莪術及其有效成分對實驗性肝纖維化療效的Meta分析

王偉　陳翰翰　王凱

摘要 目的：系統評價莪術及其有效成分對實驗性肝纖維化（HF）的療效。方法：檢索中國期刊全文數據庫、中國學術期刊數據庫、 中文科技期刊數據庫、PubMed、Embase、Cochrane library、中國生物醫學數據庫（CBM），收集建庫起至2020年1月期間所有關于莪術及其有效成分治療實驗性HF的中文隨機對照動物實驗。干預組干預措施包括莪術水煎劑、醋莪術、莪術提取物、莪術多糖、莪術醇、姜黃素、β-欖香烯等。結局指標包括肝功能、肝纖四項、肝指數及相關理化指標。由2名研究員共同篩選后，用RevMan 5.3進行數據分析。結果：納入11個隨機對照動物實驗，樣本量196只。Meta分析結果顯示：1）與HF模型組比較，干預組可有效降低ALT（MD-0.58，95%Cl為-1.29～-0.04;P=0.33;n=4，I2=12%）、AST（MD-0.83，95%Cl為-1.39～-0.27;P=0.29;n=4，I2=20%），升高TP（MD8.36，95%Cl為6.20～10.51;n=2，I2=0%）、ALB（MD2.19，95%Cl為1.39～2.98;P=0.25;n=4，I2=27%），改善肝功能;2）肝纖四項指標改善優于模型組，HA（MD-177.45，95%Cl為-187.81～-167.09;n=3，I2=0%）、LN（MD-1.57，95%Cl為-2.37～-0.77;n=2，I2=0%）、PCⅢ（MD-4.54，95%Cl為-5.90～-3.18;n=2，I2=0%）、Ⅳ-C（MD-2.23，95%Cl為-3.11～-1.35;n=2，I2=0%）;3）有效降低肝指數（MD-6.79，95%Cl為-8.75～-4.83;n=2，I2=0%），并通過調節相關理化因子（α-SMA、HYP、MDA、TGF-β1、SOD）的表達，起到抗實驗性HF作用。結論：莪術及其有效成分可有效改善實驗性HF，對臨床試驗有一定指導意義。

關鍵詞 莪術;有效成分;動物實驗;肝纖維化;莪術提取物;莪術醇;莪術多糖;姜黃素

Meta-analysis of the Effect of Rhizoma Curcumae and Its Active Ingredients on Experimental Liver Fibrosis

WANG Wei1，2，CHEN Hanhan2，WANG Kai1

（1 School of Medicine，Shandong University，Ji′nan 250012，China; 2 Affiliated Hospital of Shandong University of Traditional Chinese Medicine，Ji′nan 250014，China）

Abstract Objective：To systematically evaluate the efficacy of Rhizoma Curcumae and its active components on experimental liver fibrosis，and to provide evidence for clinical treatment.Methods：Searching Chinese and English databases such as CNKI，Wanfang，VIP，Pubmed，Embase，Cochrane Library and CBM by computer，the Chinese literature on Rhizoma Curcumae and its active ingredients for the treatment of experimental liver fibrosis using randomized controlled trial was collected from the establishment of the databases till January 2020.The intervention group included Rhizoma curcumae water decoction，vinegar baked Rhizoma curcumae，Rhizoma curcumae extracts，Curcuma polysaccharides，curcuma alcohol，curcumin，β-elemene and so on.The outcome measures included liver function，liver fibrosis，liver index and related physical and chemical indexes.After screening，data were analyzed by two researchers using Review Manager 5.3.Results：A total of 11 RCTs tests were included，including 196 cases.The results of Meta analysis showed that ALT（MD-0.58，95%CI：-1.29 to -0.04;P=0.33; n=4，I2=12%），AST（MD-0.83，95%CI：-1.39 to -0.27; P=0.29; n=4，I2=20%）were significantly lower in the intervention group than in the model group，while increased TP（MD8.36，95%CI：6.20 to 10.51; n=2，I2=0%），ALB（MD2.19，95%CI：1.39 to 2.98; P=0.25; n=4，I2=27%）improved liver function.The improvement of 4 indexes of hepatic fibrosis，HA（MD-177.45，95%CI：-187.81 to -167.09; n=3，I2=0%），LN（MD-1.57，95%CI：-2.37 to -0.77; n=2，I2=0%），PCⅢ（MD-4.54，95%CI：-5.90 to -3.18; n=2，I2=0%），Ⅳ-C（MD-2.23，95%CI：-3.11 to -1.35; n=2，I2=0%），were better than those of the model group in the intervention group.The liver index（MD-6.79，95%CI：-8.75 to -4.83; n=2，I2=0%）was effectively reduced，and the liver fibrosis was inhibited by regulating the expression of related physical and chemical factors（α-SMA、HYP、MDA、TGF-β1、SOD）.Conclusion：Rhizoma Curcumae and its effective components have efficacy on experimental liver fibrosis，but it still needs to be validated by large sample and multi-center RCT study.

