萎縮性胃炎Hp感染與血清PGR、OPN及胃粘膜G細(xì)胞數(shù)量的關(guān)系

仇瑞莉，胡威，劉江波

（1.南陽(yáng)醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校第一附屬醫(yī)院消化內(nèi)科，河南 南陽(yáng) 473000；2.鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院消化內(nèi)科，河南 鄭州 45000 0；3.南陽(yáng)市中心醫(yī)院心血管內(nèi)科，河南 南陽(yáng) 473000）

萎縮性胃炎是臨床常見(jiàn)消化系統(tǒng)疾病,主要是幽門(mén)螺旋桿菌感染導(dǎo)致,有報(bào)道指出萎縮性胃炎是胃癌癌前狀態(tài),萎縮程度與部位同胃癌發(fā)生具有重要的關(guān)聯(lián),而且慢性萎縮性胃炎的發(fā)病率呈現(xiàn)明顯升高趨勢(shì),早期開(kāi)展對(duì)萎縮性胃炎篩查尋找敏感性高、特異性強(qiáng)的的診斷標(biāo)記物對(duì)于明確患者病變程度和避免惡性腫瘤發(fā)生具有重要意義[1]。常規(guī)的臨床檢查方法是采取胃鏡等有創(chuàng)手段，患者苦痛大，操作復(fù)雜,近年來(lái)血清胃蛋白酶原在臨床篩查萎縮性胃炎方面優(yōu)勢(shì)明顯，可以了解患者胃黏膜狀態(tài)，而且同患者病情嚴(yán)重性具有密切關(guān)系,對(duì)早期發(fā)現(xiàn)并診斷胃癌具有重要價(jià)值,骨橋蛋白則是具有多種生物學(xué)活性的磷酸糖蛋白,在惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起到重要作用,胃黏膜G細(xì)胞是人體最重要的內(nèi)分泌細(xì)胞，可以分泌胃泌素增強(qiáng)黏膜屏障作用，而且有報(bào)道指出其濃度與幽門(mén)螺旋桿菌感染有一定關(guān)聯(lián)[2]。本研究分析了萎縮性胃炎患者幽門(mén)螺桿菌（Hp）感染與患者血清胃蛋白酶原比值（PGR）、骨橋蛋白（OPN）及患者胃粘膜中G細(xì)胞數(shù)量變化的關(guān)系,以期為臨床提供指導(dǎo)和依據(jù)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 隨機(jī)選取2016年1月至2018年12月就診于我院消化內(nèi)科的慢性胃炎患者，根據(jù)胃鏡及病理結(jié)果，將確診的慢性萎縮性胃炎90例患者作為慢性萎縮性胃炎組（CAG組），將確診的慢性非萎縮性胃炎且HP感染陰性的90例患者作為對(duì)照組。CAG組，年齡32～75歲，平均47.4±10.6歲，男49例、女41例；Hp感染陽(yáng)性58例、Hp感染陰性32例，病變程度：輕度萎縮20例、中度萎縮47例、重度萎縮23例。對(duì)照組,年齡28～75歲,平均45.7±12.0歲,男44例、女46例。兩組研究對(duì)象年齡、性別比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。入選標(biāo)準(zhǔn)：⑴慢性萎縮性胃炎患者的診斷及病情標(biāo)準(zhǔn)參考《中國(guó)慢性胃炎共識(shí)意見(jiàn)（2012年，上海》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)；⑵患者年齡范圍19～75歲；⑶均經(jīng)過(guò)胃鏡取活組織經(jīng)病理學(xué)檢查證實(shí)；⑷本研究符合《赫爾透辛基宣言》相關(guān)倫理及保密原則。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴胃癌患者；⑵排除合并有消化性潰瘍、食管胃底靜脈曲張、消化道腫瘤、消化道出血及穿孔、嚴(yán)重的肝腎功能損傷及心肺疾病、嚴(yán)重的感染性疾病；⑶胃穿孔、腸道梗阻、消化道大出血；⑷嚴(yán)重的肝腎功能及感染性疾病患者。

1.2 血清PGⅠ、PGⅡ、OPN水平檢測(cè)方法 抽取患者空腹靜脈血5ml，2500r/min離心20min分離血清待檢,采用膠乳增強(qiáng)免疫比濁法測(cè)定PGⅠ、PGⅡ、PGR濃度變化，采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定患者OPN濃度，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，試劑由南京森貝伽生物科技有限公司提供。

