鼻咽癌患者外周血循環腫瘤細胞與EBV-DNA水平的相關性研究

劉家豪，黃偉義，蔡永林，湯敏中，董良哲

（廣西壯族自治區梧州市紅十字會醫院，廣西 梧州 543002）

0 引言

鼻咽癌是臨床常見惡性腫瘤疾病，患者癥狀有鼻塞、涕中帶血、頭痛等[1]，腫瘤會對患者的視覺、聽覺神經造成影響，并損害腦神經的健康，還易發生轉移，導致患者死亡[2]。鼻咽癌患者治療期間，受到病痛、化療毒副反應等的影響，非常容易出現焦慮抑郁的情況。加強鼻咽癌患者的病情診斷和癥狀分析非常重要，除了常規的影像學檢測方法，還可以通過血清檢測來對患者病情加以了解，研究發現，檢查患者的外周血循環腫瘤細胞、EBV-DNA水平等可以及時觀察到患者體內有無腫瘤細胞和EB病毒，一般來說，EBV-DNA熒光定量檢測（EBV-DNA）檢驗值＜400是正常的，如果高則說明病毒復制[3]。EBV-DNA高可能與鼻咽癌有關，對于鼻咽癌的判斷具有重要意義。本次研究中，抽取100例鼻咽癌患者作為觀察對象，檢測分析患者的外周血循環腫瘤細胞和EBV-DNA水平，探究鼻咽癌患者外周血循環腫瘤細胞與EBV-DNA水平的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料。本研究中，將廣西壯族自治區梧州市紅十字會醫院在2019年4月至2020年4月收治的100例鼻咽癌患者作為觀察對象。基礎資料：選取的患者中男52例，女48例，年齡41.50～68.50歲，平均（55.00±33.23）歲。本研究納入標準：①確診為鼻咽癌的患者；②患者神志清晰并且自主簽署知情同意書；③患者在實驗期間配合相關數據調查統計；④患者無其他嚴重病癥或對實驗指標產生影響的疾病。排除以下患者：①有智力障礙、身體較差無法進行實驗觀察的患者；②未簽署知情同意書的患者；③中途停止接受觀察的患者。

1.2 方法。利用CTCBIOPSY?檢測系統，采用ISET技術過濾分離受檢者外周血，將分離后的濾膜采用瑞氏吉姆薩染色進行細胞形態學判定及采集圖像；再利用CD45免疫細胞化學技術進行排除法檢測，并進一步通過原位雜交技術檢測EBERs進行驗證，確定受檢外周血中鼻咽癌CTCs及其數量，同時檢測EBV-NDA。統計對比兩組觀察對象的外周血循環腫瘤細胞和EBV-DNA等的陽性率、臨床病理參數特征等。

1.3 統計學處理。產生的各項數據運用SPSS 19.0版本軟件實現統計分析工作，運用t檢驗驗證二元比較正態分布資料，應用方差分析功能驗證多項比較正態分布資料，如果SPSS 19.0給出P＜0.05的結果，表明各項數據比較具有統計學意義。

2 結果

2.1 鼻咽癌患者基礎資料分析。根據對鼻咽癌患者的資料分析得知，不同性別、年齡段患者的外周血循環腫瘤細胞陽性率，差異無統計學意義（P＞0.05），患者病理分期中T1和N1最為常見，詳見表1。

表1 鼻咽癌患者基礎資料分析

2.2 患者的EBV-DNA水平等檢測分析。本組患者中外周血循環腫瘤細胞和CTCs、EBV-DNA水平、臨床病理參數特征等，與常規正常值進行比較，差異有統計學意義（P＜0.05），詳見表2。

表2 兩組觀察對象的EBV-DNA水平等比較（±s）

表2 兩組觀察對象的EBV-DNA水平等比較（±s）

組別 EBV-DNA VCA-IgA CTCs鼻咽癌患者 7.4±0.5 525.3±10.6 28.5±2.3健康正常值 2.1±0.3 311.5±10.3 17.8±1.6 t 6.3856 105.2385 12.4850 P＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.3 外周血循環腫瘤細胞水平與患者生存率分析。研究發現，EBV-DNA＜500，CTCs=0，一年生存率是86.0%，500＜EBV-DNA＜10000，生存率為76.7%，EBVDNA＞10000，生存率為60.0%，患者的EBV-DNA，CTCs水平越高，生存率越低，詳見表3。

表3 外周血循環腫瘤細胞水平與患者生存率分析

3 討論

我國是鼻咽癌的高發地區，此病還存在有一定的遺傳現象，鼻咽癌主要是受到病毒（EB病毒）、環境（亞硝胺、性激素失調）等的影響[4]，最終在鼻咽部位形成腫瘤。鼻咽癌的危害非常大，許多患者需要接受手術、化療等治療，身體往往需要承受較大痛苦，許多患者在治療期間表現出情緒低落，治療依從性不高。我國的鼻咽癌患者存在一定的區域聚集性，在兩廣、湖南、福建等地的發生率非常高[5]。通常情況下，80%左右的鼻咽癌患者，可以經過針對性治療控制病情，延長患者的壽命。在對患者的病情進行監測的過程中，可以結合觀察臨床病理參數來分析患者病情，比如外周血循環腫瘤細胞、EBV-DNA水平等[6]。外周血循環腫瘤細胞會以不同的形態存在于人體的外周血中，可以表現為單個游離狀態，也可以聚集成團。外周血循環腫瘤細胞可以在人體隨著血液進入到淋巴系統，導致患者出現腫瘤細胞轉移的情況[7]。而EBV-DNA水平則是針對鼻咽癌患者的一種非常有效的檢測方法，主要是檢測EB病毒的DNA情況，如果檢測檢查結果是陽性，說明體內有eb病毒的感染，需要應用抗病毒的藥物進行治療的，EBV-DNA在醫學上是非洲淋巴細胞瘤病毒.EBV-DNA水平超過500份/mm時，預后明顯最差[8-9]。本次研究中，抽取100例鼻咽癌患者者作為觀察對象，檢測患者的外周血循環腫瘤細胞和EBV-DNA水平，對比探究鼻咽癌患者外周血循環腫瘤細胞與EBV-DNA水平的相關性。根據檢測結果分析，鼻咽癌患者中外周血循環腫瘤細胞和EBVDNA等的陽性率、臨床病理參數特征等，與普通健康者進行比較，具有顯著差異（P＜0.05）。通過評估鼻咽癌患者治療前的外周血中的循環腫瘤細胞數量及EBVDNA水平，有望為精準識別復發和轉移高危患者提高參考指標，從而有利于早期進行個體化治療，從而降低患者復發率和轉移轉移率，改善其預后。

綜上所述，鼻咽癌患的外周血循環腫瘤細胞與EBVDNA水平具有一定特征性，主要與T、M、N分期等有關，與性別、年齡、病理類型等的關系不大，可以作為臨床評判鼻咽癌的重要標準。