Keywords Rhizoma zedoariae; Active ingredient; Animal experiments; Liver fibrosis; Extract of zedoary turmeric; Curcumenol; Polysaccharide from zedoary; Curcumin

中圖分類號：R242;R285.5文獻標識碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.12.015

肝纖維化（Hepatic Fibrosis，HF）是所有慢性肝病可逆的前期病理過程，如不能及早診治將繼續進展為肝硬化、肝癌。如何有效控制和逆轉其進程，降低發病率及死亡率，成為近年來的研究熱點[1]。雖然西醫學在基礎研究方面取得了諸多新進展，但在治療上除針對病因外，無其他特效療法。以辨證論治為特色的中醫學，在治療HF方面展現了獨特的優勢與特色。中醫理論認為，此病理過程可歸屬于“肝著”“臌脹”“脅痛”“積聚”“肝積”“黃疸”等范疇。氣滯血瘀在疾病中動態演變，關系其轉歸和預后，貫穿于疾病始終[2]。多項研究表明，活血化瘀藥莪術及其有效成分，具有抗實驗性HF的作用[3-13]。但存在研究規模較小、具體療效不確切等問題。我們通過對莪術及其有效成分對實驗性HF療效的研究進行數據分析與系統評價，以期為其進一步開展臨床研究提供參考依據。

1 資料與方法

1.1 文獻檢索 計算機檢索中國期刊全文數據庫、中國學術期刊數據庫、 中文科技期刊數據庫、Pubmed、Embase、Cochrane library、中國生物醫學數據庫（CBM）等中英文數據庫中所有關于莪術及其有效成分對實驗性HF療效的隨機對照動物實驗。時間為數據庫建立至2020年1月31日。中文檢索詞為“莪術”“莪術有效成分”“莪術提取物”“莪術水煎劑”“莪術醇”“莪術多糖”“姜黃素”“β-欖香烯”“肝纖維化”等;英文檢索詞為“Curcumae Rhizoma”“curcuma active ingredient”“Curcuma extract”“Curcuma water decoction”“curcuma alcohol”“Curcuma polysaccharide”“curcumin”“β-elemene”“liver fibrosis”等。

1.2 納入標準

1.2.1 研究類型 隨機對照動物實驗。

1.2.2 研究對象 通過不同造模方法建立的動物HF模型鼠（大鼠、小鼠均可）。

1.2.3 干預措施 模型組予以生理鹽水或常規飼養對癥處理，干預組給予莪術及其有效成分治療，2組用藥劑量及療程不限。

1.2.4 結局指標 肝功、肝纖四項、肝指數、HF程度、相關理化因子及病理檢測等。

1.2.5 質量評價標準 質量評價標準按照SYRCLE動物實驗偏倚風險評估工具進行評價。評價由2名研究者獨立進行，并互相核對，如遇分歧，討論協商或咨詢第3名研究者。評估項目包括：1）分配序列產生或應用是否充分;2）各組基線是否相同;3）分配隱藏是否充分;4）實驗過程中動物是否被隨機安置;5）是否對研究者施盲;6）結局評價中動物是否經過隨機選擇;7）是否對結局評價者施盲;8）不完整的數據是否被報告;9）研究報告是否與選擇性結局報告無關;10）是否不存在其他偏倚。每項分成是、否、不確定3個等級，通過相關表格呈現。

1.3 排除標準 1）重復發表;2）無法獲取全文;3）研究對象在研究前或研究期間出現嚴重并發癥;4）干預措施中包含其他中藥成分或為復方制劑。

1.4 資料提取 由2名研究者使用Note express軟件，按照納入標準和排除標準，通過閱讀摘要和全文，對文獻進行獨立篩選。提取信息包括：作者、發表時間、樣本量、隨機方案、干預措施、結局指標，并進行Jadad評分，逐一交叉核對。如出現分歧不能統一意見，則由第3名研究者協助解決。

