外周血MMP-9和sFlt-1水平對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥患者月經(jīng)周期的影響

汪 佳， 沙 敏， 葛紅山， 張 萍， 朱丹丹， 錢(qián) 華

(江蘇省泰州市人民醫(yī)院， 江蘇 泰州 225300)

子宮內(nèi)膜異位癥是育齡期婦女常見(jiàn)的婦科疾病，其發(fā)病率在10%～15%左右，該病也是導(dǎo)致育齡期女性不孕的重要原因之一，約有30%-50%的患者合并不孕癥[1]。子宮內(nèi)膜異位癥患者的病理組織學(xué)常表現(xiàn)為良性，但其有類(lèi)似惡性腫瘤的局部浸潤(rùn)生長(zhǎng)、種植轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等能力[2]。迄今尚不清楚子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病的確切機(jī)制。研究顯示，細(xì)胞外基質(zhì)的黏附作用在子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病中起到重要的作用[3]，而基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)具有降解細(xì)胞外基質(zhì)的作用，可增強(qiáng)細(xì)胞間黏附作用，有利于異位內(nèi)膜生長(zhǎng)[4]。可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(sFlt-1)對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子具有拮抗作用，其與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子結(jié)合后可抑制血管生長(zhǎng)[5]。目前有關(guān)外周血MMP-9和sFlt-1水平變化與子宮內(nèi)膜異位癥患者病情進(jìn)展及月經(jīng)周期關(guān)系的研究結(jié)果尚不十分清楚，因此本研究對(duì)比分析了子宮內(nèi)膜異位癥患者及對(duì)照者外周血MMP-9和sFlt-1水平變化，以期為子宮內(nèi)膜異位癥的診治提供一定的理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料:將2017年3月至2020年3月我院婦科收治的113例子宮內(nèi)膜異位癥患者納入本研究，納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合子宮內(nèi)膜異位癥診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；②月經(jīng)周期正常；③育齡期女性；④未合并自身免疫性疾病及惡性腫瘤；⑤入組前1個(gè)月未服用激素類(lèi)或免疫毒性藥物；排除標(biāo)準(zhǔn)：①嚴(yán)重肝腎功能障礙；②急慢性盆腔炎；③生殖器官發(fā)育異常。113例子宮內(nèi)膜異位癥患者中，年齡22～45歲，平均(33.52±6.27)歲，R-AFS分期：Ⅰ期(微型，1～5分)19例、Ⅱ期(輕型，6～15分)34例、Ⅲ期(中型，16～40分)37例、Ⅳ期(重型，>40分)23例。另選同期到我院體檢的62例健康女性作為對(duì)照組，年齡22～43歲，平均年齡(32.07±5.62)歲，兩組的基本資料相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法:分別在兩組增生期、分泌期采集空腹外周靜脈血4mL，室溫下凝固30min，3000rpm離心15min后，將上層血清轉(zhuǎn)移至新的離心管中，于-80℃保存待測(cè)。人MMP-9酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒和人sFlt-1酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自美國(guó) R&D Systems公司，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，主要包括以下幾個(gè)部分：①將特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗體；②加受檢標(biāo)本：使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段時(shí)間，讓標(biāo)本中抗原與固相載體上抗體結(jié)合，形成固相抗原復(fù)合物；③加酶標(biāo)抗體：使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合；④加底物：夾心式復(fù)合物中的酶催化底物成為有色產(chǎn)物，根據(jù)顏色反應(yīng)的程度決定進(jìn)行該抗原的定性或定量；⑤采用Multiskan FC酶標(biāo)儀(美國(guó)Thermo公司)進(jìn)行檢測(cè)。

2 結(jié) 果

2.1兩組不同月經(jīng)周期外周血MMP-9和sFlt-1水平變化:子宮內(nèi)膜異位癥組患者增生期、分泌期外周血MMP-9水平明顯高于對(duì)照組，外周血sFlt-1水平明顯低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但子宮內(nèi)膜異位癥組和對(duì)照組各自增生期與分泌期間外周血MMP-9和sFlt-1水平無(wú)明顯變化，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組不同月經(jīng)周期外周血MMP-9和sFlt-1水平變化

2.2不同R-AFS分期子宮內(nèi)膜異位癥患者外周血MMP-9和sFlt-1水平變化:子宮內(nèi)膜異位癥患者外周血MMP-9水平隨著R-AFS分期的升高而升高，外周血sFlt-1水平隨著R-AFS分期的升高而降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 不同R-AFS分期子宮內(nèi)膜異位癥患者外周血MMP-9和sFlt-1水平變化

