T淋巴細胞亞群、血清TNF-α、IgE水平在肺炎支原體合并哮喘患兒表達意義

蔡利超

鞏義市人民醫院輸血科，河南 鞏義 451200

肺炎支原體是引起小兒呼吸道疾病的重要病原體之一，其好發于學齡前兒童。相關研究表明，約有3.3%～50%的哮喘與肺炎支原體相關，多認為肺炎支原感染促進了小兒支氣管哮喘的發展，而哮喘合并肺炎支原體感染的患兒大多存在免疫系統紊亂［1-2］。因此本研究對各組患兒T淋巴細胞亞群、血清TNF-α和IgE水平進行分析，探討其在哮喘合并肺炎支原體感染患兒中的表達意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取鞏義市人民醫院2018年5月—2019年10月期間收治的哮喘患兒70例（研究組），根據是否存在肺炎支原體感染又將研究組分為感染組（哮喘合并肺炎支原體感染）和非感染組（單純哮喘），其中感染組患兒37例，男25例，女12例；年齡1～12歲，平均年齡（4.77±1.57）歲；病程＜2周22例，病程≥2周15例；肺炎支原體感染輕癥（患兒血清檢測IgM抗體陽性，熱程＜15 d，肺部體征較輕，無明顯肺外并發癥）25例，肺炎支原體感染重癥（患兒血清檢測IgM抗體陽性，熱程≥15 d，肺部體征較嚴重，肺外并發癥≥2個）12例。非感染組33例，男22例，女11例；年齡1～13歲，平均年齡（4.80±1.60）歲；病程＜2周20例，病程≥2周13例。感染組與非感染組患兒在性別、年齡及病程方面比較無明顯差異（P＞0.05）。另外選擇同期與研究組性別、年齡相匹配的健康體檢兒童35例作為對照組，其中男24例，女性11例；年齡1～14歲，平均年齡（4.85±1.62）歲。納入標準：（1）感染組和非感染組患兒均符合《諸福棠實用兒科學》［3］中哮喘及肺炎支原體感染診斷標準；（2）年齡≤14歲；（3）無其他呼吸道疾病。排除標準：（1）有先天性心臟病史者；（2）有過敏史及其他變態反應病史者；（3）存在免疫功能缺陷者；（4）智力發育障礙或不能配合完成實驗者。患兒家屬對本研究知情且同意參加，本研究以上報我院醫學倫理委員會并獲得批準。

1.2 方法

T淋巴細胞亞群水平檢測：抽取患兒空腹靜脈血2 ml，標本檢測前使用乙二胺四乙酸二鉀抗凝進行抗體標記、細胞溶解處理，采用流式細胞術對患兒血液中的CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋指標進行檢測，檢測儀器采用美國貝克曼庫爾特公司提供的CytoFLEX流式細胞儀。

血清TNF-α、IgE水平檢測：抽取患兒靜脈空腹血3 ml，于3 000 r/min離心15 min后進行血清分離，然后放置于-20℃的冰箱中備測。TNF-α水平采用酶聯免疫吸附法進行測定，試劑盒由南京信帆生物技術有限公司提供；IgE水平采用放射免疫法測定，試劑盒由上海恒遠生物科技有限公司提供。以上各項均按照試劑盒說明書要求操作。

1.3 觀察指標

對比各組患兒T淋巴細胞亞群（CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋）、血清TNF-α和IgE水平。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 研究組與對照組T淋巴細胞亞群及血清TNF-α、IgE水平比較

與對照組相比，研究組CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋較低，CD8＋及血清TNF-α、IgE水平較高，差異具有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 研究組與對照組T淋巴細胞亞群及血清TNF-α、IgE水平比較（±s）

表1 研究組與對照組T淋巴細胞亞群及血清TNF-α、IgE水平比較（±s）

因素年齡性別手術時間糖尿病結石大小尿常規尿培養腎功能不全術中沖洗量術前抗菌藥物應用泌尿系統感染β P 0.636 1.783-1.924 1.587 2.168 1.762 1.531-1.814-0.682 2.159 1.182 SE 0.64 0.725-1.121 0.623 1.813 0.831 0.613 0.249 0.734 1.538 0.521 Wald 3.341 3.632 3.264 3.276 15.298 14.689 3.487 53.139 12.047 20.272 3.824 OR 1.218 1.146 0.128 1.185 4.297 0.583 2.158 0.183 1.201 5.176 3.824 0.018 0.003 0.037 0.005 0.028 0.003 0.014 0.000 0.045 0.004 0.020 95%CI 0.896～2.512 1.084～3.485 0.096～1.182 1.074～1.476 2.151～11.079 0.342～0.820 1.736～3.931 0.087～0.269 0.524～5.613 2.231～9.124 1.220～9.038

2.2 感染組和非感染組T淋巴細胞亞群及血清TNF-α、IgE水平比較

感染組CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋低于非感染組，CD8＋及血清TNF-α、IgE水平高于非感染組，差異具有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 感染組和非感染組T淋巴細胞亞群及血清TNF-α、IgE水平比較（±s）