提取患者胃黏膜組織采取石蠟切片和水化，加入50μl過(guò)氧化酶阻斷溶液試劑A孵育10min，緩沖液沖洗后加入50μl非免疫性動(dòng)物血清試劑B孵育10min,緩沖液沖洗后加入50μl第一抗體即胃泌素抗體孵育1h，緩沖液沖洗后加入50μl生物素標(biāo)記第二抗體試劑C孵育10min，緩沖液沖洗后加入50μl鏈霉素抗生物素-過(guò)氧化物酶溶液孵育10min，加入100μl新鮮配制的DAB顯影觀察。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用美國(guó)IBM SPSS公司的統(tǒng)計(jì)軟件包SPSS21.0版本對(duì)本研究的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，采用表示符合正態(tài)分布的計(jì)量資料，兩組間分析采用t檢驗(yàn)、三組間分析采用單因素方差分析法；計(jì)數(shù)資料組間分析采用χ2檢驗(yàn)；P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清PGⅠ、PGⅡ、PGR、OPN水平及胃粘膜組織中的G細(xì)胞數(shù)量比較CAG組患者的血清OPN水平高于對(duì)照組（P<0.05）,CAG組患者的血清PGⅠ、PGR水平及胃粘膜組織中的G細(xì)胞數(shù)量低于對(duì)照組（P<0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩組血清PGⅠ、PGⅡ、PGR、OPN水平及胃粘膜組織中的G細(xì)胞數(shù)量比較（

表1 兩組血清PGⅠ、PGⅡ、PGR、OPN水平及胃粘膜組織中的G細(xì)胞數(shù)量比較（

組別 n PGⅠ（ng/ml） PGⅡ（ng/ml） PGR OPN（ng/ml） G細(xì)胞（個(gè)/HP）CAG組對(duì)照組t值P值90 90 71.7±13.2 120.8±19.5-19.781 0.000 15.1±5.1 14.0±4.9 1.476 0.142 4.40±0.98 8.63±1.44-23.038 0.000 50.9±11.3 38.6±9.4 7.939 0.000 55.4±11.9 81.2±16.3-12.128 0.000

2.2 不同Hp感染結(jié)果的CAG組患者血清PGⅠ、PGⅡ、PGR、OPN水平及胃粘膜組織中的G細(xì)胞數(shù)量比較Hp感染陽(yáng)性的CAG患者的血清OPN水平高于Hp陰性患者（P<0.05）,Hp感染陽(yáng)性的CAG患者的血清PGⅠ、PGR水平及胃粘膜組織中的G細(xì)胞數(shù)量低于Hp陰性患者（P<0.05）。見(jiàn)表2。

表2 不同Hp感染結(jié)果的CAG組患者血清PGⅠ、PGⅡ、PGR、OPN水平及胃粘膜組織中的G細(xì)胞數(shù)量比較（）

表2 不同Hp感染結(jié)果的CAG組患者血清PGⅠ、PGⅡ、PGR、OPN水平及胃粘膜組織中的G細(xì)胞數(shù)量比較（）

Hp感染結(jié)果 n PGⅠ（ng/ml） PGⅡ（ng/ml） PGR OPN（ng/ml） G細(xì)胞（個(gè)/HP）+-58 32 t值P值64.8±11.4 84.0±10.3-7.908 0.000 15.2±5.0 14.8±4.8 0.368 0.713 4.39±0.74 5.68±0.91-7.286 0.000 53.7±10.8 47.5±8.6 2.793 0.006 51.2±10.6 62.8±9.4-5.168 0.000

2.3 不同病情程度的CAG組患者血清PGⅠ、PGⅡ、PGR、OPN水平及胃粘膜組織中的G細(xì)胞數(shù)量比較 胃粘膜輕度、中度及重度萎縮的CAG患者的血清OPN水平在三組間呈逐漸升高的趨勢(shì)（P<0.05），胃粘膜輕度、中度及重度萎縮的CAG患者的血清PGⅠ、PGR水平及胃粘膜組織中的G細(xì)胞數(shù)量呈逐漸降低的趨勢(shì)（P<0.05）。見(jiàn)表3。

