中性粒細胞CD64和降鈣素原檢測在新生兒黃疸治療前后的變化及臨床價值

卜雪瑞，徐莉娟

（1.鄭州市婦幼保健院檢驗科，河南 鄭州 450000；2.鄭州大學第一附屬醫院檢驗科，河南 鄭州 45005）

新生兒黃疸是新生兒期最常見的疾病之一，是一種因膽紅素代謝異常引起的血清膽紅素升高的臨床常見的新生兒疾病，新生兒黃疸病因復雜，主要包括感染、溶血、圍生期窒息、先天性膽道畸形以及溶血等[1],其中感染性黃疸所占比例相當高，但感染的早期癥狀不明顯,如果治療不及時嚴重者可引起膽紅素腦病,會對患兒造成嚴重的神經系統后遺癥甚至引起患兒死亡。因此，靈敏度高、特異性強的早期炎癥標志物的實驗室檢測對于感染性黃疸的早期診治非常重要,本研究旨在中性粒細胞CD64與PCT在新生兒感染性黃疸治療前后中的變化及臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2015年10月-2017年5月住院治療的新生兒感染性黃疸共92例，其中男52例，女40例，日齡2～12d，平均日齡5.46±2.61d，體重2.8～4.6kg，平均體重3.32±0.51kg;所有患兒均符合《實用新生兒學》新生兒感染性黃疸診斷標準[2]：新生兒黃疸根據黃疸出現時間、消退時間、血清膽紅素水平和伴隨癥狀進行確診（上述患兒的血清膽紅素水平均大于221μmol/L）。新生兒感染性黃疸在新生兒黃疸確診的基礎上經病史、血常規、血培養、X射線及大小便常規檢查確診。根據患兒癥狀及白細胞總數將其分為輕度感染患兒42例，中度感染29例，重度感染21例；92例感染性黃疸患兒中肺炎32例，腸炎19例，臍炎20例，尿路感染21例。同時選取正常體檢的新生兒35例作為健康對照組，其中男22例，女13例，日齡2～11d，平均日齡5.27±2.35d，體重2.7～4.8kg，平均體重3.5±0.49kg。各組患兒在胎齡、日齡、體重、出生情況方面差異無統計學意義(P＞0.05)。

1.2 方法 患兒入院當日未使用抗生素前抽血檢測中性粒細胞CD64、PCT、總膽紅素、直接膽紅素，治療一周后復查中性粒細胞CD64、PCT、總膽紅素、直接膽紅素水平。同時采集靜脈血5ml，分裝入1管EDTA抗凝管2ml，用于中性粒細胞CD64表達水平；另3ml于干燥管分離血清，用于檢測血清PCT濃度，血清PCT利用羅氏Cobase 601采用化學發光法檢測。

1.3 流式細胞術檢測 中性粒細胞CD64表達水平采用貝克曼FC500檢測。流式細胞術檢測中性粒細胞CD64表達水平取80μl EDTA抗凝全血于流式檢測管底部,加入CD64－PE和CD45－FITC抗體各8μl，充分混勻，避光孵育20min；加600μl紅細胞裂解液充分混勻后避光15min；1200r/min 5min離心，去上清；加2mlPBS，1200r/min 5min離心，去上清；加500μl PBS，混懸，上機檢測。實驗所得數據采用CXP Cytometer采集并分析。CD64指數=粒細胞CD64平均熒光強度/淋巴細胞CD64平均熒光強度。

1.3 統計學分析 采用SPSS19.0統計軟件進行統計分析，計量資料以()表示，多組間均數比較采用單因素方差分析，兩組間均數比較采用獨立樣本t檢驗，相關性分析采用Person相關性分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組治療前中性粒細胞CD64、PCT、總膽紅素及直接膽紅素水平的比較 新生兒黃疸組患兒治療前中性粒細胞CD64、PCT、總膽紅素、直接膽紅素水平顯著高于健康對照組,差異有統計學意義(P＜0.01)，并且各組間中性粒細胞CD64、PCT、總膽紅素、直接膽紅素水平差異顯著，重度組患兒最高,其次是中度組和輕度組,差異有統計學意義(P＜0.05)。

