李惠林,金 芬,劉文鋒,李 俊,楊奕海,吳從娟,楊正興
(黔東南州雷山縣雷山農業農村局,貴州雷山 557199)
茶葉是貴州省重要的支柱產業之一,省委省政府和各地方政府建立的一系列措施,減少了茶葉種植中農藥的使用。同時,由于病蟲害防治和茶葉質量的要求,在茶葉種植管理中需要尋找相應的替代手段,如使用對人體危害較小的植物生長調節劑(下稱:PGR)等替代品。對貴州茶園中PGR使用情況進行試驗,為掌握PGR在茶樹上使用的發展趨勢提供了基礎數據和參考價值。
本論文選取貴州省銀球茶(綠茶)主要生產地的貴州省雷山縣作為樣本,針對不同濃度的赤霉素、吲哚乙酸進行田間試驗,相比不同濃度的赤霉素、吲哚乙酸對茶葉主要品質指標(可可堿、咖啡因、氨基酸、兒茶素類)的影響。
在《農藥注冊試驗指南(NY/T788)》和《農藥注冊殘留田間試驗標準操作規程》的指導下進行試驗設計,并根據本研究的試驗目的進行適當的調整。
本次試驗,主要選擇黔東南州雷山縣茶葉種植區進行實地調研。依據植物生長調節劑的特點,在2018年春季進行殘留試驗,實驗地點為雷山縣腳雄茶業種植區。茶園面積約1 000 m2。試驗前10天茶樹應經過輕修剪處理。試驗前未施用過PGR。供試的綠茶茶樹,品種為福鼎華茶2號(GSCT2),樹齡為6—9年。
赤·吲乙·蕓可濕性粉劑。
試驗前茶葉基地一年以上未施用過植物生長調節劑,試驗劃分為3個小區,每個試驗設三個重復,分別以希臘字母I,II,III標記,共分為12個區塊。
其中3塊為對照,對照組為未噴施供試藥物區,噴施純凈水,記為CK。其它9塊為噴藥處理區塊,每個處理設置三次重復試驗。分別設置減半濃度處理區,記為處理①區;推薦濃度處理區,記為處理②區;加倍濃度處理區,記為處理③區。各個區塊間隔設置緩沖區,區塊應隨機排列。
噴藥后,根據每個實驗塊的茶樹發芽情況進行發芽率的實驗記錄,出芽后,采集一芽二葉茶青樣品,用于測定芽的重量及含水量,同時拍照記錄形態;采集一芽二葉1.5 kg,500 g鮮葉直接烘干(烘青樣品)用于理化檢測。
高效液相色譜儀(美國Waters公司),配有ACQPDA檢測器;電子天平。
樣品粉碎,過30目篩,稱取1 g(精確至0.001 g)樣品到250 mL錐形瓶中,量取100 mL的90℃超純水至錐形瓶中,蓋塞后立刻放入沸水浴,超聲提取20 min,持續振搖取出,用流動冷水冷卻1 min,加5 g氧化鎂,混勻,沸水浴超聲20 min后取出,冷卻至室溫。上清液轉移至100 mL離心管中,4 500 r/min離心5 min,待測備用。
C18液相色譜柱(5 μm,150 mm×3.9 mm);吸光度210 nm;分離度4.8 nm;采樣速率20點/s。流動相為超純水+乙腈溶液(V/V);梯度洗脫模式;流速0.3 mL/min,按梯度洗脫程序進行洗脫。
本試驗參照《食品安全國家標準 飲料中咖啡因的測定》(GB5009.139),對色譜條件進行進一步的優化,檢測波長由僅能測定咖啡堿的275 nm,優化為可涵蓋更多品質指標的210 nm。得到更廣泛的檢測范圍。
本方法的線性范圍在221 ng/mL~438 μg/mL之間。檢出限:0.7 ng(以三倍基線噪音信號確定);取樣量1 g,檢出限16 mg/kg,定量限50 mg/kg。品質指標分離情況較好,出峰情況對比如圖1。

圖1 綠茶中主要品質指標出峰情況
通過綠茶中營養成分指標檢測方法對貴州雷山綠茶中主要品質指標(可可堿Theobromine,咖啡因Caffine,茶氨酸L-Theanine)進行試驗。通過色譜圖計算各品質指標在茶葉中的含量,重復進樣兩次,取平均值,得出下表1和表2。

表1 不同赤霉素、吲哚乙酸濃度處理后茶葉中三種營養成分的影響

表2 不同赤霉素、吲哚乙酸濃度處理后茶葉中兒茶素類含量的影響
本研究利用SPSS軟件對數據進行處理,參照田間試驗統計方法分析得知,圖表中刪除線的數據為異常值,不參與最終結果計算。根據數據討論在四種不同植物生長調節劑施用濃度(CK、①、②、③)和三個區塊重復(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)之間是否有交互影響,從不同植物生長調節劑施用濃度來討論對茶葉中品質指標是否存在顯著差異性。
若P<0.05,說明差異源間存在顯著差異,若P<0.01,則差異源之間的差異非常顯著,見表3。

表3 赤霉素、吲哚乙酸濃度對茶葉中品質指標的影響的方差分析
赤霉素、吲哚乙酸濃度對表沒食子兒茶素EGC含量的增長有顯著影響,對綠茶中茶氨酸(L-Theanine)的含量的增長有非常顯著的影響。相較之下,對于如:綠茶中可可堿(Theobromine)、綠茶中兒茶素(C)、綠茶中咖啡因(Caffine)、綠茶中表兒茶素沒食子酸酯(ECG)、綠茶中表兒茶素(EC)、綠茶中表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)的作用不夠明顯。
在茶葉生產過程中,可以通過施用赤霉素、吲哚乙酸等植物生長調節劑,促進茶葉中水分的增加,從而有效增量,增效,增強經濟效益。同時通過對茶氨酸、表沒食子兒茶素的作用,改善茶葉滋味的鮮度等,從而提高茶葉的口感。