外周血淋巴細(xì)胞免疫表型在惡性腫瘤患者中的表達(dá)及與預(yù)后的相關(guān)性研究

胡樂(lè)赟

菏澤市牡丹區(qū)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東菏澤 274000

在醫(yī)學(xué)上癌是指起源于上皮組織的惡性腫瘤，屬于惡性腫瘤常見(jiàn)的一類。 臨床研究表明，惡性腫瘤具有細(xì)胞分化、增殖異常、生長(zhǎng)失去控制，且伴有浸潤(rùn)性、轉(zhuǎn)移性等生物學(xué)特征，其發(fā)生是一個(gè)多因子、多步驟復(fù)雜的過(guò)程[1]。國(guó)外學(xué)者研究表明，惡性腫瘤的發(fā)生需要經(jīng)歷致癌、促癌、演進(jìn)3 個(gè)過(guò)程，普遍認(rèn)為與吸煙、感染、職業(yè)暴露、環(huán)境污染及不合理膳食等有關(guān)，影響患者健康、生活。 惡性腫瘤發(fā)病早期臨床癥狀缺乏典型，隨著病情不斷發(fā)展，將會(huì)引起腫塊、疼痛、潰瘍及出血等，錯(cuò)過(guò)最佳診療時(shí)機(jī)[2]。 惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與機(jī)體免疫系統(tǒng)功能狀態(tài)密切有關(guān)，且患者常伴有免疫抑制或損傷，腫瘤免疫的效應(yīng)機(jī)制通過(guò)細(xì)胞免疫反應(yīng)發(fā)揮作用。 因此，加強(qiáng)惡性腫瘤患者細(xì)胞免疫功能指標(biāo)測(cè)定有助于判斷患者病情、指導(dǎo)臨床治療[3-5]。國(guó)外學(xué)者研究表明，T 淋巴細(xì)胞亞群在惡性腫瘤的進(jìn)展、轉(zhuǎn)移中發(fā)揮了重要的作用，但是淋巴細(xì)胞所有亞型在整個(gè)腫瘤過(guò)程中變化研究較少。 因此，該研究選擇2018 年4 月—2019 年6 月惡性腫瘤患者 89 例作為研究對(duì)象、同期治療的良性腫瘤患者71 例、同期健康體檢者56 名為對(duì)象， 探討外周血淋巴免疫細(xì)胞表型在惡性腫瘤患者中的表達(dá)及與預(yù)后的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇該院惡性腫瘤患者89 例作為研究對(duì)象，設(shè)為觀察組，男 46 例，女 43 例；年齡 35～78 歲，平均（56.73±5.49）歲；病程 1～6 年，平均（3.49±0.41）年；腫瘤類型：呼吸系統(tǒng)癌52 例，胃腸系統(tǒng)癌18 例，生殖系統(tǒng)癌19 例；患者中，發(fā)生轉(zhuǎn)移29 例，未發(fā)生轉(zhuǎn)移60例；所有患者均給予常規(guī)方法治療，根據(jù)隨訪結(jié)果分為生存組與死亡組。 選擇同期治療的良性腫瘤患者71 例，設(shè)為對(duì)照 1 組，男 43 例，女 28 例；年齡 34～79歲，平均（57.37±5.53）歲；疾病類型：血管瘤 34 例，肝囊腫30 例，纖維瘤7 例。選擇同期健康體檢者56 名，設(shè)為對(duì)照2 組，男 34 名，女 22 名；年齡 31～80 歲，平均（58.12±5.56）歲。 3 組臨床資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）， 具有可比性。 該研究均獲醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者或家屬均簽署同意書(shū)。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合惡性腫瘤、良性腫瘤診斷標(biāo)準(zhǔn)，均經(jīng)手術(shù)組織檢查確診[6-7]；②均能完成外周血淋巴免疫細(xì)胞表型測(cè)定，且患者均可耐受。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并認(rèn)知功能異常、精神異常或血液系統(tǒng)疾病者[8-9]；②合并器質(zhì)性疾病、嚴(yán)重肝腎功能異常或伴有自身免疫系統(tǒng)疾病者[10]。

