IL-1基因多態性與MS患者遺傳易感性關系的meta分析*

張明亮，劉方洲，李偉霞，張 輝，王曉艷，張書琦，王 炎，賈文匯，牛 璐，唐進法，△

(1．河南中醫藥大學第一附屬醫院中藥臨床評價技術河南省工程實驗室，鄭州 450000；2.成都中醫藥大學藥學院，成都610000；3.河南省中醫藥研究院，鄭州 450000；4．河南中醫藥大學藥學院，鄭州 450000)

多發性硬化癥(multiple sclerosis，MS)是一種病因不明的中樞神經系統(central nervous system，CNS)自身免疫性神經退行性疾病，病理表現為腦與脊髓白質區域炎性脫髓鞘，臨床主要表現為視神經炎、球后視神經炎、眼肌麻痹、肢體癱瘓、錐體束征、精神癥狀及共濟失調等癥狀[1]。當前普遍認為MS與遺傳因素、環境因素，如病毒感染、吸煙、地理位置等有一定關系[2-4]。白細胞介素1(interleukin-1，IL-1)是一種由白細胞分泌的可誘發機體產生炎性免疫反應的細胞因子，主要包含IL-1ra、IL-1α、IL-1β，在許多免疫炎性疾病中扮演重要角色，如MS[5]。國內外對IL-1ra(VNTR)、IL-1α(-889)、IL-1β(-511)與IL-1β(+3953)等位點基因多態性與MS的遺傳易感性進行了大量研究，但多為單中心研究，樣本量偏小且存在結果不一致現象。因此，本研究通過對當前國內外有關MS與IL-1基因多態性的數據進行綜合評價，以彌補單個研究的不足，為更好地評價二者的關系提供重要的臨床循證依據。

1 資料與方法

1.1 文獻檢索

“Interleukin-1”“IL-1”“IL-1ra”“IL-1α”“IL-1β”“multiple sclerosis”“gene”“polymorphisms” 等英文關鍵詞在Pubmed、Elseiver、Ovid數據庫進行檢索， “白介素-1”“多發性硬化”“基因”及“多態性”等中文關鍵詞在中國知網和萬方數據庫進行檢索，截至時間為2019年8月。同時采用手工檢索與文獻溯源的方法確保查全,所查文獻資料包含期刊、會議論文與碩博論文。通過以上途徑收集有關IL-1基因多態性與MS關系的所有病例對照研究。

1.2 納入與排除標準

納入標準：(1)文獻類型為有關MS與IL-1基因多態性的病例對照研究；(2)有提供病例組與對照組中IL-1各位點基因型的研究例數。對于多個重復報道的研究,將納入其中最近發表的或提供大樣本量的研究。排除標準:(1)重復研究；(2)對照組不符合HWE遺傳平衡；(3)數據描述或樣本資料描述不清,統計方法不當；(4)對照組缺失；(5)動物實驗研究；(6)摘要、綜述等。

1.3 文獻篩選與資料提取

由兩位研究者分別獨立按照納入與排除標準進行文獻篩選與資料提取，存在分歧時通過商議解決。獨立提取文獻資料主要包括:第一作者、發表時間、研究對象國籍、各基因型的位點與例數等。

1.4 統計學處理

采用STATA12.0統計軟件進行分析。對納入研究的對照組基因型分布進行HWE平衡檢驗；應用漏斗圖分析納入的文獻是否存在明顯的發表偏倚；計算各研究的IL-1基因的比值比(odds ratio,OR)值及其95%置信區間(confidence intervals,CI)；以Q檢驗對各研究結果進行異質性檢驗,若無異質性,則采用固定效應模型進行數據合并,若存在顯著異質性,則采用隨機效應模型法進行數據合并[6]。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 文獻檢索結果

共檢出符合標準的文獻23篇[7-29]，其中英文21篇，中文2篇。MS組3 531例，對照組3 850例，見表1。

表1 納入薈萃分析文獻的基本情況

續表1 納入薈萃分析文獻的基本情況

2.2 meta分析結果

在LLvs.22模型中，IL-1ra(VNTR)基因位點LL為MS的保護型基因(OR=0.819，95%CI：0.683～0.982，P=0.031)，而IL-1β(+3953)、IL-1α(-889)、IL-1β(-511)未見顯著性關聯(P>0.05),見表2。

