zhì)控正常,不同儀器之間檢測結(jié)果仍存在系統(tǒng)誤差，在同一實驗室內(nèi)不同儀器間誤差過大，將使檢測結(jié)果失去可比性,也給臨床動態(tài)觀察帶來很大的困難，所以應(yīng)定期開展對比試驗，使儀器間的相對偏差處于可接受的范圍。Olympus AU2700自動生化分析儀和美國強生V250自動干式生化分析儀上AST、LDH、CK、CK-MB檢測結(jié)果都具有較好的精密度，線性回歸方程良好，在比較范圍內(nèi)兩個系統(tǒng)AST、CK、CK-MB測定結(jié)果具有可比性，校正后LDH檢測結(jié)果也具有可比性。