腫瘤相關巨噬細胞因子檢測對胃腺癌生存期的臨床意義

張曉艷

河南省內黃縣人民醫院 456300

胃腺癌是我國消化系統腫瘤中發病率最高的疾病類型，根治性切除手術是目前治療該病的首選方案，研究表明術后腫瘤的殘余狀態和病理分期是影響術后患者預后的獨立危險因素，但對于患者術后生存周期的預測價值并不高[1-2]。近年來越來越多的研究證實，腫瘤相關巨噬細胞在腫瘤原發灶和轉移灶中的表現具有特異性，可通過促進腫瘤血管的形成介導腫瘤細胞免疫、增殖、轉移[3-5]。因此推測腫瘤相關巨噬細胞檢測可能與胃腺癌預后和生存有關。鑒于此，筆者選取既往研究中表現突出的CD68、CD163等巨噬細胞因子作為觀測對象，觀察在原發性胃腺癌患者中的陽性表達特點，以及對5年生存率的影響，旨在為建立早期術后生存周期預測體系提供理論依據。

1 資料和方法

1.1 一般資料 經我院醫學倫理委員會批準，選取2014年1—12月經我院行手術根治術治療的胃腺癌患者作為研究對象。納入標準：(1)確診時年齡≥18歲；(2)術前未接受輔助治療；(3)術后經病理學組織檢查確診；(4)有完整的術后門診或電話隨訪記錄。排除標準：(1)腫瘤轉移；(2)預計生存期<6個月；(3)術后接受他院治療方案或中醫藥治療者；(4)因其他疾病導致死亡者；(5)中斷隨訪者。本次研究共收入符合上述納排標準患者85例，其中男66例，女19例，年齡32～71歲，平均年齡(61.81±11.96)歲。

1.2 方法

1.2.1 手術方法：所有患者均接受手術根治術，食管癌行食管切除術，遠端胃癌行全腹胃切除術，對于晚期胃癌患者在進行胃切除術后進行淋巴結清掃，必要時再行脾切除術和(或)結腸切除術。術后6例患者接受輔助治療，其中4例接受氟嘧啶放化療，1例僅接受放療，1例僅接受化療。

1.2.2 研究方法：術后對患者原發腫瘤組織腫瘤分期、分化等級進行檢驗，并取核心組織采用免疫組織化學SP法對巨噬細胞因子CD68、CD163陽性表達情況進行分析，檢驗所需單克隆抗體均由沃卡威(北京)生物技術有限公司提供。CD163檢驗以400倍視野下50個視野范圍下計算陽性細胞數，陽性等級標準：(1)陽性細胞占比>50%為3分，陽性細胞數占比>10%，≤50%為2分，陽性細胞數占比>1%，≤10%為1分，陽性細胞數占比≤1%為0分。(2)染色強度：強陽性為3分，中等陽性為2分，弱陽性為1分，陰性為0分。CD68檢驗以400倍視野下50個視野范圍下計算陽性細胞數，陽性等級標準：(1)陽性細胞占比>50%為3分，陽性細胞數占比>25%，≤50%為2分，陽性細胞數占比≤25%為1分，無陽性細胞數為0分。(2)染色強度：強陽性為3分，中等陽性為2分，弱陽性為1分，陰性為0分。根據CD68和CD163陽性等級和染色強度評分之和評價其陽性表達水平，3分為低表達，4～5分為中等表達，6分為高表達。

1.2.3 分組：根據患者5年生存情況分為死亡組(62例)和生存組(23例)。以術后次日作為起始日，末次隨訪時間或死亡時間為終止計算生存期。

1.3 統計學方法 將所得數據錄入SPSS24.0軟件進行統計分析，計數資料以例表示，組間比較采用χ2檢驗；計量資料以(均數±標準差)表示，組間比較采用t檢驗。通過繪制生存曲線圖，采用Mantel-Cox分析法比較不同陽性表達水平對生存期的影響，以P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 死亡組和生存組患者臨床資料比較 單因素分析顯示，兩組患者在年齡、腫瘤分期、分化等級、殘留腫瘤狀態以及CD68、CD163表達水平上差異均具有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組臨床資料比較(n)

