大熊貓犬瘟熱抗體間接ELISA方法的初步建立及應用

潘廣林，趙鵬鵬，高更更，雷穎虎，駱 琛，王興龍

(1.秦嶺大熊貓研究中心 珍稀野生動物救護基地，陜西 周至 710402;2.西北農林科技大學 動物醫學院，陜西 楊凌 712100)

作為中國的標志性物種，大熊貓因其特殊的生態價值和科學價值而受到廣泛的關注。通過建立自然保護區及人工繁殖等一系列措施，大熊貓數量有了較大的增長。但近年來，疾病給大熊貓保護造成嚴重威脅，其中犬瘟熱最嚴重[1-2]。犬瘟熱是由犬瘟熱病毒(canine distemper virus，CDV)引起的一種急性、高致死性傳染病，臨床上以雙相熱、眼鼻黏膜分泌物增多等為主要特征。目前針對該病尚未開發出特異性的藥物，疫苗免疫是預防犬瘟熱的有效措施。由于缺乏大熊貓專用犬瘟熱疫苗，因此多以犬用疫苗代替。但將該類疫苗用于大熊貓等野生動物存在一定的風險，犬用疫苗免疫后引起大熊貓和其他野生動物死亡或發生不良反應的案例在國內外均有報道[3-6]。雪貂源犬瘟熱重組疫苗是一種新型犬瘟熱疫苗，其安全性已經得到驗證[7-9]，但由于缺少犬瘟熱血清學檢測方法，其免疫效果需要進一步研究確定。

對大熊貓全基因組及IgG重鏈的分析表明，大熊貓與犬的基因組最接近[10-11]，提示抗犬IgG二抗具有可替代抗大熊貓IgG二抗用于大熊貓疾病血清檢測的可能。葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal protein A，SPA)作為金黃色葡萄球菌細胞壁上的蛋白成分，能與大多數動物的IgG Fc片段非特異性結合，可替代傳統酶標二抗用于傳染病的診斷[12]，但SPA能否用于大熊貓疾病的血清學檢測尚不明確。……