同型號生化分析儀血清鈣比對結果分析

韋美德，胡禮賓，秦志麗，黃榆蘇，凌建生

（廣西醫科大學第四附屬醫院醫學檢驗科，廣西 柳州 545005）

按ISO 15189認可的要求，臨床實驗室中通過認可的項目，應每年進行儀器比對，樣本量應≥20例，濃度應覆蓋測量范圍，比對結果應滿足要求；如比對結果不一致時，應分析原因，采取必要的糾正措施，并評估糾正措施的有效性，以保證實驗室中不同分析系統的檢測結果具有一致性和可比性[1]。廣西醫科大學第四附屬醫院醫學檢驗科有2臺cobas c702全自動生化分析儀（簡稱c702-1和c702-2），而同型號的不同儀器檢測同一份樣本也不可避免地存在系統誤差[2]。為此，本研究擬通過2臺同型號的生化分析儀血清鈣檢測結果的比對分析，探討比對結果不通過的原因和糾正措施。

1 材料和方法

1.1 樣本來源

收集廣西醫科大學第四附屬醫院門診和住院患者新鮮血清樣本20份，血清鈣濃度覆蓋高、中、低水平，每份血清樣本體積不少3 mL，且無黃疸、脂血或溶血。

1.2 儀器和試劑

cobas c702全自動生化分析儀（瑞士羅氏公司）及配套試劑、c.f.a.s校準品。多參數質控品購自美國伯樂公司。

1.3 方法

1.3.1 儀器保養與質量保證 2臺儀器比對當天室內質量控制（簡稱室內質控）結果在控，近期室間質量評價（簡稱室內質評）成績合格，2臺儀器比對時性能良好。

1.3.2 比對儀器的確定 以連續多年參加國家衛生健康委臨床檢驗中心、廣西省臨床檢驗中心室間質評，成績優秀的儀器（c702-2）為比對儀器，c702-1為試驗儀器。

1.3.3 樣本測定 按本實驗室比對程序要求，將20份血清樣本同時在2臺儀器上進行血清鈣濃度檢測。

1.3.4 判斷標準 （1）2臺儀器比對結果r2≥0.95，且有≥80%的結果符合|偏移%|≤該項目比對質量目標；（2）平均偏移的絕對值應低于本實驗室規定的允許范圍；（3）各醫學決定水平值代入直線回歸方程（Y=aX+b）后的理論值與實際值的偏移應低于本實驗室規定的允許范圍，a值在1.00±0.05范圍內，r2≥0.95。

2 結果

2.1 血清鈣首次比對結果

c702-1與c702-2比對結果的絕對偏移為-0.16～0.08 mmol/L，有65%的結果符合|偏移%|≤該項目比對質量目標，平均|偏移%|為4.94%，醫學決定水平處的|偏移%|為3.38%。線性回歸方程為Y=1.040 1X-0.199 9（r2=0.987 1），見圖1。比對結果通過率為65%，未達到≥80%的要求，本次比對未通過。

圖1 c702-1與c702-2血清鈣首次比對的線性回歸分析

2.2 首次比對不通過原因分析

2.2.1 攜帶污染或試劑干擾因素 首先考慮試劑加樣攜帶污染或干擾。通過查看相關文獻并進行血清鈣干擾排查試驗后，確認c702-2試劑倉試劑的排列順序合理，不存在攜帶污染或干擾。c702-1試劑倉中排列于血清鈣試劑前的鎂和總蛋白試劑均對血清鈣檢測有干擾作用。因此，將鎂和總蛋白試劑的擺放位置移至血清鈣試劑之后。

2.2.2 儀器準確度因素 通過查看近期室間質評和室內質控結果，確認儀器性能良好，血清鈣結果在控，但室間質評和室內質控結果均高于靶值，考慮為定標原因引起。通過查閱文獻并進行相關分析后，判斷可能是校準品溶劑原因和空白對照液選取不當。通過對比排除試驗并進行驗證，發現用去離子水復溶校準品，用去離子水作為空白進行定標后，血清鈣的室內質控結果和室間質評結果更接近于靶值。

2.3 實施糾正措施后血清鈣的第2次比對結果

第2次比對結果顯示，c702-1與c702-2血清鈣檢測結果的絕對偏移為-0.05～0.06 mmol/L，各項判斷指標結果均符合要求。線性回歸分析見圖2。比對結果可接受，比對通過。

圖2 c702-1與c702-2血清鈣第2次比對的線性回歸分析

3 討論

在臨床生化檢測中，很多實驗室采用蒸餾水復溶校準品、質控品，并進行本底空白定標（本實驗室之前也習慣用0.9% NaCl溶液或蒸餾水作空白對照，用蒸餾水復溶c.f.a.s校準品、質控品），而儀器系統用水中采用去離子水、蒸餾水或純凈水的情況均存在。本研究結果顯示，校準品、質控品復溶劑及本底空白定標液與儀器系統用水不一致可能會對血清鈣的檢測造成一定影響，導致儀器比對出現差異。本實驗室根據本研究結果，規定使用與儀器系統用水同源的去離子水進行空白定標對照，復溶校準品、質控品，同時更正了實驗室相應的標準操作規程。因此，建議統一儀器實驗用水，校準品、質控品復溶劑及本底空白定標液選取與儀器系統用水同源的液體。因實驗用水在純水機等水源供給過程中，水（包括去離子水）中都不可避免地含有極少量的鈣、鎂等離子或雜質，而在檢測鈣、鎂等項目或其他項目時，使用的試劑均為濃縮試劑，需加水（實驗用水）稀釋，采用相同來源的水來進行空白定標，復溶校準品、質控品，可有效去除本底中鈣、鎂等離子或雜質的影響，使結果更加準確。

有研究結果顯示，鎂和總蛋白對鈣離子測定有干擾作用，且鎂的干擾作用大于總蛋白[3]。鎂的測定試劑中含有乙二醇二乙醚二胺四乙酸，該成分為鈣的絡合劑。另外，鈣的測定方法一般采用鄰甲酚酞絡合酮比色法，由于方法學的缺陷，影響因素較多，試劑開瓶放置一段時間后會有輕微的顏色變化，影響檢測結果，所以臨床實驗室均規定每天或間隔一定時間需對鈣項目進行定標。由于鈣測定的干擾因素較多，加上我國衛生行業標準WS/T 403—2012[4]推薦使用的鈣項目的允許總誤差和比對質量目標要求均較嚴格，所以血清鈣比對難以通過是長期困擾臨床實驗室的一大難題。

同一檢測系統、不同檢測系統同一項目檢測結果可比是非常重要的，涉及到結果解釋及臨床應用，因此只有實現檢測結果可比，才能保證不同系統檢測結果的統一性和一致性，才能給臨床提供準確、可靠的實驗室數據。即使使用不同參考區間的不同檢測系統，因方法學原理等差異無法實現可比時，也要將這種結果差異告知臨床，并采取風險控制措施（如在檢驗報告上做出明確標識等）。