溫敏型鹽酸達克羅寧膠液的制備及質量評價

司佩茹，周紅建，楊顯偉，莫 菲，姚俊營，張繼業，李俊霞

（1.西安交通大學藥學院，陜西 西安 710061；2.遂成藥業股份有限公司，河南 新鄭 451150）

鹽酸達克羅寧，化學名為4-丁氧基-3-哌啶基苯丙酮鹽酸鹽。美國藥典第35 版已收錄本品，且該藥在我國臨床上已使用多年，尤其是鹽酸達克羅寧膠漿（商品名達己蘇）產品，內窺鏡插管操作中能夠減輕檢查患者的不適感[1-4]。但在臨床應用中偶見輕度頭痛、焦慮、冷熱感覺、麻木等不良反應，如兒童、老人用藥過量，偶會發生驚厥。研究表明[5]，涂抹達克羅寧膠漿可有效緩解全麻患者氣管鏡術后咽喉部疼痛，降低拔管不良反應發生率。利多卡因為局部麻醉藥，隨著劑量加大，麻醉作用或毒性增強。其膠漿劑常用于內窺鏡檢查，因此有學者研究鹽酸達克羅寧膠漿和利多卡因膠漿局部麻醉效果。Sha J 等[6]比較了柔性纖維喉鏡檢查中鹽酸達克羅寧膠漿和鹽酸利多卡因膠漿的效果，該隨機對照試驗結果表明鹽酸達克羅寧膠漿更有效。可能的原因為鹽酸達克羅寧在喉部黏膜有持續的作用時間，膠漿中的羧甲基纖維素鈉增大了黏度，延長了作用時間。但是相比于在一定溫度下溫敏型凝膠來說膠漿流動性較高，口服后停留時間較短，且難以覆蓋整個腔道內表面，致使麻醉效果降低。為保障良好的臨床應用效果，需要相對較高的給藥劑量，增加了產生不良反應的可能性[7，8]，同時鹽酸達克羅寧具有苦味，較高劑量會使患者產生不適感。溫敏型凝膠[9-11]是指在室溫下為流動性良好的液體，而當溫度升至體溫附近時，能夠迅速轉變為凝膠狀態的一類制劑。根據目前臨床應用的特點，將鹽酸達克羅寧制備成溫敏型凝膠產品，利用食管內壁與外界溫度的顯著差異，能夠在同等給藥劑量下，增加鹽酸達克羅寧的滯留時間，由于流動性減弱，相同給藥體積下，凝膠在食管壁的覆蓋面積也會相應增加。因此在同等體積和同等給藥劑量下，能夠顯著提高局部麻醉的效果，進而提高患者順應性。因此，溫敏型鹽酸達克羅寧凝膠的研發，可有效的提高患者術前準備效率，可以緩解臨床消化道內窺鏡檢查對患者帶來的刺激和不適感。本研究主要制備了一種溫敏型鹽酸達克羅寧膠液，分析其性質并應用所建立的分析方法對其進行質量評價和穩定性研究，現報道如下。

1 儀器與材料

1.1 儀器 Alliance HPLC 高效液相色譜系統（美國Waters 公司）；NDJ-9T 數字旋轉粘度計（上海方瑞儀器有限公司）；Thermo Scientific 加熱磁力攪拌器（賽默飛世爾科技中國有限公司）；梅特勒-托利多Five Easy Plus pH 計（梅特勒-托利多上海儀器有限公司）；PL1502E 電子天平（梅特勒-托利多儀器上海有限公司）；ATX124 分析天平（日本島津公司）；DF-101S 集熱式恒溫加熱器（鄭州科豐儀器設備有限公司）；BIO-DL 移液器（Genex Beta 寶予德中國有限公司）；LHH-150GSP 藥品穩定性試驗箱（上海一恒科學儀器有限公司）；0.45 μm 過濾器，天津市科億隆實驗設備有限公司。

1.2 材料 鹽酸達克羅寧對照品（100423-201102），中國食品藥品檢定研究院；鹽酸達克羅寧原料藥，河南精康制藥有限公司；達己蘇-鹽酸達克羅寧膠漿，揚子江藥業集團有限公司；泊洛沙姆407，泊洛沙姆188，巴斯夫（中國）有限公司；苯甲酸鈉，上海邁瑞爾化學技術有限公司；乙腈、甲酸，色譜級，科密歐化學試劑有限公司；其余試劑均為分析純。

2 方法

2.1 溫敏型鹽酸達克羅寧膠液的制備

2.1.1 處方 鹽酸達克羅寧10.0 g，泊洛沙姆188 5.0 g，泊洛沙姆407 25.0 g，苯甲酸鈉0.1 g，純化水加至1000 ml。

2.1.2 制備工藝 稱取10.0 g 鹽酸達克羅寧原料藥，溶于400 ml 純化水中，得鹽酸達克羅寧溶液；另取400 ml 純化水慢慢加入精密稱定好的5.0 g 泊洛沙姆188 25.0 g 泊洛沙姆407，置于4 ℃冰箱待溶脹完全后取出至環境溫度，再與鹽酸達克羅寧溶液混合均勻，加入0.1 g 苯甲酸鈉，加純化水至1000 ml，攪拌均勻即得。

