淺綠色氣球菌噬菌體vB_AviM_AVP編碼蛋白的表達(dá)純化和功能分析

張 昊，襲恒豫，畢斕婷，趙日虹，冀亞路，王心舞，王子晶，顧敬敏，韓文瑜

(吉林大學(xué) 動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，吉林 長(zhǎng)春 130062)

淺綠色氣球菌 (Aeroeoccusviridans)是過(guò)氧化氫酶和氧化酶陰性、微需氧性和非運(yùn)動(dòng)性細(xì)菌，一種革蘭陽(yáng)性球菌[1]，廣泛分布在環(huán)境中，由于其形態(tài)與鏈球菌很相似且常引起混合感染，故二者常混淆[2]。淺綠色氣球菌雖然不是一種常見(jiàn)的病原菌，但卻是潛在的機(jī)會(huì)病原菌，當(dāng)機(jī)體免疫力下降或免疫功能不健全時(shí)，可以引起人類心內(nèi)膜炎、敗血癥、菌血癥以及關(guān)節(jié)炎等[3]；在獸醫(yī)臨床上，可引起豬的腦膜炎、肺炎、尿路感染和關(guān)節(jié)炎，牛臨床和亞臨床乳腺炎等。目前，治療由淺綠色氣球菌引起的感染仍以抗生素為主。但近期研究表明，新分離的淺綠色氣球菌具有多重耐藥性[4]，尋找新的治療方法已經(jīng)迫在眉睫。

噬菌體是一種能夠特異性識(shí)別、感染和復(fù)制宿主細(xì)菌的細(xì)菌病毒[5-6]，由于其具有特定的殺菌能力，在20世紀(jì)20年代早期，噬菌體一直被認(rèn)為是治療性的藥物[7]。然而，由于抗生素的廣泛應(yīng)用，這種治療方法被擱淺[8]。近年來(lái)，由于多重耐藥細(xì)菌在全球多地廣泛出現(xiàn)，以噬菌體為治療的方法得到了廣泛關(guān)注，裂解酶的應(yīng)用也得到了推廣。本研究根據(jù)已經(jīng)報(bào)道的淺綠色氣球菌噬菌體vB_AviM_AVP的基因組[9]，對(duì)LysORF86、LysORF94、LysORF90和LysORF98進(jìn)行原核表達(dá)與純化，并對(duì)其活性進(jìn)行初步研究。

1 材料與方法

1.1 菌株和質(zhì)粒淺綠色氣球菌AV-X1、N14-1，金黃色葡萄球菌R196、鏈球菌SS42、 Pet-15b由吉林大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院微生物學(xué)與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室保存；……