2.2 巨噬細胞因子與生存期的關系 85例患者術后生存期最短6個月，最長66個月，平均生存期34.6個月，中位生存期31個月。經Spearman相關性分析顯示，CD68+、CD163+表達水平與患者生存期均呈負相關(r=-0.399/-0.350，P<0.05)。

2.3 巨噬細胞因子不同表達水平下生存率分析 CD68+、CD163+不同表達水平下患者5年內生存率差異均具有統計學意義(P<0.05)，見表2及圖1、2。

表2 CD68+、CD163+不同表達水平下患者5年內生存情況

圖1 不同CD68表達下生存曲線

圖2 不同CD163表達下生存曲線

3 討論

本次研究結果表明，年齡、腫瘤分期、腫瘤細胞分化程度以及術后殘留腫瘤狀態依舊是影響胃腺癌患者術后生存期的重要因素，這與既往的臨床研究結果一致[6-7]。同時在對腫瘤相關巨噬細胞因子的檢驗中也顯示，CD68+、CD163+高表達與患者術后5年生存率有關[8-9]。腫瘤相關巨噬細胞是存在于實體腫瘤中的具有特異性的細胞因子，近年的研究認為，腫瘤相關巨噬細胞在促進腫瘤血管形成、腫瘤細胞浸潤、增殖、轉移等過程中均有直接的作用[10-11]。其中CD68是來自于腫瘤微環境中細菌產物及TNF-γ等刺激物介導產生的巨噬細胞，而CD163則來自白細胞介素加速因子介導的巨噬細胞，兩者由于來源的不同在腫瘤發生發展中也有著不同的作用，前者可增強細胞的吞噬作用，后者可防止細胞遭受氧化損傷。既往的研究以胃癌、乳腺癌等患者進行研究，并證實切除腫瘤組織中CD68+、CD163+的濃度明顯高于癌旁組織，并且與病變程度呈相關性[12-13]。雖然大量的研究證實CD68+、CD163+與腫瘤進展有關，但其檢測技術基于核心腫瘤組織病理檢測，因此并不能作為常規篩查或活體檢驗的依據。本研究通過收集患者生存期的隨訪資料，并與原發病灶腫瘤組織CD68+、CD163+檢驗結果進行分析發現，不同表達水平下患者的生存率差異明顯，其中高表達下患者的5年生存率明顯低于低表達患者，這在既往的臨床研究少有報道。近年國內學者同類研究結果均認為，腫瘤組織中腫瘤相關巨噬細胞因子陽性表達與腫瘤分期、浸潤深度以及淋巴轉移等密切相關，也證實陽性表達相比陰性表達患者近期和遠期生存率均有所降低，其中則包括CD68和CD163[14-15]。而本次研究結果進一步證實了在陽性表達下，高表達水平患者的生存率更低，這為評估患者術后生存期提供了新的依據。除此之外，與上述同類研究不同，本次研究以胃腺癌為研究對象，作為胃癌中發生率最高的疾病類型，其發生率可占95%以上。手術切除是目前治療胃腺癌的唯一手段，但絕大多數患者在手術時腫瘤已呈彌散性或轉移，即使是切除大部分或全部胃組織及其鄰近淋巴結，其預后效果也不盡人意，大大降低了患者術后的生存質量。因此早期評估術后生存期對于是否選擇手術或治療方案有著重要的指導作用。基于本次研究結果，筆者認為腫瘤組織CD68+、CD163+水平與生存期密切相關，通過比較術前活檢CD68+、CD163+水平與術后病理檢驗是否具有一致性，以及與預后的相關性可能為術前預判提供依據。

綜上所述，本研究認為腫瘤相關巨噬細胞CD68+、CD163+高水平表達是降低胃腺癌術后生存率的重要因素，可以此為基礎針對術前病理檢查及其預后做進一步研究。