表2 感染組和非感染組T淋巴細胞亞群及血清TNF-α、IgE水平比較（±s）

項目CD3＋（%）CD4＋（%）CD8＋（%）CD4＋/CD8＋TNF-α（μg/L）IgE（g/L）感染組（n=37）52.70±4.25 30.60±2.45 25.50±2.65 1.25±0.40 38.33±3.55 310.45±18.40非感染組（n=33）61.37±4.50 34.42±3.15 23.35±2.15 1.55±0.45 24.04±2.75 245.44±13.30 t P 8.287 5.695 3.698 2.953 18.659 16.758＜0.001＜0.001＜0.001 0.004＜0.001＜0.001

2.3 不同程度肺炎支原體感染患兒T淋巴細胞亞群及血清TNF-α、IgE水平比較

肺炎支原體感染輕癥CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋高于重癥，CD8＋及血清TNF-α、IgE水平低于重癥，差異具有統計學意義（P＜0.05），見表3。

表3 肺炎支原體感染輕、重癥T淋巴細胞亞群及血清TNF-α、IgE水平比較（±s）

表3 肺炎支原體感染輕、重癥T淋巴細胞亞群及血清TNF-α、IgE水平比較（±s）

項目CD3＋（%）CD4＋（%）CD8＋（%）CD4＋/CD8＋TNF-α（μg/L）IgE（g/L）輕癥（n=25）50.35±4.50 35.50±2.70 23.65±3.15 1.45±0.60 29.31±3.22 289.84±13.85重癥（n=12）45.75±4.05 28.83±2.12 26.89±2.95 1.04±0.43 50.26±3.65 428.45±20.70 t P 3.001 7.500 3.466 2.383 17.748 24.190 0.004＜0.001 0.001 0.022＜0.001＜0.001

3 討論

支氣管哮喘是由多種嚴重細胞及因子共同參與的氣道慢性變態反應性疾病，其臨床表現主要為反復發作的氣急、喘息、咳嗽、胸悶等癥狀，常在清晨及夜間發作［4］。支原體是一種特異性抗原，可通過速發及遲發型變態反應引起哮喘速發及遲發相反應，進而導致氣道發生變態反應炎癥［5］。陳連保等［6］研究發現，支氣管哮喘與支原體感染的肺炎遺傳易感性相似，從基因角度來看，說明支氣管哮喘的發展與支原體感染有著密切的聯系。

在機體諸多淋巴細胞中，T細胞具有參與和介導細胞免疫和調節機體免疫的功能，其主要分為CD4＋和CD8＋兩大亞群。其中CD4＋Th細胞可參與協助T、B細胞的免疫應答，CD8＋Th細胞可抑制CD4＋Th細胞的活性，間接阻礙B細胞的分化［7］。Th細胞分為Th1型和Th2型，Th1型的特性為分泌TNF-B、IL-2、IFN-r等促炎因子，能增強CD8＋Th細胞的毒性作用；Th2型則可產生IL-4、IL-5、IL-10等細胞因子，參與體液免疫應答的介導［8］。CD3＋分子可表達于成熟的T淋巴細胞表面，而CD4＋和CD8＋則不能同時表達于成熟T淋巴細胞的表面。CD3＋分子下降表示T淋巴細胞免疫功能降低；CD4＋減少表示B淋巴細胞產生的免疫球蛋白減少和細胞的免疫功能減弱；而CD3＋CD4＋/CD3＋CD8＋比值是機體免疫系統穩定的重要指標，該比值下降可導致免疫功能的下降［9-11］。本次研究結果中，研究組CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋比值低于對照組，感染組低于非感染組，感染輕癥低于感染重癥；而研究組CD8＋比值高于對照組，感染組高于非感染組，感染重癥高于感染輕癥；提示哮喘合并支肺炎原體感染患兒免疫功能處于抑制狀態，細胞免疫參與該病的發生和發展，原因可能在于支原體侵入后激活機體免疫系統，導致免疫平衡被打破，相關免疫指標發生異常改變，使免疫功能下降。

血清TNF-α主要調節免疫應答，促進細胞分化，其水平升高說明局部炎癥反應加重，通過機體的應激產生IgE并參與I型變態反應的介導，導致支氣管哮喘的癥狀加??；IgE在參與哮喘的發生中有重要作用，其在嗜酸性細胞和肥大細胞表面均有受體，IgE高表達會促進炎癥反應［12-13］。本次研究發現，研究組血清TNF-α、IgE水平高于對照組，感染組高于非感染組，感染重癥高于感染輕癥，說明哮喘的發生與血清TNF-α、IgE水平變化相關，肺炎支原體感染可激活炎癥反應，導致血清TNF-α、IgE水平升高，在哮喘的發病過程中起到重要作用。

綜上所述，T淋巴細胞亞群、血清TNF-α、IgE水平變化對哮喘合并肺炎支原體感染患兒有重要的評估意義。哮喘患兒在感染肺炎支原體時CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋比值會降低，CD8＋比值及血清TNF-α、IgE水平會增高，其異常程度與肺炎支原體感染程度有關。