表達IBDV VP2蛋白的基因Ⅶ型重組新城疫病毒的構建及鑒定

杜倩茹，王楠楠，任廣彩，葉俊賢，羅 瓊,3，容 芳，何獻銘，王 婷，劉郁夫,，陳瑞愛,*

(1.華南農業大學 獸醫學院，廣東 廣州 510642；2.華農(肇慶)生物產業技術研究院有限公司，廣東 肇慶 526238；3.肇慶大華農生物藥品有限公司，廣東 肇慶 526238)

傳染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus，IBDV)是一種具有二十面體核衣殼結構的無包膜雙鏈RNA病毒，感染雞引起急性、高度傳染性、免疫抑制性疾病。IBDV超強毒株感染雛雞，可導致極高死亡率，造成嚴重經濟損失[1-2]。目前國內主要采用低致病力或中等毒力活疫苗免疫雛雞的方法防控IBDV，但常受母源抗體干擾或流行毒株抗原變異而導致免疫失敗，防控效果不佳[3]。

隨著反向遺傳技術的不斷成熟與廣泛應用，國內外學者己經證實新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV)作為疫苗載體，具有表達外源蛋白的潛力[4]。NDV作為疫苗載體有以下優勢：NDV基因組在進行RNA轉錄時呈現“跳躍”式轉錄；NDV可在雞胚中快速高效繁殖，生產成本低；NDV可有效誘導機體產生較強的體液和細胞免疫應答，具有一定的免疫佐劑作用[5]。這些特性使NDV成為理想的病毒載體，但先前NDV載體疫苗研究多以基因Ⅱ型疫苗株LaSota為骨架，以近年來新流行的基因Ⅶ型NDV為載體的報道較少。

IBDV抗原性主要取決于A片段上VP2基因，其編碼的VP2蛋白是IBDV主要的結構蛋白，能誘導機體產生中和抗體[6]。因此本研究通過反向遺傳技術，以基因Ⅶ型NDV弱毒株為骨架，在NDV基因組P基因和M基因之間的非編碼區序列中插入IBDV的VP2基因，獲得表達IBDV VP2蛋白的NDV重組病毒，為進一步研發NDV和IBDV新型二聯疫苗提供基礎。……