羅山縣2020年高致病性禽流感血清學調查與分析

陳 俊

（羅山縣動物疫病預防控制中心，河南 信陽 464200）

高致病性禽流感是由A型流感病毒引起的禽類的一種急性、烈性、高度致死性傳染病。對于養禽業來說幾乎是毀滅性的，危害巨大。目前，由H5、H7亞型毒株引起的禽流感稱為高致病性禽流感，主要特征是突然死亡，頭部和面部水腫，流淚，呼吸困難，經常甩頭，常發出“咯咯”聲，腳鱗出血，雞冠和肉髯發紺，有的病雞驚厥、打滾或轉圈，發病率和死亡率可達100%。高致病性禽流感已被我國納入強制免疫計劃，并要求采用重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗（H5N1Re—11株和Re—12株，H7N9H7—Re3株）春秋兩季集中強制免疫。為了解羅山縣高致病性禽流感免疫效果，開展疫苗免疫效果評估工作，及時掌握羅山縣高致病性禽流感防控動態，2020年10月，羅山縣動物疫病預防控制中心組織開展免疫抗體檢測，以便為羅山縣高致病性禽流感監測預警提供參考。

1 抽樣檢測地點

選取高店、楠桿、周黨、子路、莽張、朱堂、彭新、東卜、廟仙、靈山等10個家禽養殖大鄉作為檢測調查地點。

2 材料與方法

2.1 采樣材料

采樣箱、5ml采血器、酒精棉球、干棉球、記號筆、采樣單、試管架、密封袋等。

2.2 檢測材料

離心機、離心管、移液槽、移液器、滴頭、1%紅細胞、一次性微孔板、高致病性禽流感血凝抑制試驗抗原、PBS液等。

2.3 采樣方法

結合羅山縣春秋兩季強制免疫實際情況，對10個鄉鎮在集中免疫21d后進行了抽樣抗體檢測，每個鄉鎮隨機抽取3個養殖場、1個散養戶和1個活禽交易市場。采取簡單隨機抽樣方式，每個養殖場和交易市場各抽取30份血樣，散養戶每戶抽取10份血樣。此次監測共采集樣品分布如下：30個家禽養殖場900份，10個散養戶100份，10個活禽交易市場300份，在50個場群中共采集樣品1300份。所有樣品嚴格按照操作規程采取翅靜脈采集血液，每只1.5～2ml，以3000rpm離心5min，析出血清，完善編號與登記，置于-20℃保存備檢。

2.4 檢測方法及依據標準

嚴格按照《高致病性禽流感診斷技術》（GB/T18936-2003）血凝抑制試驗（HI）檢測H5、H7亞型禽流感免疫抗體。判斷標準按照個體HI抗體效價≥24免疫合格個體，群體免疫抗體合格率≥70%為免疫合格群體，H5、H7群體免疫抗體合格率≥70%為免疫合格場群。檢測試劑禽流感H5亞型病毒（Re-11株）、（Re-12株）血凝抑制試驗抗原，批號均為：2019005，H7N9（H7-Re3株）抗原批號：20200901，以上三種抗原試劑均為哈爾濱維科生物技術有限公司產品。

3 結果與分析

在50個家禽場群中，使用了重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗的有38個場群，占場群數量的76%，使用其他禽流感類型疫苗或未免疫的有12個場群。在50個場群的1300份檢測樣品中，H5亞型病毒（Re-11株）個體抗體合格率為84.1%（1093/1300）；H5亞型病毒（Re-12株）個體抗體免疫合格率為83.8%（1090/1300）；H7N9（H7-Re3株）個體抗體免疫合格率為82.5%（1072/1300）。在采用（H5+H7）三價滅活疫苗免疫的38個場群中（包括30個家禽養殖場、7個活禽交易市場、1個散養戶共1120份血樣），H5亞型病毒（Re-11株）個體抗體合格率為90.3%（1011/1120）；H5亞型病毒（Re-12株）個體抗體免疫合格率為89.6%（1004/1120）；H7N9（H7-Re3株）個體抗體免疫合格率為89.5%（1002/1120）。通過檢測結果顯示，對于使用重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗的養殖場群體合格率和個體合格率均高于使用其他疫苗和未免疫的場群，且差異較大（具體比率詳見表1至表3）。

表1 免疫場群比例

表2 50個場群樣品抗體合格率

表3 38個免疫場群樣品抗體合格率

在50個場群的1300份樣品中，雞樣品為1117份，鴨樣品為155份，鵝樣品為28份。其中雞、鴨、鵝H5亞型病毒（Re-11株）個體抗體合格率分別為85.6%（956/1117）、78.7%（122/155）、53.6%（15/28）；H5亞型病毒（Re-12株）個體抗體免疫合格率分別為84.9%（948/1117）、83.2%（129/155）、46.4%（13/28）；H7N9（H7-Re3株）個體抗體免疫合格率為83.2%（929/1117）、84.5%（131/155）、42.9%（12/28）。結果顯示，雞、鴨、鵝個體抗體合格率依次降低，雞、鴨抗體合格率明顯高于鵝。（個體免疫合格率見下表4）

表4 雞、鴨、鵝個體免疫合格率

4 小結與討論

此次共抽查羅山縣10個鄉鎮50個家禽養殖場，通過血清學檢測結果表明，家禽養殖場使用重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗完全可以達到免疫保護水平，而且效果顯著。羅山縣大多數鄉鎮普遍免疫較好，H5、H7亞型場群合格率和個體合格率均高于70%，僅個別場、戶未檢測到H7亞型禽流感免疫抗體。

從此次檢測數據和調查情況來看，羅山縣秋防場群免疫密度未達到100%。究其原因是個別家禽養殖戶對該病重視程度不夠，防控力度不強，有一些養殖場、戶沒有替換使用（H5+H7）三價滅活疫苗，甚至個別散養戶根本就未免疫。建議畜牧部門加大宣傳力度，普及家禽養殖場、戶嚴格按照免疫程序，使用重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗進行春秋兩季集中強制免疫，同時做好抽樣檢測工作，對免疫不合格的場群及時進行補免，確保羅山縣家禽養殖業健康穩定發展。