干燥綜合征患者Th1/Th2細胞因子表達水平與其中西醫結合干預效果關系分析

馬衍慧 章建峰 劉麗敏（浙江中醫藥大學附屬湖州中醫院，湖州313000）

干燥綜合征（Sjogren's syndrome，SS）是一種多發于中年女性的影響外分泌腺（唾液腺、淚腺等）的系統性、進行性自身免疫性疾病，其在風濕免疫病中的發病率僅次于類風濕性關節炎，位居第二［1-2］。目前SS的發病機制仍然未明確，作用機制十分復雜，有研究發現，Th1、Th2型細胞因子水平在SS患者發病的過程中處于動態平衡，在SS患者的外分泌腺中，低水平淋巴細胞浸潤的初期Th2型細胞因子占優勢，而隨著SS患者病情及浸潤情況的加重，SS的后期則被Th1型細胞因子的逐漸占主導地位，表明Th1/Th2的免疫平衡在SS患者疾病變化過程中被破壞［3-4］。近年來，在自身免疫性疾病機制研究探討中，Th1/Th2細胞因子越來越受到人們的關注［5］。有臨床研究發現，中醫藥可改善SS患者口干、眼干癥狀，使SS病情進展得到效緩解，但其具體機制尚待進一步研究［6］。因此，本研究探討SS患者Th1/Th2細胞因子表達水平與其中西醫結合干預效果關系分析，以期為臨床提供參考依據。

1 資料與方法

1.1 資料 選取我院2016年5月至2018年6月收治的SS患者90例作為研究對象，根據干預方法不同分為中藥組（n=30）、西藥組（n=30）及中西藥組（n=30），另選取我院同期健康體檢者30例為對照組，本研究經醫院內醫學倫理委員會批準。納入標準：所有患者均符合SS診斷標準，患者知情同意并簽署知情同意書。排除標準：①排除合并心腦血管疾病及腎臟疾病；②排除妊娠期或哺乳期女性；③排除造血系統疾病者；④排除精神障礙無法配合者。中藥組男16例，女14例，年齡48～74歲，平均年齡（51.33±11.03）歲，病程（3.54±1.12）年；疾病類型：原發性SS 13例，繼發性SS 17例；西藥組男15例，女15例，年齡49～75歲，平均年齡（51.29±11.15）歲，病程（3.49±1.09）年；疾病類型：原發性SS 14例，繼發性SS 16例；中西藥組男18例，女12例，年齡48～75歲，平均年齡（51.43±11.12）歲，病程（3.50±1.14）年；疾病類型：原發性SS 16例，繼發性SS 14例。對照組30例，男16例，女14例，年齡48～74歲，平均年齡（51.33±11.03）歲；各組患者年齡、性別、病程及疾病類型等基本資料差異無統計學意義（P＜0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 動物造模 中藥組給予養陰益氣活血方（黃芪30 g、山藥20 g、丹參20 g、太子參15 g、生地10 g、枸杞子10 g、玄參10 g、桑椹10 g、五味子10 g、黃精20 g、山茱萸20 g、烏梅10 g），1劑/d，水煎取汁300 ml，早晚2次服用。西藥組給予硫酸羥氯喹片（上海中西制藥有限公司，國藥準字：H19990263）0.2 g，2次/d。中西藥組為兩種藥物的結合治療，3組均連續干預8周。

1.2.2 觀察指標

1.2.2.1 比較各組Th1、Th2相關細胞因子ELISA法檢測血清Th1相關細胞因子IFN-γ和IL-2含量及Th2相關細胞因子IL-4和IL-10含量，按ELISA試劑盒說明書進行操作。

1.2.2.2 采用SS疾病活動指數（ESSDAI）評估患者治療前后疾病活動度 從不活動～中度活動，評分記0～2分，高活動癥狀出現記3分，評分越高則病情越嚴重；采用歐洲抗風濕聯盟SS患者報告指數（ESSPRI）評估患者治療前后主觀疼痛、干眼癥狀、乏力等，每項0～10分，評分越高則病情越嚴重。

