無錫地區沙門菌抗生素耐藥特征研究分析

鄒云眉

（無錫市新吳區疾病預防控制中心，江蘇 無錫 214100）

0 引言

沙門菌屬（Salmonella）是全球健康領域定義城市安全和耐藥傳播的重要指標菌。抗生素在臨床及養殖業的持續廣泛濫用，使沙門菌耐藥性越來越嚴重[1]。筆者通過對2017～2018年監測過程中分離出的307株沙門氏菌進行抗生素藥敏試驗，回顧性了解并分析本地區人群攜帶與感染優勢沙門菌的抗生素屬耐藥情況。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 菌株來源：本實驗所用307株沙門菌分離自2017至2018年本地區人群，其中220株分離自健康食品從業人員，87株分離至食源性感染腹瀉患者。所有菌株均已生化鑒定復核確認為沙門菌屬。質控菌株大腸埃希氏菌ATCC 25922。

1.1.2 主要儀器與試劑：AIM Vizion全自動藥敏試驗菌液接種判讀儀（Thermo Fisher Scientific公司，美國）；全自動菌液接種儀配套接頭及肉湯管（Thermo Fisher Scientific公司，美國）；比濁儀（梅里埃公司，法國）；革蘭氏陰性菌藥敏板（Thermo Fisher Scientific公司，美國）；血平板（上海科瑪嘉公司）；生物安全柜；恒溫培養箱。

1.2 方法

標準菌懸液制備：使用一次性無菌接種環，將復核鑒定后保存于40%BHI-甘油凍存管菌株中取出一環劃線接種于BHA平板，經37℃24 h培養復蘇，得到新鮮的純菌落，挑取單個菌落再次劃線轉接BHA平板37℃24 h培養純化。再次挑取單個純化菌落至3 mL去離子水，用經過校準的比濁儀調整菌液濁度至0.5麥氏單位濁度。本實驗共制備307管菌懸液。

藥敏板接種：取菌懸液50 ul加入至11 mLCAMHT稀釋肉湯試管中，試管加裝移液頭，連接全自動藥敏試驗菌液接種判讀儀的無菌加樣槽，充分混勻后，自動加樣，按照100 ul/孔加至藥敏板，置于恒溫恒濕培養箱內，37℃培養24 h。本實驗共接種307塊藥敏板。

陰性對照：每塊藥敏板設一孔陰性對照。自動加樣，100ul加至藥敏板H12孔（無抗菌素空白孔），作為陰性對照。

結果判讀：將藥敏板放入AIM Vizion全自動藥敏判讀試驗菌液接種判讀儀，使用判讀儀連接機算機，運行SWIN3.3系統，對藥敏板進行讀數與數據自動錄入，結果輸出。實驗者肉眼選定藥敏板每行（一種抗菌素）中菌懸液澄清（無細菌繁殖），并且抗菌素濃度為最低的一孔，讀取為每種抗菌素的最低抑菌濃度（minimal inhibitory concentration，MIC），選定結果由判讀儀自動讀入，由SWIN3.3系統根據美國臨床和實驗室標準化協會（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）的標準，結合腸桿菌科耐藥判定標準對藥敏結果進行判斷，結果：敏感（S）、中度敏感（I）、耐藥（R）。

以大腸埃希菌（ATCC 25922）菌株為質控菌株，依據美國臨床和實驗室標準化協會2019年抗生素敏感性測試操作標準質控范圍判斷藥敏板上的抗生素質量。

陰性對照結果判讀：藥敏板H12孔（無抗菌素空白孔），菌懸液渾濁。

2 結果

2.1 不同源沙門菌耐藥特征。健康者攜帶源與患者源分離到的沙門菌對四環素類、青霉素類、磺胺類、酰胺醇類的耐藥率相對較高，對碳青霉素烯類、頭孢類（除頭孢）、大環內酯類耐藥率相對較低。不同源沙門菌耐藥特征，見表1。

表1 無錫市不同來源沙門菌對14種抗生素的耐藥情況

2.2 沙門菌優勢血清型的抗生素耐藥特征。307株沙門菌共鑒定出46個血清型，優勢血清型分別為鼠傷寒占17.59%，山夫登堡占15.31%，腸炎沙門菌占8.47%，倫敦與阿貢納占6.19%，余血清型占比均低于5%。5種沙門菌優勢血清型的抗生素耐藥特征，見表2。

表2 無錫市5種非傷沙門菌優勢血清型對14種抗生素的耐藥情況

3 討論

本實驗結果顯示，無錫地區健康者攜帶源與患者源沙門菌株對青霉素類、四環素類、磺胺類等多種抗生素耐藥率相對較高，同時對3種以上抗生素耐藥的率分別為48.18%和65.52%。通過文獻檢索發現，無錫地區沙門菌抗生素耐藥情況與同期國內其他省份監測結果存在差異[2]。青霉素與喹諾酮類抗生素耐藥率高于美國[3]，這可能與各個國家與地區的臨床用藥管理、經濟發展水平及衛生條件有關。本實驗結果顯示，本地區人群攜帶與感染的沙門菌對碳青霉素烯類、頭孢類（除頭孢唑啉）、大環內酯類耐藥率低，對臨床用藥有一定參考意義[4-5]。

本實驗研究存在一定的局限性，一是僅收集到2017年至2018兩年的人群樣本，無法分析近年來人群攜帶或感染沙門菌抗生素耐藥性變化趨勢；二是未收集到無錫地區食品與環境中沙門菌菌株，無法檢測分析人群攜帶與感染沙門菌抗生素耐藥情況與本地區抗生素在動植物養殖中使用與環境污染關系分析。