表3 不同病情程度的CAG組患者血清PGⅠ、PGⅡ、PGR、OPN水平及胃粘膜組織中的G細(xì)胞數(shù)量比較（）

表3 不同病情程度的CAG組患者血清PGⅠ、PGⅡ、PGR、OPN水平及胃粘膜組織中的G細(xì)胞數(shù)量比較（）

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3 討論

近年來(lái)我國(guó)慢性萎縮性胃炎的發(fā)病率逐年升高，已成為消化系統(tǒng)最為常見(jiàn)的疾病，影響患者身心健康和生活質(zhì)量，本病發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，具體的發(fā)病原因并不明確，考慮和幽門(mén)螺桿菌感染、膽汁反流、免疫因素、血管活性因子及細(xì)胞因子改變等有關(guān)[3]。Hp感染屬于世界范圍內(nèi)最為常見(jiàn)的細(xì)菌感染之一，通過(guò)成功治療Hp可以有效防治消化性潰瘍、預(yù)防胃癌發(fā)生，研究顯示幽門(mén)螺旋桿菌感染同慢性胃炎、消化性潰瘍發(fā)病關(guān)系密切，伴隨著年齡增加患者幽門(mén)螺旋桿菌檢出率呈現(xiàn)升高趨勢(shì),尤其在老年人群中Hp檢出率可高達(dá)95%，研究顯示Hp可以分泌多種不同功能酶，尿素酶可以反應(yīng)后產(chǎn)生氨,對(duì)胃黏膜上皮細(xì)胞造成損傷，而且Hp具有很強(qiáng)的黏附活性,同胃黏液中糖蛋白緊密結(jié)合后破壞了胃黏膜屏障功能[4]。萎縮性胃炎主要的發(fā)病原因臨床認(rèn)為是幽門(mén)螺旋桿菌感染導(dǎo)致，Hp的粘附會(huì)造成腺體出現(xiàn)萎縮,同時(shí)幽門(mén)螺旋桿菌可以讓尿素酶生成氨，同時(shí)炎癥細(xì)胞能生成自由基、蛋白酶均會(huì)破壞細(xì)胞,這些因子的產(chǎn)生會(huì)在體內(nèi)發(fā)生交叉效應(yīng)，最后加快了腺體的萎縮與破壞[5]。幽門(mén)螺旋桿菌在致病過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生尿素酶,造成尿素緩慢水解，產(chǎn)生的氨會(huì)對(duì)胃黏膜造成直接損傷，當(dāng)機(jī)體持續(xù)被其感染后，便可以從最初的淺表胃炎，逐漸過(guò)渡到萎縮性胃炎，甚至出現(xiàn)不典型增生、腸上皮化生等現(xiàn)象[6]。目前臨床主要通過(guò)徹底消除幽門(mén)螺旋桿菌感染來(lái)改善胃黏膜慢性炎癥,以有效逆轉(zhuǎn)胃黏膜萎縮、腸上皮化生及不典型增生，阻斷癌前病變進(jìn)展[7]。目前臨床對(duì)于早期診斷萎縮性胃炎并明確患者病理變化對(duì)評(píng)估患者疾病進(jìn)展情況以及預(yù)后具有重要意義,傳統(tǒng)的通過(guò)病理學(xué)檢查方法重復(fù)性差，而且屬于有創(chuàng)操作，患者耐受性降低，因此尋找可靠的血清學(xué)指標(biāo)一直是臨床研究的熱點(diǎn)[8]。

