HPLC法測(cè)定2-氨基-3,5-二溴苯甲醛的含量

李運(yùn)嬋 何慶國(guó) 李曉

摘要：目的 建立HPLC法測(cè)定2-氨基-3，5-二溴苯甲醛（簡(jiǎn)稱SM）含量的方法。方法 色譜柱：C18柱，柱溫：40℃，流動(dòng)相：磷酸鹽緩沖液（pH7.00）：乙腈=55：45，流速1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)：245nm。結(jié)果 SM線性范圍為0.1996～19.9598 μg/ml，線性良好（r=0.9999），平均回收率為100.4%，RSD為0.50%。結(jié)論 該方法靈敏，快速，結(jié)果準(zhǔn)確，可用于SM的質(zhì)量控制。

Abstract： Objective To establish an HPLC method for the assay of 2-amino-3，5-dibromobenzaldehyde（SM）. Method Chromatographic column： C18 column， column temperature：40℃，Mobile phase： phosphate buffer（pH7.00）： acetonitrile =55：45，flow rate：1.0ml/min， Detection wavelength：245nm. Results The linear range of SM was 0.1996～19.9598 μg/ml. The linearity was good （r=0.9999）， the average recovery was 100.4%， and the RSD was 0.50%. Conclusion The method is sensitive， rapid and accurate， and can be used for the quality control of SM

【中圖分類號(hào)】R4 ? ? ? ?   ? 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A ? ? ? ? ? ? 【文章編號(hào)】2107-2306（2021）05-139-01

2-氨基-3，5-二溴苯甲醛為類白色或淺黃色固體粉末，分子式C7H5Br2NO，分子量278.9，CAS號(hào)：50910-55-9，在藥物合成中應(yīng)用廣泛。它是合成鹽酸氨溴索和鹽酸溴己新的重要中間體，本文主要建立了SM含量測(cè)定的高效液相色譜法，該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)。

1 儀器與試藥

Waters高效液相色譜儀;梅特勒電子天平。

2-氨基-3，5-二溴苯甲醛（自制），甲醇、乙腈為色譜純。

2方法學(xué)驗(yàn)證

2.1 色譜條件

色譜柱：C18柱（4.6×250mm，5μm）;流動(dòng)相：磷酸鹽緩沖液（pH7.00）：乙腈=55：45;檢測(cè)波長(zhǎng)：245nm;柱溫：40℃;流速：1.0ml/min;進(jìn)樣量：10μl。

2.2 線性關(guān)系 精密稱取SM 10.27mg置10ml量瓶中，用甲醇分別稀釋成0.2、1.0、2.0、4.0、10.0、20.0 μg/ml的溶液，各精密量取10μl注入液相色譜儀，進(jìn)樣測(cè)定峰面積。以色譜峰峰面積（A）為縱坐標(biāo)，濃度（C）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并進(jìn)行線性回歸，得回歸方程：A=28454C-3718.74，r = 0.9999，結(jié)果表明鹽酸溴己新在0.1996～19.9598 μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.3 最低檢測(cè)限 按峰高為噪音的3倍計(jì)算，SM的最低檢測(cè)濃度為0.0603μg/ml。

2.4 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批SM，分別精密稱取6份50.25、50.18、50.18、50.15、50.14、50.12mg置25ml量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，并按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算含量分別為99.87%、99.90%、99.92%、99.89%、99.90%、99.95，RSD為0.02%，結(jié)果表明該起始原料制備方法重復(fù)性良好。

2.5 精密度試驗(yàn) 不同時(shí)間不同實(shí)驗(yàn)人員采用不同儀器取同一批SM，分別精密稱取6份50.55、50.25、50.36、50.30、50.18、50.29mg置25ml量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，并按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果6份RSD為0.21%，表明精密度良好。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取“2.2”項(xiàng)下濃度20μg/ml的SM溶液，分別于制備后的0、2、4、6、12、16、24h進(jìn)樣，按上述色譜條件測(cè)定，峰面積的RSD為0.35%，表明溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.7 含量測(cè)定 分別取3批不同SM約40mg，置于50ml量瓶中，依法溶解、稀釋，搖勻，按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見表1。

3 討論

3.1 本實(shí)驗(yàn)對(duì)SM的含量測(cè)定進(jìn)行了考察，得到了液相圖譜，發(fā)現(xiàn)SM在0.1996～19.9598μg/ml濃度范圍內(nèi)線性良好（r=0.9999），平均回收率為100.4%，RSD為0.50%。

3.2 同時(shí)對(duì)自制3批樣品按高效液相色譜法進(jìn)行含量測(cè)定，結(jié)果符合規(guī)定，本方法測(cè)定SM的含量，回收率高，線性良好，符合定量分析要求。

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