2020年河南省奶牛副結(jié)核病流行情況分析

王向佩 周峰 閆磊等

摘要：為了解河南省奶牛副結(jié)核病流行情況，利用副結(jié)核分枝桿菌（MAP）間接ELISA抗體檢測對2020年省內(nèi)11個地市部分牧場送檢的523份牛血液樣品進行副結(jié)核抗體檢測。結(jié)果顯示，14個送檢牧場，陽性樣品145份，場間陽性率92.86%，樣品陽性率27.72%。對4個500頭左右中小規(guī)模牧場進行批量檢測，833份樣品中陽性樣品210份，場間陽性率100%，場內(nèi)陽性率15.67%～36.06%，樣品陽性率25.93%。2019年共計送檢樣品345份，其中MAP抗體陽性數(shù)104份，樣品陽性率30.14%。2020年送檢樣品與2019年相比，送檢量增加了51.59%，陽性率降低了2.42個百分點。

關(guān)鍵詞：奶牛;副結(jié)核病;發(fā)病率;血清抗體陽性率

中圖分類號：S858.23? ? ? ? 文獻標識碼：A? ? ? ? 文章編號：1007-273X（2021）05-0008-02

牛副結(jié)核病（Bovine paratuberculosis）是由副結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium avium subsp Paratuberculosis，MAP）引起的牛常見的一種人畜共患傳染病，以牛頑固性、慢性增生性腸道炎癥以及進行性消瘦等為主要特征[1]，在我國屬于二類動物疫病[2]。

MAP以反芻動物為主要宿主，經(jīng)糞口途徑傳播，排菌病牛是主要傳染源[3]。此病多呈隱性感染，一般以4～6月齡的犢牛易感，但臨床癥狀多在分娩后或泌乳高峰期才表現(xiàn)出來。MAP可以導致腸黏膜發(fā)生病變，腸道慢性炎癥的發(fā)生導致腸道機能紊亂、腸壁的血漿蛋白滲出增加和腸管對氨基酸的吸收障礙，導致大量蛋白質(zhì)的丟失，從而導致病牛消瘦，影響其生產(chǎn)性能，不僅對牛場收入造成影響，同時造成了大量的飼料、人工費用等浪費，給畜牧業(yè)帶來嚴重的經(jīng)濟損失。該病在我國黑龍江、遼寧、 內(nèi)蒙古、貴州、河北、陜西等地區(qū)都有報道[4]。 近年來隨著養(yǎng)牛業(yè)生產(chǎn)規(guī)模越來越大，集約化程度越來越高以及從國外引種等原因，導致牛只的流動范圍愈來愈廣，副結(jié)核病的發(fā)病率也隨之上升[5]。

為了解河南省奶牛場近年來MAP流行情況，對河南省2020年送檢樣品進行副結(jié)核抗體檢測，同時對一些有代表性的規(guī)模牧場進行批量檢測，并進行了相關(guān)數(shù)據(jù)分析，以期為該病的綜合防控提供數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

2020 年河南省所轄范圍內(nèi)的鄭州、新鄉(xiāng)、南陽等11個地市14個牧場523份牛血液樣品，涉及牧場總體飼養(yǎng)量為18 720頭。

1.2 試驗試劑

酶標儀（ELX800型）、全自動酶標洗板機（ELX508型）（美國BIOTEK公司），MAP 抗體 ELISA試劑盒（IDEXX 公司），5 mL 貯血管，96 孔空白孵育板，移液槍，槍頭，去離子水。

1.3 試驗方法

利用副結(jié)核分枝桿菌抗體檢測試劑盒（Mycobacterium paratuberculosis antibody test kit，IDEXX公司）檢測血清中的MAP IgG。具體操作參照試劑盒說明書進行。

2 結(jié)果與分析

2.1 送檢樣品檢測結(jié)果

對河南省11個地市14家牧場送檢的血清樣品進行 MAP 抗體檢測，結(jié)果顯示，送檢的523 份血清樣品中145 份樣品MAP抗體為陽性，MAP 抗體總陽性率為27.72%;14家牧場中13家檢測出MAP抗體陽性，場間陽性率為92.86% （表1）。

2.2 不同規(guī)模牧場MAP抗體檢測結(jié)果

將以上14個牧場按存欄量劃分為小規(guī)模（0～500頭）、中規(guī)模（500～1 000頭）、大規(guī)模（1 000頭以上）3個區(qū)間。其中中小規(guī)模牧場7家，大規(guī)模牧場7家。不同規(guī)模牧場普遍MAP抗體陽性（表2）。

