頂空氣相色譜法測定魚肝油酸鈉注射液中有機溶劑殘留量

呂廣義

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一、引言

目前，頂空氣相色譜法已經在很多研究領域得到了應用。其主要應用原理是，在特定條件下的各相態組分之間維持著動態的分配平衡，因此只需對組分的組成進行分析即可對目標成分的含量進行測定[1-2]。這項技術不同于傳統的萃取技術，有效規避了傳統萃取技術的缺陷[3]。由此，本次實驗將這種方法用于魚肝油酸鈉注射液的有機溶劑殘留檢測中，以建立一個良好的注射液殘留溶劑檢測方法。

二、實驗藥品和儀器

本次實驗所使用的藥品為：無水乙醇、N，N－二甲基甲酰胺（下簡稱DMF）、乙醚、魚肝油酸鈉注射液。本次實驗所使用的儀器如表1所示。

表1 本次實驗所使用的儀器

三、實驗方法

（一）色譜條件

本次實驗的色譜條件如表2所示。

表2 色譜條件設置

在設置好全部參數后，開始進樣，色譜柱內樣品先在40℃下恒溫8min，再以7℃每分鐘的升溫速率，升至70℃并保持4min，最后再以50℃每分鐘的升溫速率升至230℃，并恒溫5min。

（二）溶液配制

溶液共配制兩組，實驗組溶液使用一定量的魚肝油酸鈉注射液和DMF均勻混合制成，并精密量取一定量溶液置于頂空進樣瓶中待用；對照組選用乙醇和乙醚液體，同樣采用DMF溶液均勻混合，精密量取后，置于頂空進樣瓶中待用。

（三）線性關系考察

取對照組所制得的溶液，分別制備乙醇和乙醚比例不同的數組溶液，量取后再進行分析，對于分析所得到的數據，以峰面積（A）為縱坐標，以濃度（C，單位為μg/mL）為橫坐標，對數據進行線性擬合。經計算，擬合結果如下：

乙醇：A=0.2901C-0.7576，r=0.9998

乙醚：A=6.0392C-15.2775，r=0.9997

（四）加樣回收率實驗

精密量取一定量的實驗組溶液，并再次使用DMF溶液定容和搖勻，用于后續的回收率檢測，并采用同樣方式對對照組的回收率進行檢測，檢測完成后，進行回收率的計算。計算結果為：乙醇平均回收率為100.0%，RSD值為0.7。乙醚的平均回收率為100.0%，RSD值為0.8。

（五）檢測限的測定

取對照組的溶液適當進行稀釋后進行進樣測定，當信噪比為3時即可得到測定結果，經檢測，乙醇的檢測限為71ng/mL，乙醚的檢測限為3ng/mL。

（六）重復性實驗

分別精密量取實驗組樣品各3份放置于容量瓶中，使用DMF溶液定容并搖勻，作為測試液。后取測試組和對照組液體共9組，密封，分別測定，使用外標法測定有機溶劑的殘留量。經分析，所有樣品中均未檢出乙醇，但全部樣品均檢測出乙醚，平均含量為0.021%，RSD值為1.3%，這表明本次實驗選用的方法具有較好的重復性。

（七）樣品的最終測定

采用本實驗所建立的方法，對各組樣品溶液進行測試，其測定結果如表3。

表3 全部樣品測定結果

四、結束語

在本次實驗中，由于乙醇和乙醚的極性相差較大（乙醇極性大，乙醇極性小），因此，本次實驗選用中等極性的色譜柱，型號為DB-624，同時在測定有機溶劑時參考了《中華人民共和國藥典》（2015年版）中的測定方法，選用了較為合理的升溫程序設置，有效分離了乙醇和乙醚。由于本實驗需要測定的魚肝油酸鈉濃度較高，且分子鏈較長，容易粘連在色譜柱上，因此并不適用常規的直接進樣法。對于這種情況，本實驗采用頂空進樣法，在這種方法下，進入色譜柱的物質僅僅是樣品中殘留的有機溶劑氣化后的組分，主成分則不會進入到色譜柱中，有效確保了檢測結果的準確度。

除此之外，考慮到乙醚在魚肝油酸鈉注射液（水溶液）中溶解度較低的情況，因此本次實驗采用DMF溶液為溶劑，確保乙醇和乙醚均能在樣品溶液中有效溶解，由此，保證了對照品溶液的濃度準確。不僅如此，所選用的DMF溶液對于待測的乙醇和乙醚成分無明顯干擾，使得本次所建立的實驗方法具有較高的準確性和重復性，可用于后續的類似實驗。