侯孟春,廖 輝,王仕英
(阿壩師范學院資源與環境學院,四川阿壩 623000)
蒲公英(Taraxacum mongolicum Hand.-Mazz.)菊科,蒲公英屬多年生草本植物。我國四川、貴州、云南等地區均有分布。蒲公英富含維C、銅、蒲公英醇等多種健康營養成分,有利尿、緩瀉、退黃疸、利膽等功效,能治急性乳腺炎、淋巴腺炎、瘰疬、疔毒瘡腫等疾病。蒲公英還具有一定的食用價值,腌泡的蒲公英花蕾具有提神醒腦的功效;根可以用來替代咖啡;花可以做酒等。目前,市場對蒲公英的需求量很大,而蒲公英的人工種植面臨著凍害等問題。植物凍害(Plant frost)是指氣溫降至冰點以下,植物因細胞間隙結冰引起的傷害。植物凍害對組織中超氧化物歧化酶(SOD)活性和可溶性蛋白質含量有明顯的影響。
SOD 是生物體內存在的一種抗氧化金屬酶,能夠催化超氧陰離子自由基歧化生成氧和過氧化氫,在機體氧化與抗氧化平衡中起到至關重要的作用[1],與很多疾病的發生、發展密不可分。活性氧或其他過氧化物自由基對細胞膜系統的傷害很大,通過測定凍害條件下蒲公英組織中SOD 的活性,從而判斷此條件下植株的抗性。根據這一試驗結果,分析總結出提高蒲公英組織中SOD 含量的方法,從而解決蒲公英人工種植的凍害問題,提高種植產量,為當地種植戶增加收益。
取若干正常生長的蒲公英植株,分為甲乙兩組。甲組提供正常的生長條件(室溫),乙組提供凍害條件(零下2 ℃),其余條件均相同,培育1 周時間。試驗時選擇長勢良好、健康的植株組織進行測定。
樣品中SOD 活性的測定,參照盧少云等人[1]用NBT 還原法進行。
樣品中可溶性蛋白質含量的測定,參照趙英永等人[2]考馬斯亮藍G-250 染色法進行。
每組試驗重復3 次,取平均值計算。
正常條件下的樣品溶液吸光度見表1。

表1 正常條件下的樣品溶液吸光度
將測定結果代入公式,即:

凍害條件下的樣品溶液吸光度見表2。

表2 凍害條件下的樣品溶液吸光度
將測定結果代入公式,即:

甲乙兩組SOD 總活性測定結果對比見圖1。

圖1 甲乙兩組SOD 總活性測定結果對比
根據試驗數據分析,正常條件下的蒲公英植株樣品中SOD 總活性明顯低于凍害條件下的蒲公英植株樣品中SOD 總活性。凍害條件下的蒲公英植株樣品中SOD 總活性比正常條件下的蒲公英植株樣品中SOD 總活性高6.6%。一定程度的凍害脅迫可以提升蒲公英植株組織中SOD 的活性,增強植株的抗性。
根據試驗結果,利用一定程度的凍害脅迫來提高蒲公英植株樣品中SOD 總活性,然后選擇抗性好的植株進一步繁殖,再進一步使用凍害脅迫篩選出抗性最強的植株。利用篩選出的優勢種進行大量繁殖,提升蒲公英的品質。在一定程度上解決蒲公英人工種植的凍害問題,努力提高蒲公英的種植產量,增加當地種植戶的收益,緩解冬季市場上蒲公英緊缺的問題。
試驗的凍害脅迫程度固定,接下來試驗小組將繼續劃分更詳細的凍害脅迫階梯,進行更加精細的試驗分析,進一步探究凍害脅迫對蒲公英組織中SOD 活性的影響。