表1 各組治療前中性粒細胞CD64、PCT、總膽紅素及直接膽紅素水平的比較

2.2 新生兒感染性黃疸患兒治療后中性粒細胞CD64、PCT、總膽紅素及直接膽紅素水平的比較，見表2。

表2 新生兒感染性黃疸患兒治療后血清各項指標水平的比較

2.3 中性粒細胞CD64和PCT與總膽紅素、直接膽紅素之間的相關性分析Penson相關性分析表明中性粒細胞CD64和PCT與總膽紅素、直接膽紅素之間均呈正相關(P＜0.05)。

3 討論

新生兒期由于各種因素影響造成膽紅素的生成增加而引起新生兒高膽紅素血癥[3]，而高膽紅素血癥會對新生兒智力、聽力及神經系統的發育造成巨大損傷。雖然新生兒黃疸產生的病因較多，但主要病因仍然是感染因素，新生兒感染初期，并不會有發熱、白細胞升高等感染指征出現，新生兒感染性黃疸的早期診斷有一定難度[4]。因此早期對新生兒感染性黃疸進行診斷對于早期發現感染、合理應用抗生素治療具有重要的臨床價值。

CD64是IgG Fc段高親和受體，屬免疫球蛋白超家族成員，可通過抗體依賴性細胞毒作用、細胞吞噬作用和免疫復合物清除作用實現對病原微生物的清除[5，6]。非疾病狀態其在中性粒細胞表面表達水平較低,而細菌感染時細菌細胞壁脂多糖成分和粒細胞集落刺激因子等會誘發CD64高水平表達[7，8]。一般情況下,機體感染或內毒素入侵時CD 64在刺激后4～6h即可升高[9]。大量研究表明非感染性和病毒感染疾病患者中中性粒細胞CD64指數水平較低，而在細菌感染患者中明顯上調，因而可作為識別細菌感染的一種簡單有效的臨床指標[10,11]。本研究中發現新生兒感染性黃疸患兒CD64指數明顯高于健康對照組,且其與疾病嚴重程度密切相關，表明CD64指數可作為早期新生兒感染性黃疸患兒診斷指標。

降鈣素原為降鈣素(cMcitonin)的前體，而當機體發生感染時，肝臟、肺等組織的的巨噬細胞、單核細胞及內分泌細胞等會受細菌等引起的炎癥反應刺激后合成及分泌PCT,并隨著感染程度的加深而顯著增加[12]。有研究表明，血清PCT在新生兒感染性黃疸升高水平較非感染性黃疸升高幅度大[13]，并且PCT較其他炎性因子出現都早，特別是受細菌感染的患者。因此在實驗室診斷中，PCT是一種能特異性區分細菌感染和其它原因導致的炎性反應的重要標志物[14]。本研究結果發現新生兒黃疸組患兒治療前血清PCT水平顯著高于健康對照組，因此，根據血清PCT水平可初步區分新生兒黃疸組患兒的類別。此外，血清PCT在重癥患兒中濃度進一步升高，提示血清PCT可用于早期診斷且與新生兒感染性黃疸嚴重程度相關。

此外，Penson相關性分析表明中性粒細胞CD64和PCT和血清總膽紅素、直接膽紅素之間均呈正相關,并且新生兒感染性黃疸患兒治療后中性粒細胞CD64、PCT、總膽紅素、直接膽紅素水平明顯下降，表明感染是造成新生兒黃疸直接因素，其治療前后檢測中性粒細胞CD64和PCT對新生兒感染性黃疸病情監測、預后及治療具有重要的臨床價值。

綜上所述，本研究發現，在新生兒感染性黃疸患兒中，中性粒細胞CD64和PCT均顯著升高，并于與患兒疾病程度相關，經治療后水平顯著下降，表明檢測中性粒細胞CD64和PCT水平對新生兒感染性黃疸病情監測、預后及治療具有重要的臨床價值。