隨機對不同地區(qū)4個牧場進行副結(jié)核病批量檢測，檢測樣品共計1 431份，其中陽性樣品371份，整體陽性率25.93%。場間陽性率100%，場內(nèi)陽性率15.67%～36.06%，與省內(nèi)樣品送檢陽性率27.72%基本一致（表3）。

3 小結(jié)與討論

通過對2020年河南省14家牧場送檢牛副結(jié)核分枝桿菌樣品檢測發(fā)現(xiàn)，送檢的懷疑副結(jié)核癥狀的14家牧場，場間陽性率92.86%（13/14）。全年共送檢樣品523份，送檢MAP抗體陽性率27.72%（145/523）。同時為進一步了解河南省2020年牧場副結(jié)核病普遍流行情況，對4個中小型牧場進行批量檢測，檢測樣品1 431份，陽性率25.93%（371/1 431），與送檢陽性率27.72%基本持平。

結(jié)合牧場規(guī)模分析發(fā)現(xiàn)，送檢的大型牧場與中小型牧場數(shù)量相同。但送檢樣品數(shù)量卻是中小型牧場的1/3左右，且陽性率比中小型牧場高。說明大型牧場在生產(chǎn)管理上相對更為規(guī)范，有疑似癥狀的牛只相對較少，但送檢陽性率更高，也說明大型牧場管理人員相對可能更為專業(yè)，對牛只的臨床癥狀判斷更為準確，與實驗室檢測吻合度更高。也證明了大型規(guī)模牛場（1 000頭以上）的養(yǎng)殖環(huán)境和飼養(yǎng)管理等方面比中小型規(guī)模場更為規(guī)范，在一定程度上抑制了MAP的感染和傳播[6]。

牛副結(jié)核分枝桿菌的感染，除了與牧場養(yǎng)殖環(huán)境和飼養(yǎng)管理等方面因素有關(guān)外，還與引種有一定關(guān)系。不少地區(qū)為了獲得高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)的奶牛遺傳基因，大量從國外引進奶牛，這樣有可能帶進一些奶牛疫病[7]。本實驗室對一新建牧場從國外引進的全部牛只進行牛副結(jié)核抗體檢測，結(jié)果顯示，277份送檢血清中檢出可疑樣品4份，陽性樣品2份，陽性率0.72%。這無疑給我國副結(jié)核病的防控工作帶來巨大的壓力。牛副結(jié)核病作為一種慢性腸道疾病，目前尚無有效的疫苗及治療藥物，較難做到早期診斷和防控，國內(nèi)還沒有行之有效的方法和措施。因此，及時發(fā)現(xiàn)并淘汰感染牛是目前防治該病最有效的方法。即對牛群進行定期監(jiān)測，加強牧場生物安全防控，隔離淘汰感染牛只，做好環(huán)境消毒工作，避免該病的大范圍傳播。

參考文獻：

[1] FECTEAU M E. Paratuberculosis in Cattle[J]. The veterinary clinics of North America food animal practice， 2018， 34（1）：209-222.

[2] 中華人民共和國農(nóng)業(yè)部. 農(nóng)業(yè)部公告第1125號[EB/CD]. http：//www.moa.gov.cn/ gk/tzgg_1/gg/201006/t20100606_1535636.htm，2008-12-22.

[3] 吳建勇，楊學云，王登峰，等.奶牛副結(jié)核病流行牛場的處置方案分析[J]. 中國奶牛，2020（1）：28-32.

[4] 孫 雨，馬世春，時建忠，等.牛副結(jié)核病的流行病學特征與實驗室診斷技術(shù)研究進展[J].中國草食動物科學，2015，35（2）：44-47.

[5] STABEL J R，BANNANTINE J P. Development of a nested PCR method targeting a unique multicopy element，ISMap02， for detection of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis in fecal samples.[J]. Journal of clinical microbiology， 2005， 43（9）：4744-4750.

[6] 張 振，彭 永，丁家波. 牛副結(jié)核病的危害及其防控措施 [J]. 中國獸藥雜志，2016（10）：65-69.

[7] 邱昌慶.從國外引進奶牛應注意預防的幾種傳染病[J]. 中國動物保健，2009， 11（6）：82-85.