2.2 含量測定方法[12-14]

2.2.1 溶液制備 對照品溶液：精密稱取鹽酸達克羅寧對照品10.0 mg，置于10 ml 容量瓶中，0.01 mol/L鹽酸溶解，混勻后用0.45 μm 過濾器過濾，續濾液即為1.0 mg/ml 的對照品儲備液。供試品溶液：精密稱取溫敏型鹽酸達克羅寧膠液1.0 g，置于100 ml 容量瓶中，流動相稀釋至刻度，混勻后用0.45 μm 過濾器過濾，取續濾液作為供試品溶液。陽性對照溶液：精密稱取鹽酸達克羅寧膠漿1.0 g，置于100 ml 容量瓶中，流動相稀釋至刻度，混勻后用0.45 μm 過濾器過濾，取續濾液作為陽性對照溶液。陰性對照溶液：配制不含主藥的泊洛沙姆188-泊洛沙姆407 空白膠液，按上述供試品溶液配制方法操作，得陰性對照溶液。

2.2.2 色譜條件 Waters Alliance 2695 高效液相色譜系統配備四元梯度泵、自動進樣器、柱溫箱及二極管陣列檢測器；Titank Hilic 親水色譜柱（5 μm，250 mm×4.6 mm）；流動相：乙腈-1‰ 甲酸溶液=50∶50（V∶V）；流速：1.0 ml/min；柱溫：25 ℃；檢測波長：282 nm；進樣量：20 μl。

2.2.3 專屬性試驗 將對照品溶液、供試品溶液、陽性對照溶液、陰性對照溶液分別進樣測定，觀察陰性對照溶液在鹽酸達克羅寧色譜峰附近有無雜質峰干擾。

2.2.4 線性范圍 精密量取對照品儲備液，分別稀釋至濃度為10、30、60、90、120、150 μg/ml 的溶液，按2.2.2 項下色譜條件分析，以峰面積（y）對進樣濃度（x）進行回歸。

2.2.5 精密度及準確度試驗 分別配制低（80 μg/ml）、中（100 μg/ml）、高（120 μg/ml）3 個濃度的對照品溶液，每個濃度在同一天內連續進樣5 次，測定日內精密度；每個濃度分別于1、2、3、4、5、6 d 各進樣5 次進行測定，測定日間精密度。

2.2.6 回收率試驗 精密量取不含主藥的泊洛沙姆188-泊洛沙姆407 空白膠液1.0 g 于100 ml 容量瓶中，分別加入已知量的鹽酸達克羅寧對照品溶液，加流動相至刻度，得低（80 μg/ml）、中（100 μg/ml）、高（120 μg/ml）3 個濃度，每個濃度測定3 次。

2.3 穩定性評價 放置在溫度（40±2）℃、相對濕度（75±5）%的藥品穩定性試驗箱下，試驗前取樣1 次，在試驗期間第1、2、3、6 個月末各取樣1 次，考察指標分別為外觀、膠凝溫度、黏度、pH 值及含量，評價其穩定性。

2.3.1 外觀 黑色背景下觀察凝膠狀態、色澤、光澤度，無色透明為正常狀態。

2.3.2 膠凝溫度測定 采用倒置法。將溫敏型鹽酸達克羅寧膠液加入西林瓶，插入溫度傳感器，然后置于25.0 ℃恒溫水浴鍋，再以每隔0.5～1.0 ℃/min 上升，每隔1 ℃后恒溫2 min，將西林瓶倒置，觀察凝膠5 s內是否流動；若流動，繼續升溫，至液面流動緩慢后每隔0.1 ℃后恒溫2 min，繼續倒置，直至不再流動，若5 s 內不再流動，此時溫度即為膠凝溫度。每組平行測定3 次。

2.3.3 黏度測定 25 ℃時選用2 號轉子，轉速100 rpm，動力黏度應不大于200 mPa·s；35 ℃時選用4 號轉子，轉速50 rpm，動力黏度應不小于70 Pa·s。

2.3.4 pH 值測定 取凝膠樣品1.0 g，加純化水10 ml稀釋后測定，pH 值應在4.5～6.5。

3 結果

3.1 含量測定方法學驗證

3.1.1 專屬性 鹽酸達克羅寧在確定的色譜條件下峰型良好，基質對鹽酸達克羅寧樣品測定沒有干擾，此方法專屬性良好，見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

3.1.2 標準曲線 回歸方程為：y=33595 x-12228，相關系數：r=0.9999(n=3)，結果表明鹽酸達克羅寧在10～150 μg/ml 濃度范圍內，濃度（x）與峰面積（y）呈現良好的線性關系，可依此進行質量測定。

