凝聚胺法、微柱凝膠法在輸血檢驗中的應用價值及不完全抗體檢出率對比

張兆瑞

（菏澤市定陶區人民醫院 輸血科，山東 菏澤 274100）

0 引言

輸血治療是臨床上治療多種急危重癥病人的重要措施，通過予以患者輸血治療能夠在很大程度上改善患者的凝血功能，促進血液循環，提升血容量、糾正患者休克癥狀，對于預防、減少因血容量下降而造成的患者死亡現象發生有非常重要的意義[1]。為保證輸血的安全性，在予以患者輸血治療前，醫護人員需認真對受血者血液情況、供血者血液情況進行檢測，了解兩者抗體、抗原匹配情況，篩查并鑒定不完全抗體情況，以盡可能減少受血者紅細胞損害、避免受血者出現免疫反應，確保輸血的安全性[2]。凝聚胺法、微柱凝膠法均為臨床上常用的不完全抗體檢測方式，本次研究就兩種檢測方式的應用情況進行了對比。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月至2020年6月菏澤市定陶區人民醫院院行臨床輸血治療的患者800例進行研究，其中男485例，女315例，年齡15～85歲，平均（46.9±2.0）歲。所有研究對象家屬均知曉研究內容，簽署知情同意書；所有研究對象均無輸血治療禁忌證；研究經過醫院醫學倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑

譜細胞、不完全抗體篩選紅細胞試劑均選用上海血液生物醫藥有效公司提供的紅細胞試劑盒；選用由珠海貝孛生物科技有限公司提供的凝聚胺試劑盒、于長春博訊生物技術有限公司提供的抗人球白蛋白微柱凝膠卡。

1.2.2 檢測方法

所有受檢者均分別接受凝聚胺法、微柱凝膠法檢測；取3mL靜脈血，用乙二胺四乙酸二鈉（EDTA-K2）抗凝，分離血清，待檢。

凝聚胺法：在檢測管內置入50ul血漿，并加入0.65mL低例子溶液，混勻，于室溫下靜置1min，然后在檢測管內滴入1滴凝聚胺，離心分離上清液，有明顯凝聚后，滴入1滴枸櫞酸重懸液，輕搖1min，于低倍鏡下紅細胞情況；以凝集散開，紅細胞游離為陰性，反之為陽性。

微柱凝膠法：以抗人球蛋白微柱凝膠卡配制Ⅰ～Ⅲ號0.8%～1.2%篩選譜，然后分別將50ul篩選紅細胞及50ul血漿加入到標記好的微柱凝膠中，置于377℃孵育器內，停留15min，然后行離心運動，設置離心速率為900～1500r/min。然后分析檢測結果，陰性：未與抗體結合的游離紅細胞在凝膠卡底部沉積；陽性：凝聚的紅細胞在凝膠中分散，或在微柱凝膠上層懸浮，對照組管內紅細胞沉積于凝膠卡底部。

確證實驗：對于兩種檢測方式篩查出的不完全抗體陽性者，以抗人球蛋白法、鹽水法行不完全抗體鑒定，并對鑒定結果進行分析。

1.3 統計學分析

數據資料均以SPSS 20.0處理，交叉配血檢測時間等定量資料行t檢驗，不完全抗體陽性檢出率等分類資料以χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩種檢測方式對不完全抗體檢出情況比較

凝聚胺法不完全抗體陽性者24例，其中2例為多次妊娠受血，4例為腫瘤術后受血，18例為有既往輸血史；微柱凝膠法檢出陽性者42例，其中8例為多次妊娠受血，8例為腫瘤術后受血，26例為有既往輸血史；兩者對比差異明顯（P<0.05），見表1。

表1 兩種檢測方式對不完全抗體檢出情況比較（n，%）

2.2 不完全抗體特異性鑒定結果分析

針對兩種檢測方式篩查出的不完全抗體患者，分別采用譜細胞性抗體特異性鑒定，其中抗C、抗D、抗E、抗e患者分別為2例、13例、25例，2例；兩種檢測方式檢出的24例患者，其不完全抗體特異性結果均與鑒定結果相符，見表2。

表2 不完全抗體特異性鑒定結果分析[n（%）]

2.3 兩種檢測方法交叉配血檢測時間比較

凝聚胺法、微柱凝膠法交叉配血檢測時間分別為（15.1±2.3）min、（30.5±6.9）min，兩者對比差異有統計學意義（t=59.888，P=0.001）。

3 討論

輸血作為臨床上常用的一種治療手段，其重要性已經得到廣泛關注，關于輸血安全的保障工作也越來越受重視。尤其是近些年來，隨著醫療技術的進步，因血型鑒定靈敏度所致的嚴重輸血反應已經大幅下降[3]。然而，人類紅細胞中血液系統共有29個，其中不完全抗體即血清中抗A及抗B之外的其他血型抗體。不完全抗體作為完全抗體的部分片段，和抗原結合后可在鹽水介質中形成凝聚現象，該現象經肉眼通常無法觀察到，同時不完全抗體還可能會引發溶血性輸血反應、新生兒溶血病等嚴重后果，甚至可能會造成交叉配血不合，嚴重時甚至可能會對患者的生命安全造成威脅。因此，輸血前加強對不完全抗體篩查的重視非常必要。若有不完全抗體陽性現象出現，則需選擇輸注相應抗原陰性，且交叉配血相合的紅細胞，確保輸注安全[4-5]。特別是針對需手術備血者，需提前1d開展抗體篩查，以保證有充足的時間進行抗體特異性鑒定及血液制品選擇，為手術順利進行提供保障。

多數不完全抗體均屬于免疫球蛋白G（IgG），該類抗體經鹽水介質檢測通常無明顯異常，而經過凝聚胺法、微柱凝膠法則可促使致敏紅細胞呈現出凝聚情況。其中凝聚胺法是一種陽離子集團，能夠中和紅細胞表面的負電荷，縮短紅細胞間的正常距離，引發紅細胞可逆性非特異性聚集；且IgG類抗體可引起紅細胞凝聚，于枸櫞酸重懸后非特異性聚集可逐漸消失但紅細胞聚集現象則仍持續存在，通過觀察其變化情況能夠對不完全抗體情況進行檢測[6-7]。而微柱凝膠法不僅有較高的反應靈敏度，同時還可提升弱抗體IgG的檢出情況，且肉眼可見凝聚情況。本次研究中對兩種檢測方法的應用情況進行了對比，結果顯示微柱凝膠法對不完全抗體的檢出率明顯高于凝聚胺法（P<0.05），且兩種檢測方式檢出的24例患者，其不完全抗體特異性結果均與鑒定結果相符；提示微柱凝膠法在不完全抗體檢測中的靈敏度更高。其可能是由于凝聚胺法的檢測結果極易受認為操作的影響，如離心機控制、震蕩觀察、加入試劑等，故而，可能會增加漏診風險；而微柱凝膠法則可實現自動化、標準化操作，能夠進一步減少人為因素對結果造成的影響，故而，檢測準確度更高[8-9]。此外本次研究結果還對兩種檢測方法交叉配血檢測時間進行了比較，結果顯示相對于微柱凝膠法而言，凝聚胺法的交叉配血檢測時間更短。

綜上所述，相對于凝聚胺法，微柱凝膠法雖然會導致交叉配血檢測時間延長，但其對于不完全抗體的靈敏度更高，有利于提升不完全抗體的檢出率，同時還具有操作簡單、結果穩定等優點，對于保證輸血安全意義顯著。