1.2.2.3 Pearson線性相關分析Pearson相關分析檢測SS患者Th1/Th2細胞因子表達水平與其中西醫結合干預后ESSDAI、ESSPRI評分關系。

1.3 統計學分析 采用SPSS22.0進行數據分析，計量資料采用±s表示，組間比較采用t檢驗，Pearson線性相關檢驗分析干燥綜合征患者Th1/Th2細胞因子表達水平與其中西醫結合干預后ESSDAI、ESSPRI評分關系，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組治療前后Th1、Th2相關細胞因子水平比較 與對照組相比，各組患者治療前Th1、Th2相關細胞因子水平均上升（P＜0.05）；治療后各組患者IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10水平均較治療前降低，且中西藥組、中藥組治療后IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10水平均較西藥組治療后水平降低（P＜0.05），如表1。

表1 各組治療前后Th1、Th2相關細胞因子水平比較（±s，n=30，pg/ml）Tab.1 Comparison of Th1 and Th2 related cytokines levels in each group before and after treatment（±s，n=30，pg/ml）

表1 各組治療前后Th1、Th2相關細胞因子水平比較（±s，n=30，pg/ml）Tab.1 Comparison of Th1 and Th2 related cytokines levels in each group before and after treatment（±s，n=30，pg/ml）

Note：Compared with the same group before treatment，1）P＜0.05；compared with Chinese medicine group，Western medicine group after treatment 2）P＜0.05.，

Groups Chinese and Western medicine Chinese medicine Western medicine Control Time Before treatment After treatment Before treatment After treatment Before treatment After treatment Th1 IFN-γ 392.63±9.24 194.92±18.251）2）392.54±9.18 234.93±18.711）389.61±8.94 290.84±50.621）186.32±11.86 IL-2 407.36±10.32 308.37±13.291）2）401.63±10.51 330.23±12.841）411.48±10.42 353.69±22.481）256.74±6.44 Th2 IL-4 64.94±4.17 44.41±4.551）2）66.31±4.06 49.57±4.581）66.24±4.11 53.58±6.241）40.94±4.46 IL-10 204.25±10.33 114.52±10.061）2）201.52±11.41 123.82±18.241）204.26±11.35 164.73±17.291）111.87±12.83

2.2 各組患者治療前后ESSDAI、ESSPRI評分比較 治療后，中西藥組ESSDAI、ESSPRI評分較中藥組、西藥組均降低（P＜0.05，表2）。

表2 各組患者治療前后ESSDAI、ESSPRI評分比較（±s，n=30，分）Tab.2 Comparison of ESSDAI and ESSPRI scores before and after treatment（±s，n=30，points）

表2 各組患者治療前后ESSDAI、ESSPRI評分比較（±s，n=30，分）Tab.2 Comparison of ESSDAI and ESSPRI scores before and after treatment（±s，n=30，points）

Note：Compared with Chinese and Western medicine group，1）P＜0.05.

Groups Chinese and Western medicine Chinese medicine Western medicine ESSDAI Before treatment 3.58±1.06 3.61±1.11 3.57±1.14 After treatment 2.03±0.58 2.32±0.161）2.93±0.361）ESSPRI Before treatment 6.14±1.75 6.16±1.41 6.15±1.39 After treatment 4.13±1.45 5.16±1.211）5.42±1.341）

2.3 SS患者Th1/Th2細胞因子表達水平與其中西醫結合干預效果關系Pearson線性相關性分析表明，SS患者Th1/Th2細胞因子表達水平與其中西醫結合干預后療效密切相關（P＜0.05，表3）。

表3 干燥綜合征患者Th1/Th2細胞因子表達水平與其中西醫結合干預效果關系Tab.3 Relationship between Th1/Th2 cytokine expression level and intervention effect of integrated traditional Chinese and Western medicine in patients with SS

3 討論

目前，SS的主要西藥治療方案包括免疫抑制劑、毒蕈堿膽堿能受體激動劑、免疫調節劑、糖皮質激素、人工淚液、人工唾液、生物制劑等，治療機理包括3個層次：唾液和淚液的替代治療，外分泌腺殘余功能增強，改變免疫病理過程，但上述藥物未能改善患者全身的干燥癥狀［7-8］。