1.3 方法

①標(biāo)本采集。觀察組與對(duì)照1 組入院后次日早晨取外周空腹靜脈血5 mL， 對(duì)照2 組健康體檢當(dāng)天取外周靜脈血 5 mL，35 min 離心， 速度 3 000 r/min，血清分離后，放置在-80℃冰箱中，備用。②檢測(cè)方法。采用流式細(xì)胞儀 （美國(guó) Beckman-Coulter，EPICS0-XL）測(cè)定3 組T 淋巴細(xì)胞亞群、B 淋巴細(xì)胞及 NK 細(xì)胞（包括：CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3-CD19+、CD3-CD56+、CD3+CD56+）水平，在直方圖中框出淋巴細(xì)胞群，再分別計(jì)數(shù)5 000 個(gè)淋巴細(xì)胞中各標(biāo)記細(xì)胞在淋巴細(xì)胞中的百分率，比較3 組外周血淋巴免疫細(xì)胞表型表達(dá)水平；③相關(guān)性分析。 采用SPSS Pearson 相關(guān)性分析對(duì)惡性腫瘤患者預(yù)后與外周血淋巴免疫細(xì)胞表型進(jìn)行相關(guān)性分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 18.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以（）表示，組間差異比較以 t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)及百分比（%）表示，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3 組外周血淋巴免疫細(xì)胞表型表達(dá)水平比較

觀察組、對(duì)照1 組、對(duì)照2 組總T 淋巴細(xì)胞、CD3-CD19+水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義 （P＞0.05）； 觀察組CD3+CD4+水平低于對(duì)照1 組和對(duì)照2 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；CD3+CD8+、CD3-CD56+、CD3+CD56+高于對(duì)照1 組和對(duì)照2 組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05）；對(duì)照 1 組 CD3+CD4+水平低于對(duì)照 2 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05）；CD3+CD8+、CD3-CD56+、CD3+CD56+高于對(duì)照 2 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 3 組外周血淋巴免疫細(xì)胞表型表達(dá)水平比較[（），%]

表1 3 組外周血淋巴免疫細(xì)胞表型表達(dá)水平比較[（），%]

注：與對(duì)照 1 組比較，aP＜0.05；與對(duì)照 2 組比較，bP＜0.05

組別T 淋巴細(xì)胞CD3+CD4+CD3+CD8+CD3-CD19+觀察組（n=89）對(duì)照 1 組（n=71）對(duì)照 2 組（n=56）68.48±12.32 67.82±12.19 68.16±12.24（24.34±3.24）ab（32.59±5.61）b 38.42±6.79（34.59±6.41）ab（29.69±4.98）b 24.31±3.45 10.65±0.71 10.68±0.74 10.67±0.7 CD3-CD56+ CD3+CD56+（6.49±1.12）ab（4.91±0.69）b 3.29±0.51（17.59±4.21）ab（13.43±3.28）b 11.12±2.36

2.2 生存組與死亡組外周血淋巴免疫細(xì)胞表型表達(dá)水平比較

惡性腫瘤89 例患者治療后隨訪6 個(gè)月， 生存患者68 例，死亡患者21 例；生存組與死亡組總T 淋巴細(xì)胞、CD3-CD19+水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義（P＞0.05）；生存組CD3+CD4+水平高于死亡組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；CD3+CD8+、CD3-CD56+、CD3+CD56+低于死亡組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表 2。

表2 生存組與死亡組外周血淋巴免疫細(xì)胞表型表達(dá)水平比較[（），%]

表2 生存組與死亡組外周血淋巴免疫細(xì)胞表型表達(dá)水平比較[（），%]

組別生存組(n=68)死亡組（n=21）t 值P 值T 淋巴細(xì)胞CD3+CD4+CD3+CD8+CD3-CD19+67.96±12.26 68.11±12.28 1.295 0.692 30.25±3.16 22.12±2.14 7.493＜0.001 30.26±3.28 39.66±4.34 5.362＜0.001 10.61±0.69 10.62±0.71 0.125 0.516 CD3-CD56+ CD3+CD56+5.12±0.61 7.31±1.35 5.327＜0.001 13.29±3.86 19.52±4.02 8.325＜0.001

2.3 惡性腫瘤患者預(yù)后與外周血淋巴免疫細(xì)胞表型相關(guān)性

SPSS Pearson 相關(guān)性分析結(jié)果表明：惡性腫瘤患者預(yù)后與總T 淋巴細(xì)胞、CD3-CD19+水平無(wú)相關(guān)性（P＞0.05）；與 CD3+CD4+水平呈正相關(guān)性（P＜0.05）；與CD3+CD8+、CD3-CD56+、CD3+CD56+呈負(fù)相關(guān)性 （P＜0.05），見(jiàn)表 3。