表2 基因多態性與MS發病的關聯性分析

續表2 基因多態性與MS發病的關聯性分析

2.3 亞組分析結果

將人群按種族分為“歐洲人”與“亞洲人”，發現在IL-1ra(VNTR)LLvs.22模型中攜帶LL基因型是歐洲MS患者的保護性基因型(OR=0.773，95%CI：0.612～0.977，P=0.031);在IL-1α(-889)Cvs.T、CCvs.TT模型中攜帶C等位基因或CC基因型均是亞洲MS患者的風險性因素(OR=1.453，95%CI：1.204～1.755，P<0.001；OR=1.509，95%CI：1.026～2.220，P=0.037);在IL-1β(+3953)Cvs.T、CCvs.CT、CCvs.CT+TT與CC+TTvs.CT模型中攜帶C等位基因或CC基因型均是亞洲MS患者的保護性因素(OR=0.591，95%CI：0.459～0.762，P<0.001；OR=0.435，95%CI：0.283～0.670，P<0.001；OR=0.489，95%CI：0.346～0.692，P<0.001；OR=0.529，95%CI：0.351～0.797，P=0.002)。將人群按所在緯度分為“≤50°N”與“>50°N”，發現在IL-1α(-889)Cvs.T、CCvs.TT、CTvs.TT與CC+CTvs.TT模型中攜帶C等位基因、CC或CT基因型均是位于“>50°N”MS患者的保護性因素(OR=0.815，95%CI：0.695～0.957，P=0.012；OR=0.592，95%CI：0.405～0.866，P=0.007；OR=0.682，95%CI：0.470～0.990，P=0.044；OR=0.641，95%CI：0.448～0.918，P=0.015),見表3。

表3 種族與緯度對MS發病的影響

續表3 種族與緯度對MS發病的影響

2.4 發表偏倚評估

IL-1ra(VNTR)、IL-1β(+3953)、IL-1α(-889)、IL-1β(-511)中各等位基因與基因型的Egger′s分析顯示，漏斗圖對稱性均較好(P>0.05)，不存在發表偏倚。

3 討 論

近年來臨床流行病學研究表明，MS的發病率及臨床表型在不同種族和地域之間存在明顯差異[30]，研究MS致病基因多態性在不同人群分布特點對臨床治療前的診斷變得尤為重要。MS作為一種由CD4+T淋巴細胞介導的炎性免疫反應性疾病，在發病過程中離不開炎性細胞因子IL-1參與的免疫激活作用[31]。MS患者體內免疫被激活后，可促進炎性因子的大量釋放累積導致炎性反應，最終導致CNS髓鞘脫失、神經元變性。因此,影響IL-1功能的因素，如基因多態性，可能與MS的發病密切相關。

IL-1基因位于染色體2q13-14，包括兩種激動劑蛋白(IL-1α和IL-1β)和一種拮抗蛋白(IL-1ra)，本文納入的是IL-1α在-889(rs1800587)與+4845(rs17561)兩個位點，IL-1β在-511(rs16944)與+3953(rs1143634)的兩個位點，以及IL-1ra(VNTR)位點。國外關于IL-1基因多態性與MS關系的研究結果不盡一致，土耳其的一項研究提示IL-1β(-511)T等位基因及TT基因型是MS的風險因素[27]，而伊朗的一項研究提示IL-1β(-511)基因多態性與MS無關。本研究按照meta分析的要求[28]，全面檢索并收集已發表的IL-1基因多態性文獻進行整合分析，結果發現在IL-1ra(VNTR)基因位點中攜帶LL基因型患MS的風險更低，IL-1β(+3953)、IL-1α(-889)、IL-1β(-511)未見與MS有顯著關聯。然而，按種族與緯度進行亞組分析后，發現IL-1α(-889)C等位基因是亞洲MS患者的風險性因素，而IL-1β(+3953)C等位基因則是亞洲MS患者的保護性因素，且處于“>50°N”的攜帶IL-1α(-889)C等位基因的人群患MS概率更低，提示種族與地域分布對MS發病有一定影響。

由于本研究為二次研究，存在一定的局限性：(1)納入的23項研究中有研究樣本量較小，且按“種族”與“緯度”分組后，納入分析的關于“亞洲人”的文獻只有2篇，“>50°N”的報道只有3篇，結果存在一定的局限性；(3)由于人們對陽性結果的認可與陰性結果的忽視，有些陰性結果未被報道，致使IL-1突變基因型與MS遺傳易感的風險性被夸大；(4)本研究僅檢索了中文與英文數據庫，且檢索的數據庫較少，可能存在語種偏倚與數據庫偏倚。

本研究通過meta分析，對多個同類研究結果進行合并匯總，增大了樣本量,提高了檢驗效能，使得到的結果更接近真實情況。本研究結果發現在IL-1ra(VNTR)基因位點中攜帶LL基因型患MS的風險更低，是MS的保護型基因，具有一定的臨床參考價值，臨床醫生可以依據IL-1與MS的遺傳易感性進行基因檢測，為臨床確診MS提供一定的參考價值，但仍需更大樣本量的研究加以驗證。