弓形蟲SAG1重組抗體制備及抗原表位鑒定

莊浩瀚，潘靈韜，姚晨倩，陳學秋，陽毅敏，趙明秀，林 蜜，楊 怡，杜愛芳

(浙江大學 動物科學學院 浙江大學動物預防醫學研究所 浙江省動物預防醫學重點實驗室,浙江 杭州 310058)

弓形蟲是一種專性寄生于宿主的單細胞寄生蟲。其可以感染包括人類在內的幾乎所有溫血動物，是典型的人畜共患寄生蟲[1]。人和動物通過食用未煮熟的食物或者被弓形蟲卵囊污染的水而被弓形蟲感染。據2019年的報道估計，全世界動物的弓形蟲血清陽性率約為25%[2]。弓形蟲也是一種機會性致病寄生蟲，在免疫力低下的人群中，如(人免疫缺陷病毒HIV)感染者，接受腫瘤化療的患者，臟器移植患者等，弓形蟲感染會直接致死。而且，弓形蟲還能通過母嬰傳播，導致流產、死胎或者新生兒畸形[3]。磺胺嘧啶和乙嘧啶是目前治療弓形蟲病的藥物，但只能抑制弓形蟲增殖，并不能徹底根除弓形蟲[4]。商業化的疫苗暫時只有1個Toxovax，然而僅限于綿羊養殖預防[5]。

弓形蟲生物學功能研究是弓形蟲病預防治療的基礎。免疫印跡和免疫熒光等試驗是研究弓形蟲蛋白功能所必須的，這些試驗高度依賴于特異有效的抗體。市場化的抗體絕大部分都是針對人源蛋白設計的，無法保證適用于弓形蟲蛋白的研究。因此，制備弓形蟲蛋白特異性抗體對科學研究來說是不可或缺的。多克隆抗體和單克隆雜交瘤抗體技術已經被廣泛運用于抗體制備，然而多克隆抗體，有可能缺乏批次間的可重復性，而單克隆雜交瘤細胞培養過程有污染或者基因突變的可能，導致抗體分泌失效。……