胃蛋白酶原屬于胃蛋白酶前提物質(zhì),成熟后能夠分解胃內(nèi)食物中的蛋白,胃蛋白酶原主要是人體的胃黏膜腺體細(xì)胞所分泌，PGI為胃底腺頸黏液細(xì)胞與主細(xì)胞所分泌,在胚胎胃黏膜中高度表達(dá)[9]；PGII則還可以由十二指腸腺與幽門(mén)腺分泌,胃蛋白酶原會(huì)在分泌后進(jìn)入到腺腔內(nèi),經(jīng)胃液活化形成胃蛋白酶，而胃蛋白酶則很少進(jìn)入血液循環(huán)，因此可以通過(guò)其濃度評(píng)估胃損傷程度與功能變化情況[10]。PG I、PGII及PGR能夠?qū)ξ葛つのs情況進(jìn)行反應(yīng)，胃蛋白酶原多數(shù)來(lái)自于胃黏膜，當(dāng)黏膜發(fā)病后分泌胃蛋白酶原細(xì)胞病變導(dǎo)致人體血清中上述指標(biāo)濃度變化，黏膜萎縮范圍越廣泛則血清中PG含量升高幅度越大[11]。OPN則是具有多種功能的分泌型鈣結(jié)合磷酸化糖蛋白,其羧基端含有特異可以同細(xì)胞黏附的序列,通過(guò)與多種受體結(jié)合進(jìn)行信號(hào)傳遞，促進(jìn)了細(xì)胞發(fā)生趨化、黏附與遷移[12]。研究顯示幽門(mén)螺旋桿菌感染胃黏膜組織中OPN顯著升高，感染程度越重其濃度越高,主要是由于炎癥介導(dǎo)單核細(xì)胞與巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)增多造成了OPN分泌增加,因此提示了OPN在萎縮性胃炎發(fā)病并朝向惡性腫瘤演變的過(guò)程中起到了協(xié)同作用[13,14]。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)證實(shí)人體胃酸主要是胃壁細(xì)胞分泌,受到多種胃腸激素調(diào)節(jié)，胃G細(xì)胞則主要分泌上述激素，在人體胃竇部黏膜與腺體分布大量的胃G細(xì)胞,一般呈現(xiàn)錐形或卵圓形，G細(xì)胞可以分泌胃泌素刺激壁細(xì)胞胃泌素受體造成胃酸分泌增多,同時(shí)還可以刺激人體細(xì)胞分泌組胺,激活了壁細(xì)胞氫離子受體導(dǎo)致泌酸增加，促進(jìn)了胃黏膜增生過(guò)程[15,16]。目前研究發(fā)現(xiàn)幽門(mén)螺旋桿菌一方面能夠誘導(dǎo)PG基因表達(dá)造成胃蛋白酶原分泌增加，胃黏膜發(fā)生炎癥反應(yīng)，同時(shí)可以減少胃G細(xì)胞數(shù)量,減弱了對(duì)于胃酸和胃蛋白酶原分泌的抑制作用,造成體內(nèi)PG濃度升高；另一方面幽門(mén)螺旋桿菌導(dǎo)致的炎癥反應(yīng)會(huì)造成壁細(xì)胞破壞，萎縮性胃炎逐漸形成，隨著病情進(jìn)展胃酸降低，體內(nèi)形成惡性循環(huán)導(dǎo)致胃腺體萎縮引發(fā)PG分泌增加造成幽門(mén)腺化生,而且還可以刺激胃竇部位G細(xì)胞分泌胃泌素濃度升高[17]。

本研究顯示，CAG組患者的血清OPN水平高于對(duì)照組，CAG組患者的血清PGⅠ、PGR水平及胃粘膜組織中的G細(xì)胞數(shù)量低于對(duì)照組,說(shuō)明在萎縮性胃炎患者中存在OPN水平升高，PGⅠ、PGR水平下降，G細(xì)胞數(shù)量減少。Hp感染陽(yáng)性的CAG患者的血清OPN水平高于Hp陰性患者，Hp感染陽(yáng)性的CAG患者的血清PGⅠ、PGR水平及胃粘膜組織中的G細(xì)胞數(shù)量低于Hp陰性患者，說(shuō)明在幽門(mén)螺旋桿菌陽(yáng)性患者體內(nèi)上述指標(biāo)變化更為顯著。胃粘膜輕度、中度及重度萎縮的CAG患者的血清OPN水平在三組間呈逐漸升高的趨勢(shì),胃粘膜輕度、中度及重度萎縮的CAG患者的血清PGⅠ、PGR水平及胃粘膜組織中的G細(xì)胞數(shù)量呈逐漸降低的趨勢(shì)，說(shuō)明隨著病情嚴(yán)重程度的加重，CAG患者OPN水平逐漸升高，而PGⅠ、PGR水平逐漸降低，G細(xì)胞數(shù)量逐漸下降。本研究?jī)?yōu)勢(shì)在于證實(shí)了萎縮性胃炎患者血清PGⅠ、PGⅡ、PGR、OPN及胃粘膜組織中的G細(xì)胞數(shù)量存在明顯變化，而且和Hp感染以及疾病嚴(yán)重程度之間具有明顯的關(guān)聯(lián)，為臨床合理選擇檢測(cè)指標(biāo)提供了依據(jù),但是本研究隨訪時(shí)間短，入組病例少，因此還需擴(kuò)充樣本量長(zhǎng)期隨訪深入研究。

綜上所述，Hp感染與萎縮性胃炎患者血清PGR、OPN及胃粘膜G細(xì)胞數(shù)量有一定的關(guān)系，同時(shí)血清PGR、OPN及胃粘膜G細(xì)胞數(shù)量變化可反應(yīng)患者的病情嚴(yán)重程度。