表3 惡性腫瘤患者預(yù)后與外周血淋巴免疫細(xì)胞表型相關(guān)性

3 討論

臨床研究表明，惡性腫瘤能發(fā)生在不同年齡段人群中，且在中老年人群中發(fā)病率較高，可能是隨著患者年齡增長(zhǎng)，機(jī)體器官、功能減退，導(dǎo)致患者組織細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖能力退化，從而影響機(jī)體免疫功能，導(dǎo)致各種疾病發(fā)病率升高。T 淋巴細(xì)胞是淋巴細(xì)胞的重要組成部分，當(dāng)發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞、其他病原體后，將會(huì)迅速發(fā)揮攻擊，達(dá)到消除致病細(xì)胞的目的。因此，僅當(dāng)T 淋巴細(xì)胞間維持相互作用，方可維持機(jī)體免疫功能。 國(guó)內(nèi)學(xué)者[11]以良性腫瘤與惡性腫瘤化為對(duì)象，采用流式細(xì)胞儀測(cè)定患者淋巴細(xì)胞水平， 結(jié)果表明， 惡性組CD3+CD4+水平（25.11±3.31）%低于良性組（33.11±5.66）%；CD3+CD8+（35.12±6.46）%、CD3-CD56+（6.53±1.19）% 、CD3+CD56+（17.64±4.34）% 高 于 對(duì) 照 1 組CD3+CD8+（30.12±4.99）%、CD3-CD56+（4.78±0.59）%、CD3+CD56+（13.47±3.31）%（P＜0.05） 與該研究結(jié)果相符。 該研究中，觀察組 CD3+CD4+水平（24.34±3.24）%低 于 對(duì) 照 1 組 （32.59±5.61）%；CD3+CD8+（34.59±6.41）%、CD3-CD56+（6.49±1.12）%、CD3+CD56+（17.59±4.21）%高于對(duì)照 1 組 CD3+CD8+（29.69±4.98）%、CD3-CD56+（4.91±0.69）%、CD3+CD56+（13.43±3.28）%（P＜0.05）， 說(shuō)明惡性腫瘤患者常伴有外周血淋巴細(xì)胞免疫表型異常，在疾病的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮了重要的作用。 國(guó)外學(xué)者研究表明；細(xì)胞免疫功能狀態(tài)在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中能對(duì)病情發(fā)展變化、預(yù)后發(fā)揮重要的作用。 同時(shí)，通過(guò)對(duì)惡性腫瘤患者細(xì)胞免疫功能狀態(tài)而進(jìn)行抗腫瘤的免疫治療廣泛用于臨床。 CD3+CD8+表達(dá)水平能反映抑制性T 淋巴細(xì)胞，對(duì)靶細(xì)胞具有一定的殺傷作用，能抑制機(jī)體免疫應(yīng)對(duì)，從而在細(xì)胞免疫中發(fā)揮負(fù)調(diào)節(jié)作用；而CD3+CD4+、CD3+CD8+在正常人體中多處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)。 國(guó)內(nèi)學(xué)者[12]以惡性腫瘤患者為對(duì)象，對(duì)患者均完成12 個(gè)月隨訪，根據(jù)隨訪結(jié)果分為生存組與死亡組， 測(cè)定兩組淋巴細(xì)胞水平，結(jié)果表明：生存組CD3+CD4+水平（31.32±3.21）%高于死亡組（22.20±2.17）%（P＜0.05）；CD3+CD8+（32.51±3.32）%、CD3-CD56+（5.32±0.59）%、CD3+CD56+（14.11±3.93）%低于死亡組 CD3+CD8+（38.15±4.29）%、CD3-CD56+（7.54±1.39）%、CD3+CD56+（19.98±4.13）%（P＜0.001），與該研究結(jié)果相符。 該研究中，生存組CD3+CD4+水平（30.25±3.16）%高于死亡組（22.12±2.14）%（P ＜0.001）；CD3+CD8+（30.26 ±3.28）% 、CD3-CD56+（5.12±0.61）%、CD3+CD56+（13.29±3.86）%低于死亡組CD3+CD8+（39.66±4.34）%、CD3-CD56+（7.31±1.35）%、CD3+CD56+（19.52±4.02）%（P＜0.001）， 說(shuō)明外周血淋巴細(xì)胞免疫表型能預(yù)測(cè)患者預(yù)后， 能指導(dǎo)臨床治療。為了進(jìn)一步分析外周血淋巴細(xì)胞免疫表型與惡性腫瘤患者預(yù)后的關(guān)系，該研究中對(duì)二者進(jìn)行SPSS Pearson 相關(guān)性分析， 結(jié)果表明： 惡性腫瘤患者預(yù)后與CD3+CD4+水平呈正相關(guān)性 （P＜0.05）； 與 CD3+CD8+、CD3-CD56+、CD3+CD56+呈負(fù)相關(guān)性（P＜0.05）。因此，惡性患者加強(qiáng)外周血淋巴細(xì)胞免疫表型測(cè)定能反映患者疾病嚴(yán)重程度，評(píng)估患者預(yù)后，為臨床治療方案的調(diào)整提供依據(jù)。

綜上所述，外周血淋巴細(xì)胞免疫表型在惡性腫瘤患者中表達(dá)異常，其表達(dá)水平能反映患者疾病嚴(yán)重程度，且與患者預(yù)后存在相關(guān)性，可評(píng)估預(yù)后，指導(dǎo)臨床治療。