3.1.3 精密度及準確度試驗 3 個濃度的質控樣品精密度及準確度試驗結果見表1，測得鹽酸達克羅寧實際濃度與理論濃度偏差以及相對標準偏差皆滿足要求，說明本方法精密度及準確度良好，滿足測定要求。

表1 精密度及準確度測定結果（n=5）

3.1.4 回收率試驗 回收率試驗結果見表2 所示，溫敏型鹽酸達克羅寧膠液樣品處理方法回收率滿足測定要求。

3.1.5 樣品含量測定 溫敏型鹽酸達克羅寧膠液樣品測得的平均含量為9.93 mg/ml，RSD=1.39%（n=6）。

3.2 穩定性評價 試驗前、試驗第1、2、3 及第6 個月末取得的樣品考察項目：外觀、膠凝溫度、黏度、pH值及含量見表3。結果表明，溫度（40±2）℃、相對濕度（75±5）%的條件下，6 個月內溫敏型鹽酸達克羅寧膠液外觀及含量穩定，膠凝溫度、黏度、pH 值稍有變化但都在要求范圍內。

4 討論

鹽酸達克羅寧是一種起效快、毒性小的常用的局部麻醉藥，能阻斷各種神經沖動或刺激的傳導，抑制觸覺和痛覺。其毒性較利多卡因低，局部麻醉作用迅速且較持久，對皮膚、黏膜穿透力強，主要應用于黏膜麻醉和皮膚麻醉，具有止痛、止癢、殺菌的作用。但是有刺激性，不宜作注射麻醉和浸潤麻醉用，只供外用，僅有幾種傳統的外用制劑（如洗劑、乳膏劑等）和口含制劑（如膜劑、口服乳劑、膠漿劑等），多用于臨床上消化道內鏡和纖維支氣管鏡檢查時黏膜表面麻醉及氣管插管操作時涂抹氣管導管即喉鏡、氣管鏡、胃腸鏡等檢查前的準備，也用于局部止痛止癢、燒傷、潰瘍、褥瘡等。

鹽酸達克羅寧經典的含量測定方法有銀量法、中和法。但是隨著制劑技術的不斷發展，制劑處方中輔料等成分也越來越復雜，用上述方法已無法排除制劑中其余成分對達克羅寧含量測定的干擾，且其操作不便、耗時、可重復性較差，所以新的檢測手段應運而生，如紫外分光光度法、高效液相色譜法，尤其是HPLC 法，該方法操作簡便快速、準確度高、靈敏度高、選擇性高等特點，且改變流動相極性使樣品各組分在最佳條件下能夠分離，可滿足鹽酸達克羅寧制劑質量控制的要求。

本研究制備了溫敏型鹽酸達克羅寧膠液，建立了高相液相色譜法，該法操作簡便、精密度及準確度高，可進行溫敏型鹽酸達克羅寧膠液質量控制和穩定性研究。穩定性加速試驗證明，溫敏鹽酸達克羅寧凝膠外觀性狀沒有發生變化，主藥含量無明顯變化、pH 保持在要求范圍內，并且溫敏特性也并未發生明顯改變，證明了其質量穩定性，具有成為臨床用藥的特性。

使用泊洛沙姆188 和泊洛沙姆407[15]作為膠液基質安全性好，制成的鹽酸達克羅寧溫敏膠液比膠漿等制劑在腔道內表面保留時間更長，局部濃度高，麻醉效果明顯。在制備凝膠基質時，應將泊洛沙姆188 和泊洛沙姆407 均勻撒在水面，置于4 ℃冰箱使其充分溶脹后攪拌，防止產生不溶性膠團。使用苯甲酸鈉為抑菌劑，成本較低，相同抑菌效果下成本低于山梨酸鉀；其次用量少，因此對人體毒副作用大幅降低；再者其抑菌范圍廣，且隨著酸度的增高其殺菌、抑菌效力增強，綜合考慮其更適合用于溫敏鹽酸達克羅寧膠液。鹽酸達克羅寧堿性條件下不穩定，在配制供試品溶液時，溶解及稀釋應在弱酸性環境中進行。

本研究制備的溫敏型鹽酸達克羅寧膠液處方可進一步優化，加入黏度調節劑如羧甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素改善黏度增加鹽酸達克羅寧在腔道內的滯留時間以提高麻醉效果，加入醫用消泡劑如聚氧乙烯聚氧丙烯季戊四醇醚去除腔道內泡沫使得腔道檢查更加清晰，加入矯味劑如阿司帕坦、甜菊苷等改善口感提高患者順應性，加入助溶劑如聚山梨酯-80（乙醇在制劑中長期放置易于揮發）更好的增加鹽酸達克羅寧的溶解度。

綜上所述，本制劑制備工藝簡單、所采用的輔料生物相容性良好，用于上消化道內窺鏡檢查時的喉頭麻醉和潤滑，在同等給藥體積條件下，滯留時間和覆蓋面積比大幅增加，具有藥效發揮快、麻醉效果強等特點，能提高患者的依從性，有望成為新型局部麻醉制劑。