1.5 統計分析 采用RevMan 5.3軟件進行數據合并與統計分析。二分類變量采用比值比（OR）及其95%可信區間（CI）為效應指標分析統計量;連續性變量采用加權均數差（WMD）及其95%可信區間（CI）為療效分析統計量。P<0.05為差異有統計學意義。采用Chi2檢驗和I2分析異質性。以95%CI，I2>75%為異質性過大，不能進行合并的界限;I2<25%為異質性小，P<0.10提示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 文獻檢索結果 按檢索策略，檢索相關文獻181篇，排除數據庫之間重復文獻88篇。進行全文篩選，按照納入標準和排除標準后，剩余11篇納入系統評價。文獻篩選流程及結果。見圖1。

2.2 納入研究表 最終納入11篇文獻，均為中文文獻，總樣本量為196只，其中干預組97只，模型組99只;發表于2003—2019年;動物為大鼠或小鼠;納入文獻基本特征見表1，干預方法及結局指標。見表2。

2.3 納入文獻質量評價 納入的11篇文獻中，2篇文獻[4，6]明確了隨機分配方法，其余文獻均提及隨機字樣。3篇文獻模型組以飼料喂養，未設置藥物對照處理[11-13]。納入的所有文獻結果數據均完整，無選擇性報告結果，其他偏倚來源均不確定。風險偏倚評價。見表3。

2.4 主要結局指標

2.4.1 肝功能 除1篇文獻[12]外，共184個實驗對象進行了肝功能相關項目的比較。血清轉氨酶（ALT、AST）：4篇文獻[8-10，12]共58個實驗對象比較了血清轉氨酶。其中ALT：各研究存在較低異質性（P=0.04，I2=12%），采用固定效應模型分析。干預組對ALT改善作用優于模型組（MD-0.58，95%CI為-1.29～-0.04;P=0.33;n=4，I2=12%）。見圖2。AST：各研究存在較低異質性（P=0.29，I2=20%），采用固定效應模型分析。干預組對AST改善作用優于模型組（MD-0.83，95%Cl為-1.39～-0.27;P=0.29;n=4，I2=20%）。見圖3。

血清蛋白（TP、ALB）：2篇文獻[9-10]共30個實驗對象比較了血清總蛋白（TP）。采用固定效應模型分析，研究顯示無明顯異質性（I2=0%，P=0.33）。莪術及其有效成分促進TP合成作用優于模型組（MD8.36，95%Cl為6.20～10.51;n=2，I2=0%）。見圖4。4篇文獻[9-11，13]共64個實驗對象比較了血清IGE蛋白（ALB）。各研究存在較低異質性（P=0.25，I2=27%），采用隨機效應模型分析。干預組促進ALB合成作用優于模型組（MD2.19，95%Cl為1.39～2.98;P=0.25;n=4，I2=27%）。見圖5。

2.4.2 肝纖四項 共有5篇文獻[4-8]，共90個實驗對象進行了肝纖四項相關項目的比較。3篇文獻[5，7-8]共50個實驗對象比較了透明質酸（HA）。采用固定效應模型分析，研究顯示為同質（I2=0%，P=0.42）。與模型組比較，干預組可明顯降低HA水平（MD-177.45，95%Cl為-187.81～-167.09;n=3，I2=0%）。見圖6。

2篇文獻[4，8]共34個實驗對象比較了層粘連蛋白（LN）。采用固定效應模型分析，研究顯示無明顯異質性（I2=0%，P=0.84）。與模型組比較，干預組可明顯降低LN含量（MD-1.57，95%Cl為-2.37～-0.77;n=2，I2=0%）。見圖7。

2篇文獻[4-5]共36個實驗對象比較了Ⅲ型前膠原（PCⅢ）。采用固定效應模型分析，研究顯示為同質（I2=0%，P=0.72）。與模型組比較，干預組可明顯降低PCⅢ含量（MD-4.54，95%Cl為-5.90～-3.18;n=2，I2=0%）。見圖8。

2篇文獻[5-6]共36個實驗對象比較了Ⅳ型膠原（Ⅳ-C）。采用固定效應模型分析，研究顯示無明顯異質性（I2=0%，P=0.67）。干預組對Ⅳ-C改善作用優于模型組（MD-2.23，95%Cl為-3.11～-1.35;n=2，I2=0%）。見圖9。

