北京密云地區規模化豬場豬O型口蹄疫、藍耳及豬瘟抗體效價檢測與分析

史洪巖，王 娟，郁 茵

（1.北京市密云區農業農村局東邵渠所，北京101500；2.北京市密云區農業農村局檀營所，北京101500；3.北京市密云區動物疫病預防控制中心，北京101500）

近年來，隨著我國養豬業的集約化、規模化、快速地發展，對我國農業經濟的發展起著重要作用，提高了養殖戶的經濟效益[1]，但是隨之帶來一些疫病的頻發。目前，在我國普遍流行的疫病主要有口蹄疫、藍耳病、豬瘟、豬圓環病毒病等，給養殖場（戶）帶來很大困擾，增加養殖成本，降低生產效益和經濟效益[2]。目前，對于經常發生的疫病的主要預防措施是疫苗免疫在規模化豬場，疫病是造成規模化生豬養殖場、種豬場重要經濟損失的重要原因，也是制約豬場發展的重要原因之一[3]。因此，本研究選取北京密云某規模化豬場對其豬群的圓環病毒、藍耳病毒、豬瘟病毒進行抗體檢測，以期為該地區豬場發生的主要疫病的預防和控制提供參考，降低規模化豬場因疫病帶來的經濟損失。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

2020年12月15日對北京密云某規模化豬場不同養殖階段的豬群進行血液樣品收集310份。其中，哺乳仔豬血液樣品35份、保育豬血液樣品50份、后備母豬血液樣品40份、經產母豬血液樣品95份、育肥豬血液樣品80份、種公豬10份。將采集的上述血液樣品當場進行離心（4 000 r/min離心80 min）收集血清，標記號碼，分裝于Ep管中，低溫保存迅速帶回實驗室置于-20℃冰箱保存備用。

1.2 疫苗免疫程序

豬場的疫苗免疫程序根據《國家中長期動物疫病防控規劃（2012～2020）》農業農村部制定的常見動物疫病免疫的推薦方案（試行）對豬口蹄疫-O型、藍耳、豬瘟等進行普遍免疫。

1.3 試驗試劑及儀器

1.3.1 儀器設備

電熱恒溫培養箱由上海精宏實驗設備有限公司生產；洗板機由美國伯騰儀器有限公司生產；酶標儀由瑞士Tecan公司生產；移液器由Thermo公司生產。

1.3.2 試驗試劑

豬口蹄疫-O型抗體檢測試劑盒由蘭州獸醫研究所生產；豬藍耳病毒抗體檢測試劑盒由MEDIAN公司生產；豬瘟抗體檢測試劑盒由西班牙海博萊生物大藥廠生產。

1.4 試驗方法

1.4.1 檢測方法

本試驗采集的血液樣品使用ELISA的方法進行豬口蹄疫-O型病毒、藍耳病毒、豬瘟病毒抗體的檢測，操作過程中嚴格按照試劑盒說明書進行。酶標儀的檢測波長設置為450 nm測定各種病毒抗體的OD450nm值。

1.4.2 結果判定

豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）：樣品的S/P值＜0.4，說明該樣品結果為陰性，無抗體；若樣品的S/P值≥0.4，說明該樣品結果為陽性，有抗體。

豬藍耳病病毒（PRRSV）：樣品的S/P≥0.4，說明該樣品結果為陽性，有抗體；S/P＜0.4，說明該樣品結果為陰性，無抗體。

豬瘟病毒（CFSV）：被檢樣品的阻斷率≤30%判為CSFV陰性；被檢樣品的阻斷率≥40%判為CSFV陽性；被檢樣品的阻斷率＜40%，樣品判為可疑。

1.5 數據統計與分析

試驗數據采用Excel 2015軟件進行簡單整理統計，利用SPSS 22.0統計學軟件進行單因素方差分析，P＜0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 不同豬群豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體檢測結果（見表1）

由表1可知，豬場的哺乳仔豬、保育豬、育肥豬、后備母豬、經產母豬和種公豬的豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體陽性檢出率分別為94.29%、52.00%、93.75%、75.00%、97.89%、80.00%，不同豬群的豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體的S/P值存在一定差異（P＜0.05）。其中，經產母豬的豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體的S/P值最大，為2.63，顯著高于其他豬群的豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體的S/P值（P＜0.05）；保育豬的豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體的S/P值最小，為1.36。哺乳仔豬、育肥豬、后備母豬、經產母豬、種公豬的陽性檢出率均超過國家標準規定（70%）。

表1 不同豬群豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體檢測結果Tab.1 Results of detection of antibodies against porcinefoot-and-mouth disease-O virus(FMDV-O)in different swineherds

2.2 不同豬群豬藍耳病毒（PRRSV）抗體檢測結果（見表2）

由表2可知，豬場的哺乳仔豬、保育豬、育肥豬、后備母豬、經產母豬和種公豬的藍耳病毒（PRRSV）抗體陽性檢出率 分 別 為91.43%、84.00%、97.50%、87.50%、95.79%、100.00%，不同豬群的藍耳病毒（PRRSV）抗體的S/P值未產生顯著性差異（P＞0.05）。其中，種公豬的藍耳病毒（PRRSV）抗體的S/P值最大，為1.83，陽性率為100%；保育豬的藍耳病毒（PRRSV）抗體的S/P值最小，為1.63，陽性率為84%，也高于國家標準（70%）。