2.3外周血MMP-9和sFlt-1水平與R-AFS分期及月經(jīng)周期的相關(guān)性:子宮內(nèi)膜異位癥患者外周血MMP-9水平與sFlt-1水平呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，外周血MMP-9水平與R-AFS分期呈正相關(guān)(P<0.05)，外周血sFlt-1水平與R-AFS分期呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，但外周血MMP-9與sFlt-1水平與月經(jīng)周期無(wú)相關(guān)性(P>0.05)，見(jiàn)表3。

表3 外周血MMP-9和sFlt-1水平與R-AFS分期及月經(jīng)周期的相關(guān)性

3 討 論

子宮內(nèi)膜異位癥是婦科臨床常見(jiàn)的疾病之一，多見(jiàn)于育齡婦女。近年來(lái)的調(diào)查研究顯示，子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病率呈逐年增長(zhǎng)的趨勢(shì)[7]。子宮內(nèi)膜異位癥常表現(xiàn)為異位子宮內(nèi)膜無(wú)限制生長(zhǎng)，其有類(lèi)似惡性腫瘤的生物學(xué)特性，治愈難度較大，且容易復(fù)發(fā)。目前，尚不清楚子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生的確切病因，多認(rèn)為子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生是由多因素、多環(huán)節(jié)共同作用所致[8]。

細(xì)胞外基質(zhì)降解是異位內(nèi)膜細(xì)胞種植及轉(zhuǎn)移的重要途徑，細(xì)胞外基質(zhì)的黏附作用與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病關(guān)系密切[9]。MMP-9是基質(zhì)金屬蛋白酶家族重要成員，具有降解細(xì)胞外基質(zhì)的作用，其可以通過(guò)與整合素相互作用增強(qiáng)細(xì)胞間的粘附，誘導(dǎo)細(xì)胞外基質(zhì)重塑，也是參與血管新生、腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的重要介質(zhì)[10]。本研究結(jié)果顯示，子宮內(nèi)膜異位癥組患者增生期、分泌期外周血MMP-9水平明顯高于對(duì)照組，而且MMP-9水平隨著R-AFS分期的升高而升高，表明MMP-9水平升高可能與子宮內(nèi)膜異位癥病情進(jìn)展有關(guān)。許麗娜等[11]的報(bào)道也認(rèn)為，MMP-9在子宮內(nèi)膜異位癥患者血清中呈現(xiàn)高水平狀態(tài)，支持本研究結(jié)果。

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子是促進(jìn)血管生成的關(guān)鍵因子，而血管生成又是腫瘤生長(zhǎng)的必備條件[12]。研究顯示，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子mRNA水平在異位內(nèi)膜組織中的表達(dá)水平明顯高于正常內(nèi)膜組織[13]。sFlt-1是血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的抑制性受體，其與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子結(jié)合后能抑制血管生長(zhǎng)[14]。動(dòng)物模型研究發(fā)現(xiàn)，sFlt-1與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子結(jié)合后對(duì)血管生長(zhǎng)因子的分泌具有抑制作用[15]。本研究結(jié)果顯示，子宮內(nèi)膜異位癥組患者增生期、分泌期外周血sFlt-1水平明顯低于對(duì)照組，且外周血sFlt-1水平隨著R-AFS分期的升高而降低，表明sFlt-1水平降低可能與子宮內(nèi)膜異位癥病情進(jìn)展有關(guān)。

本研究結(jié)果還顯示，子宮內(nèi)膜異位癥患者外周血MMP-9水平與sFlt-1水平呈負(fù)相關(guān)，外周血MMP-9水平與R-AFS分期呈正相關(guān)，外周血sFlt-1水平與R-AFS分期呈負(fù)相關(guān)，表明MMP-9水平升高和sFlt-1水平降低共同促進(jìn)子宮內(nèi)膜異位癥病情進(jìn)展，但外周血MMP-9與sFlt-1水平與月經(jīng)周期無(wú)相關(guān)性。

綜上所述，子宮內(nèi)膜異位癥患者外周血MMP-9水平顯著升高、sFlt-1水平顯著降低，二者與患者病情進(jìn)展有明顯關(guān)系，但與患者月經(jīng)周期無(wú)明顯關(guān)系。