犬弓形蟲抗體間接ELISA檢測方法的建立

柳方遠，印春生，李雙星，單 虎，才學鵬，劉業兵*

(1.中國獸醫藥品監察所，北京 100081；2.青島農業大學 動物醫學院，山東 青島 266109)

剛地弓形蟲(Toxoplasmagondii)是一種人畜共患原蟲，在世界范圍廣泛分布，全球約有1/3的人口感染弓形蟲[1]。據統計，弓形蟲全球血清陽性率平均為25%～50%[2]。弓形蟲可專性寄生于人和動物的有核細胞引起發病，孕婦感染弓形蟲可以引起早產、流產、胎兒畸形[3]；免疫力正常的人群多為隱性感染，免疫功能低下的患者可能出現淋巴結病或眼部弓形蟲病[4]，隱性感染個體再次感染，重新激活可導致致命的弓形蟲腦炎、心肌炎和肺炎[5]；弓形蟲感染同時也是艾滋病患者的死亡原因之一[6]。弓形蟲的中間宿主有200多種動物，包括哺乳類、鳥類、魚類、爬行類和人等[7]，為典型的多宿主寄生蟲，貓科動物是其惟一的終末宿主[8]。犬不僅是弓形蟲的中間宿主，也是該病最重要的傳染源之一。目前，我國犬類的弓形蟲感染較為普遍，感染率為3.94%～46.67%，在北方某些地區尤為嚴重[9]。隨著家養犬的數量不斷增多，人類與患病犬親密接觸，導致人感染弓形蟲的比率逐年上升，對人和動物的健康造成極大的潛在威脅[10]。所以，對犬弓形蟲病進行有效的診斷和監測，降低人感染弓形蟲的幾率具有重大意義。

目前，檢測弓形蟲感染的方法，包括分子生物學診斷和血清學診斷。常規的PCR方法可用于在感染的急性期進行檢測，但由于血液中無法獲得弓形蟲DNA，因此在慢性病例中無法檢測到感染[11]。血清學診斷為弓形蟲病最常用的診斷方法，其中ELISA檢測方法與其他血清學方法診斷弓形蟲病相比，具有可重復、易自動化和標準化的特點，還可用于定性和定量檢測[12]，因此受到廣泛的關注。……