表2 不同豬群豬藍耳病毒（PRRSV）抗體檢測結果Tab.2 Test resultsof PRRSV antibodies in different swineherds

2.3 不同豬群豬瘟病毒（CFSV）抗體檢測結果（見表3）

由表3可知，豬場的哺乳仔豬、保育豬、育肥豬、后備母豬、經產母豬和種公豬的豬瘟病毒（CFSV）抗體陽性檢出率分 別為88.57%、86.00%、100.00%、95.00%、94.74%、100.00%，不同豬群的豬瘟病毒（CFSV）抗體的水平存在顯著性差異（P＜0.05）。其中，育肥豬和種公豬的豬瘟病毒（CFSV）抗體的陽性率為100%，平均阻斷率較高，顯著高于其他豬群（P＜0.05）；所有豬群的豬瘟病毒（CFSV）抗體的陽性率均高于國家標準（70%）。

表3 不同豬群豬瘟病毒（CFSV）抗體檢測結果Tab.3 Test resultsof classical swinefever virus(CFSV)antibodies in different swineherds

3 討論

豬口蹄疫O型疫病是由口蹄疫病毒引起的一種接觸性傳染病。集約化、規模化的大型養豬場日常中應采取綜合防控措施，可避免該類疫病的爆發及傳播，豬場日常管理中，要注重該病毒的監測、及時免疫、疫苗免疫效果等工作，避免給養殖場造成不必要的經濟損失[4]。本試驗結果表明，哺乳仔豬、保育豬、育肥豬、后備母豬、經產母豬和種公豬的豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體的S/P值存在一定差異。其中，經產母豬的豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體的S/P值最大，為2.63，顯著高于其他豬群的豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體的S/P值；保育豬的豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體的S/P值最小，為1.36。哺乳仔豬、育肥豬、后備母豬、經產母豬、種公豬的陽性檢出率均超過國家規定的70%。導致上述各豬群監測結果不同的原因可能是由各類豬群的飼養環境、免疫情況及疫苗有效性等因素引起的。研究表明，僅僅進行1次免疫，免疫效果相對較低，需加強免疫才能夠提高抗體免疫效價[5]。所以導致該豬場保育豬的豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體的S/P值最小。在生豬養殖生產中，需要結合本場的實際生產情況，科學、合理規劃各類疫病的免疫程序，實時監測各類疫病的免疫抗體水平。口蹄疫O型是我國養豬產業中比較頻發的疫病之一。養殖人員需要高度重視此病的預防工作，保證做到抗體陽性檢出率不低于國家的規定（＞70%）。對于免疫效果不理想的豬群，需要及時制定、調節免疫程序，及時進行二次免疫，避免不必要的經濟損失[6]。

該豬場種公豬的藍耳病毒（PRRSV）抗體的S/P值最大，為1.83，陽性率為100%；保育豬的藍耳病毒（PRRSV）抗體的S/P值最小，為1.63，陽性率為84%，均高于國家標準的70%，說明該場PRRSV免疫防控效果較好。研究表明，保育豬在已經得不到母源抗體的有效保護時，若其首免時間選擇良好，會使保育豬藍耳病抗體在維持在相對較高的水平；但也需對抗體較低豬只進行補免，并持續關注豬藍耳病毒抗體水平的變化，及時調整免疫程序[7-9]。

不同類別豬瘟免疫抗體檢測結果表明，不同豬群的豬瘟病毒（CFSV）抗體的水平存在顯著性差異。其中，育肥豬和種公豬的豬瘟病毒（CFSV）抗體的陽性率為100%，平均阻斷率較高，顯著高于其他豬群；所有豬群的豬瘟病毒（CFSV）抗體的陽性率均高于國家標準（70%）；保育豬的抗體陽性率較低，平均阻斷率為68.29%，說明該類別豬群免疫效果較差。研究表明，在生豬養殖過程中需要強化防疫工作的管理水平，提高養殖人員的防疫意識。日常管理工作應及時制訂科學、合理的免疫程序，對抗體水平較低的豬群應及時制訂方案進行補免，以保證進入下一階段前有較高的豬瘟病毒抗體水平[10-12]。

應在母豬源頭做好各類疫病的免疫工作，保證新生仔豬的健康。新生仔豬和保育豬養殖生產中，應加強免疫次數，保證哺乳仔豬和保育豬有較高的FMDV-O、PRRSV、CFSV抗體水平。目前，對于病毒類的疫病，應注重綜合管理預防措施工作，養殖人員應時刻對各類病毒抗體水平進行監測，一旦出現抗體水平波動較大的情況，應及時采取免疫措施，合理規劃免疫程序，確保豬群有較高的抗體水平。如發現豬患病，需要立刻及時淘汰，做無害化處理，避免大規模感染傳播。

4 結論

本試驗結果表明，北京密云地區該豬場的豬口蹄疫-O型、藍耳、豬瘟病毒抗體陽性檢出率中只有保育豬的豬口蹄疫-O型抗體水平低于國家標準，其余豬群以上3種病毒抗體陽性率均符合國家規定。此豬場應對保育豬的豬口蹄疫-O型進行二次免疫，以便提高該豬場的整體免疫水平，提高生產效益。