重組溶瘤腺病毒對肺癌干細胞的抑制作用

李文杰，蘭 添，王茂鵬，李一權，尚 超，肖朋朋*，孫文超*，金寧一 *， 李 霄*

(1.溫州大學 病毒學研究所，浙江 溫州 325000；2.長春中醫藥大學 吉林省院士工作站，吉林 長春 130122)

癌癥是人類死亡的主要病因之一。2020年，全球大約有1 930萬例新發癌癥病例和近1 000萬癌癥死亡病例,其中肺癌新發病例大約220萬，發病率僅次于乳腺癌居第二位，并且肺癌的死亡率在癌癥中排名第一，大約每年有 180 萬人因肺癌死亡(18%)[1]。在癌癥內部有一部分細胞被稱為癌癥干細胞，這部分細胞在癌癥起始、治療抵抗、轉移和復發中起關鍵作用[2]。這意味著，以肺癌干細胞為靶標可能是根除肺癌的有效治療策略。靶向殺傷癌癥干細胞可能有助于開發針對癌癥的新型治療策略，在治療癌癥時可能具有臨床優勢。

本課題組前期構建了對腫瘤細胞具有特異性殺傷作用的重組溶瘤腺病毒Ad-Apoptin-hTERTp-E1a(Ad-VT)[3]，Ad-VT使用腫瘤特異性啟動子 hTERTp來誘導其在腫瘤細胞中的特異性復制，同時含有 VP3 基因，表達具有腫瘤特異性殺傷作用的 Apoptin 蛋白，能夠同時實現在腫瘤細胞中的特異性復制及對腫瘤細胞的特異性殺傷作用。Ad-Mock 為不含 hTERTp和 Apoptin 基因的腺病毒載體。本研究擬利用課題組前期構建的Ad-VT作用于肺癌干細胞，分析重組溶瘤腺病毒對肺癌干細胞的殺傷作用，探討Ad-VT對肺癌干細胞的抑制作用。

1 材料與方法

1.1 材料重組溶瘤腺病毒由本實驗室構建并保存；人肺癌干細胞A549-CSC由本實驗室經磁珠分選所得并保存；CCK-8購自日本同仁；JC-1購自美國 Life 公司； Transwell Permeable Support購自美國 Corning公司；BIOCOAT Matrigel 侵襲小室、Annexin Ⅴ-FITC/PI 試劑盒購自美國 BD 公司。……