2.4.3 肝指數 2篇文獻[4，8]共34個實驗對象比較了肝指數。采用固定效應模型分析，研究顯示為同質（I2=0%，P=0.73。與模型組比較，干預組可有效降低肝指數（MD-6.79，95%Cl為-8.75～-4.83;n=2，I2=0%）。見圖10。

2.4.4 相關理化指標 2篇文獻[5，13]共30個實驗對象比較了羥脯氨酸（Hyp）。各研究存在較低異質性（P=0.25，I2=23%），采用隨機效應模型分析。干預組可下調Hyp表達，且作用優于模型組（MD-2.05，95%Cl為-3.14～-0.94;P=0.25;n=2，I2=23%）。見圖11。

4篇文獻[5，8，10，12]共60個實驗對象比較了丙二醛（MDA）。采用固定效應模型分析，研究顯示為同質（I2=0%，P=0.80。莪術及其有效成分對MDA調控作用優于模型組（MD-1.61，95%Cl為-2.22～-1.00;n=4，I2=0%）。見圖12。

2篇文獻[12-13]共28個實驗對象比較了轉化生長因子-β1（TGF-β1）。采用固定效應模型分析，研究顯示無明顯異質性（I2=0%，P=0.40）。干預組可下調TGF-β1表達，且作用優于模型組（MD-3.81，95%Cl為-5.29～-2.33;n=2，I2=0%）。見圖13。

2篇文獻[3，7]共50個實驗對象比較了肌動蛋白-α（α-SMA）。采用固定效應模型分析，研究顯示為同質（I2=0%，P=0.78。莪術及其有效成分可下調α-SMA表達，作用優于模型組（MD-9.08，95%Cl為-11.09～-7.06;n=2，I2=0%）。見圖14。

2篇文獻[3，7]共50個實驗對象比較了超氧化物歧化酶（SOD）。采用固定效應模型分析，研究顯示無明顯異質性（I2=0%，P=0.82）。干預組可上調SOD表達，且作用優于模型組（MD0.81，95%Cl為0.08～1.54;n=2，I2=0%）。見圖15。

3 討論

莪術首載于東漢《雷公炮炙論》，又名莪藥、莪術、青姜、黑心姜等，辛、苦，溫，歸肝、脾經。功效破血消積，行氣止痛。明代李時珍《本草綱目》曰：“術入肝，治氣中之血。”主要用于癥瘕痞塊，瘀血經閉，食積脹痛等。肝纖維化的發生發展與血瘀密切相關，故活血化瘀法貫穿治療始終。臨床研究證實，含莪術中藥復方化肝纖沖劑、滋腎養肝化瘀顆粒、健脾柔肝活血通絡方等，可通過活血化瘀、益氣滋陰、軟堅散結等起到改善肝功能、抗纖維化作用[14-16]。現代藥理研究證實，莪術主要成分是揮發油、姜黃素類、多糖類、甾醇類、酚酸類、生物堿類等，具有抗腫瘤、抗血小板聚集、調節胃腸平滑肌、升高白細胞、抗菌、抗病毒等作用[17]。本研究納入的干預措施包括莪術水煎劑、醋莪術、莪術提取物、莪術多糖、莪術醇、姜黃素、β-欖香烯等。結果表明，莪術及其有效成分，可通過多靶點、多途徑促進細胞外基質降解、抗炎抗氧化、改善肝功能等，起到治療實驗性肝纖維化的作用。

雖然本研究采用嚴謹的文獻篩選標準，但仍存在一定的局限性，如納入文獻均為中文文獻，質量評價普遍較低，可能會造成選擇性偏倚及其他偏倚不明的情況。如今后形成統一的療效評價體系及標準，實驗及臨床研究中采用多中心、大樣本、隨機對照原則，多納入客觀指標（肝功能、肝纖四項、相關炎癥指標）等，則更加有利于形成高級別的循證學依據，從而進一步指導臨床。

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（2020-04-23收稿 責任編輯：傅露露，徐穎）

基金項目：國家自然科學基金青年基金項目（81904128）;山東省中醫藥科技發展計劃項目（2019-0159）;山東省博士后創新計劃項目（202003069）

作者簡介：王偉（1983.10—），女，博士，主治醫師，研究方向：消化系統疾病的臨床及實驗研究，E-mail：smiling365@163.com

通信作者：王凱（1958.09—），男，博士，教授，博士研究生導師，主任醫師，研究方向：消化系統疾病的臨床及實驗研究，E-mail：wangdoc2010@163.com