豬圓環病毒2型和4型雙重PCR檢測方法的建立
2021-09-10 05:46:00侯承堯田潤博崔建濤陳紅英
中國獸醫學報
2021年8期
徐 通,侯承堯，田潤博,崔建濤,趙 麗，陳紅英*
(1.河南農業大學 動物醫學院，河南 鄭州 450002；2.河南牧業經濟學院 動物醫藥學院，河南 鄭州 450046)
豬圓環病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)屬于圓環病毒科圓環病毒屬，是迄今為止發現的一種最小的、無囊膜的、單股環狀DNA病毒，其全基因組含有1 766～1 779個堿基[1-2]。豬圓環病毒病(PCVAD)是由PCV2引起的一系列疾病的總稱，主要包括患斷奶仔豬多系統衰竭綜合征(PMWS)、仔豬先天性震顫(CT)、豬皮炎和腎病綜合征(PDNS)、豬呼吸道疾病綜合征(PRDC)以及繁殖障礙疾病[3-6]。自2000年郎洪武等[7]在我國報道PCV2以來，我國豬群PCVAD頻發，且死亡率不斷增加，給我國養豬業造成了巨大的經濟損失。
2019年ZHANG等[8]報道在患有PCVAD的豬中發現了1種新型PCV，命名為豬圓環病毒4型(PCV4)。該病毒的基因組大小為1 770 nt，其結構與PCV2相似，主要編碼Cap和Rep2個基因，其中Cap基因為687 nt，編碼228個氨基酸；Rep基因為891 nt，編碼296個氨基酸。TIAN等[9]從患有嚴重臨床疾病(包括PDNS、腹瀉和呼吸道癥狀)的豬中鑒定出PCV4，表明PCV4與PCVAD密切相關。
PCV2感染可引起豬免疫抑制，臨床上經常出現 PCV2 與豬其他病原共感染，使PCVAD的臨床表現變得復雜，且發病豬死亡率增加[10-11]。已有多個研究表明臨床上PCV4常與PCV2混合感染[8-9]。為了監控PCVAD疫情，急需建立一種快速、準確、操作簡單、靈敏和特異的PCV2/4檢測方法。目前PCV2和PCV4已有單一PCR檢測方法，迄今尚未有同時檢測2種病原的方法。因此，本試驗建立了一種特異、靈敏且同時檢測和鑒別PCV2/4的雙重PCR方法，為監測PCV2/4在我國的發生與流行提供分子診斷技術支持，對于PCV2/4的流行病學調查具有重要現實意義。
1 材料……
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