豬細小病毒病滅活疫苗穩定性研究報告

李應鶴，宋 揚，徐 剛，李 贄，于 鐳

（哈藥集團 生物疫苗有限公司，哈爾濱 150069）

豬細小病毒病是危害全球養豬業的三種重要傳染病之一，給養豬業造成了巨大的經濟損失[1]。因此，為了預防和控制這類疾病，研發安全、高效的疫苗是最主要的解決途徑。哈藥集團生物疫苗有限公司試制的豬細小病毒病滅活疫苗（L株，懸浮培養）是一種含有豬細小病毒L株抗原的滅活疫苗，為了探討其穩定性，將制備的3批滅活疫苗置于2～8℃環境中保存，分別于保存3、6、9、12、18和24個月后，按照現行《中國獸藥典》要求進行疫苗性狀、無菌性和效力等檢驗[3]，來確定疫苗的保存期，以期為養殖戶應用到安全、高效的疫苗提供保證。

1 材料

1.1 疫苗

豬細小病毒病滅活疫苗（L株，懸浮培養），批號為201401、201402、201403，由哈藥集團生物疫苗有限公司制備。

1.2 紅細胞凝集抑制抗原

豬細小病毒L株，批號為PPV-HI Ag-201401，紅細胞凝集價為1∶512，規格為1.0 mL·瓶-1，由哈藥集團生物疫苗有限公司制備和提供。

1.3 紅細胞懸液

0.5%豚鼠紅細胞懸液，按現行《中國獸藥典》進行制備。

1.4 試驗動物

350～400 g成年豚鼠（豬細小病毒HI抗體不高于1∶8），由哈藥集團生物疫苗有限公司實驗動物中心提供。

2 方法

2.1 性狀檢測

將實驗室3批制品于2～8℃保存3、6、9、12、18、24個月后取樣，對其外觀、劑型、穩定性和黏度按現行《中國獸藥典》附錄進行檢測。

2.2 無菌檢驗

將實驗室3批制品于2～8℃保存3、6、9、12、18、24個月后取樣，按現行《中國獸藥典》進行無菌檢驗。

2.3 效力檢驗

將實驗室3批制品于2～8℃保存3、6、9、12、18、24個月后取樣，對體重350～400 g、豬細小病毒HI抗體效價低于1∶8的豚鼠5只進行肌肉注射疫苗，0.5 mL·只-1。28 d后連同條件相同的未注射對照豚鼠2只，采血，測定HI抗體效價[2]。

3 結果與分析

3.1 性狀檢驗結果

疫苗性狀檢驗結果見表1。

表1 實驗室3批制品2～8℃保存不同時間性狀檢驗結果

由表1可知，實驗室3批制品在2～8℃保存24個月，外觀為粉白色乳狀液；水包油包水劑型；3 000 r/min離心15 min，管底析出水相均不超過0.5 mL；黏度符合規定。

3.2 無菌檢驗結果

疫苗無菌檢驗結果見表2。

表2 實驗室3批制品2～8℃保存不同時間無菌檢驗結果

由表2可知，將實驗室制備的3批豬細小病毒病滅活疫苗接種于T.G、G.A和G.P培養基上，2～8℃保存24個月后進行觀察，結果培養基內均無細菌、霉菌等雜菌的污染，比較純凈，與保存當日無明顯差異，表明實驗室制備的疫苗比較純凈、無菌。

3.3 效力檢驗結果

疫苗效力檢驗結果見表3。由表3可知，將實驗室3批制品在2～8℃保存24個月后，分別測定豬細小病毒HI抗體效價。結果免疫豚鼠豬細小病毒HI抗體效價均不低于1∶64，與保存當日無明顯差異。對照組豬細小病毒血清抗體均為陰性。

表3 實驗室3批制品2～8℃保存不同時間效力檢驗結果

4 討論與結論

將制備的3批豬細小病毒病滅活疫苗（L株，懸浮培養）制品置于2～8℃環境中保存，分別于保存3、6、9、12、18和24個月后，按照現行《中國獸藥典》要求進行疫苗性狀、無菌性和效力等檢驗。從表1結果可以看出各組性狀穩定，黏度符合規定。表2檢測結果表明疫苗純凈、無菌。表3結果中HI抗體效價穩定，免疫豚鼠豬細小病毒HI抗體效價均不低于1∶64結果，均符合標準。根據試驗結果并確保豬細小病毒病滅活疫苗的質量，將本產品置2～8℃保存有效期暫定為18個月。