本研究結果發現，與對照組相比，各組患者治療前的Th1、Th2相關細胞因子水平均上升；治療后各組患者IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10水平均較治療前降低，且中西藥組、中藥組治療后IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10水平均較西藥組治療后水平降低；治療后，中西藥組ESSDAI、ESSPRI評分均較中藥組、西藥組降低；Pearson線性相關性分析顯示，SS患者Th1/Th2細胞因子表達水平與其中西醫結合干預后療效密切相關。

SS屬中醫學“燥毒”“燥證”“燥痹”等范疇，傳統中醫學認為SS發病的主要原因是燥邪，病機是陰虛內熱，“毒蘊血瘀”是其發病的重要因素［9］，在長期的臨床實踐經驗中，采用清熱、解毒、活血等治療方法可使SS患者的臨床療效得到明顯提高，但其療效與機制關系還未完全清晰［10-11］。

SS發病的主要原因是免疫平衡系統被打破，免疫調節是陰陽平衡的調節系統，可調節整個免疫系統，一旦平衡遭到破壞，便會誘發多種疾病的發生和發展［12-13］。有研究認為SS的發生發展與Th1和Th2免疫平衡失調及其導致的細胞因子復雜網絡變化密切相關，輔助性T細胞（Th）主要分為2類：包括參與細胞免疫且分泌IFN-γ、IL-2等細胞因子的Th1細胞；參與體液免疫主要分泌IL-4、IL-5和IL-10等細胞因子的Th2細胞；Th1細胞與Th2細胞間存在動態平衡［12-13］。研究發現，Th1型細胞因子IL-2及IFN-γ水平在SS患者唇腺組織中高表達，IFN-γ具有減緩涎腺細胞生長發育，并誘導腺體黏附分子分泌的作用，調控淋巴細胞對腺體的浸潤過程，從而在SS發病初期疾病進程中發揮重要作用［14］。

在SS發病臨床期階段，Th2細胞產生IL-4細胞因子在其適應性免疫反應中起關鍵作用，IL-4能促進B細胞的增殖和分化，促進細胞分泌，從而產生抗體介導免疫應答影響Th1、Th2細胞的分泌作用。IL-10是諸多免疫現象作用的主要細胞因子，參與B細胞的活化及凋亡、T細胞及細胞因子調控等。有研究顯示，敲除IL-4基因可恢復SS實驗動物模型的腺體分泌功能，但不能減少淋巴細胞對腺體的浸潤，目前認為最能反映Th1及Th2淋巴細胞活性的細胞因子為IFN-γ、IL-2和IL-4、IL-10，其相互作用又可維持Th1/Th2平衡，抗炎因子IL-4及IL-10可對Th1應答反應進行下調，而IFN-γ可對Th2細胞進行增殖抑制［3，15］。益氣養陰活血方組方以益氣活血、養陰生津立論，其中黃芪、太子參、黃精、山藥可益氣生陰、補益脾肺、防寒涼傷胃；玄參、生地可清熱、潤燥、生津，啟腎水上承；丹參活血養血通絡；枸杞子、山茱萸、桑椹可起到滋陰血、補肝腎作用；烏梅、五味子酸斂生津養陰；諸藥合用，得養陰血、補氣虛、通經絡、潤諸竅、除頑燥［16-17］。硫酸羥氯喹是一種常見的抗瘧藥物，該藥物治療SS的機制是主要通過抑制前列腺素合成，促進溶酶體膜穩定，從而使患者關節疼痛的癥狀得到有效減輕，通過抑制乙酰膽堿酯酶活性，改善干燥癥狀，然而起效較慢，且對部分患者療效較差［18］。

有研究通過前期臨床研究實驗結果顯示，運用養陰益氣活血方聯合西藥可對SS患者起明顯的治療效果，可緩解患者的臨床癥狀，改善患者免疫功能，同時調節Th1/Th2免疫平衡，改善患者預后，提高患者的生活質量［19-20］。

綜上所述，SS患者Th1/Th2細胞因子表達水平上調，西醫結合干預可有效下調Th1/Th2細胞因子表達水平，其可能通過調節Th1/Th2免疫平衡達到治療作用。