氫化物發生原子熒光法測定碭山產地水果中硒含量

謝小雪，方迎春，劉龍剛

（皖北衛生職業學院，安徽宿州 234000）

硒是人體內具有多重生物學功能的微量元素，被稱為生命的保護劑[1-2]，由于人體自身不能合成硒元素，主要利用食物供給補充硒的含量。攝入硒含量過低不能滿足人體日常需求，攝入過量也可能造成中毒現象。因此，人們在補硒過程中需充分了解富硒食品中硒的含量、賦存形式和分布規律，達到適量攝入的目的。

現階段，世界農業形勢發生了很大變化，人們對食物的要求不再是能吃飽，提高人體免疫力的功能型糧食需求與日俱增。我國糧食安全應從“溫飽型”糧食生產向“功能型”糧食生產轉變，富硒功能農業作為糧食轉型產業的典型代表，以其特有的保健功能性，成為新農業發展的領軍產業[3]，不僅能夠有效提高農民收入、改善農業經濟效益，還能實現增強人們綜合身體素質的目標[4]。由此可見，富硒功能農業的發展能有效促進中國結合自身優勢進行農業產業升級，推進農業產業轉型。目前我國富硒食品的國家標準及行業標準并不全面，建立簡單快捷有效的檢測方法對富硒食品進行硒含量測定，有助于規范富硒食品的市場，打擊遏制假冒偽劣產品冒充富硒食品混亂市場。

碭山縣是位于安徽省最北端以水果種植業為主的農業縣，主要種植的水果包括碭山酥梨、蘋果、油桃等。面對當前功能型農業的發展機遇，應科學統籌，優化品種，提高利潤，加強碭山富硒水果品牌建設，充分挖掘硒資源的經濟效益，將有效促進本地區經濟發展，能夠更好帶動本地區發展。

本文以碭山縣的酥梨、蘋果、油桃為研究對象，通過氫化物發生-原子熒光法對碭山產地水果中的硒含量進行測定，為碭山縣開展富硒水果產業提供數據支持，為人們通過食品補硒提供更加科學的指導。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

碭山酥梨、蘋果、油桃購買自碭山縣果園場、碭山縣超市。硒標準液，濃度1 000 μg/mL，鹽酸、硝酸、硼氰化鉀、氫氧化鉀和氫氧化鈉，均為分析純。

1.2 儀器與設備

AFS-9700原子熒光光度計；原子熒光空心陰極燈Se燈；BD-15B型高速多功能粉碎機；可調量程移液器（20～200 μL、100～1 000 μL、500～5 000 μL）；AL106 電子天平；蒸餾水。

1.3 實驗方法

1.3.1 標準溶液的配制

精密量取濃度為1 000 μg/mL的Se元素標準溶液至50 mL容量瓶中，配成濃度為10 μg/mL的硒標準儲備使用液。精密量取1.0 mL硒標準儲備使用液至100 mL容量瓶中，配成100 μg/L的硒標準使用液。分別量取0 mL、2.5 mL、5 mL、7.5 mL、10 mL硒標準使用液于25 mL容量瓶中，配制濃度為 0 μg/L、10 μg/L、20 μg/L、30 μg/L、40 μg/L 的標準系列溶液，備用。

1.3.2 樣品前處理

采用自來水將購買來的碭山酥梨、蘋果、油桃仔細清洗干凈后，用刀將樣品去皮，將果肉和種子分離，每種樣品都分為果肉和果皮兩部分，果肉用攪拌機打碎至糊狀，果皮用烘箱低溫烘干24 h后，剪碎加入粉碎機打碎，分別裝入不同的塑料袋，貼上標簽，備用。

濕法消解法。用電子天平分別稱取樣品各0.25 g，再分別將稱得的樣品置于100 mL干燥燒杯中。加入適量高氯酸和濃硝酸（V∶V=5∶3）的混合液8 mL，分批放置于電熱板上低溫加熱消解至液近至無色并冒出大量白煙，停止加熱。將消解液置于通風櫥中冷卻至室溫，再加入1 mL濃鹽酸繼續加熱至消解液微沸，停止加熱并冷卻至室溫。將燒杯中的消解液轉移至25 mL容量瓶中，采用蒸餾水多次清洗燒杯壁，將清洗后的溶液一并轉移至容量瓶中，定容至容量瓶的刻度線，貼上標簽備用。

1.3.3 儀器工作條件

在儀器推薦條件的基礎上，確定的儀器條件如下：負高壓290 V；總燈電流80 mA；元素燈主/輔陰極各40 mA；原子化器高度8 mm；載氣300 mL/min；屏蔽氣900 mL/min。

2 結果與分析

2.1 載流濃度對硒信號的影響

本文采用控制變量法，通過改變鹽酸的濃度，其他條件不變，測定固定濃度Se標準溶液，研究不同載流濃度對熒光信號的影響，見圖1。當鹽酸體積濃度范圍在0%～5%時，硒的熒光強度隨著鹽酸濃度的升高而增大，當鹽酸體積濃度超過5%后，載流濃度對原子熒光強度的影響變化不大。高濃度的鹽酸溶液會對儀器造成損害，最終選擇5%的鹽酸溶液作為載流的最佳濃度。

圖1 載流對熒光信號的影響

2.2 還原劑濃度對硒信號的影響

本文采用控制變量法，通過改變還原劑硼氰化鉀的濃度，其他條件不變，測定固定濃度Se標準溶液，研究還原劑濃度不同對熒光信號的影響，見圖2。當硼氫化鉀的體積濃度在0.3%～1.5%范圍內時，熒光信號隨著還原劑濃度的增大而升高，當還原劑濃度超過1.5%后，還原劑濃度變化對熒光信號的影響不大。因此最終選擇1.5%的硼氫化鉀作為最佳還原劑濃度。

圖2 還原劑對熒光信號的影響

2.3 負高壓的選擇

固定硒的標準溶液濃度為8.0 ng/mL，其他測定條件不變，探究負高壓在270～330 V變化情況，見圖3，選擇的負高壓值越高，熒光強度會逐步升高，負高壓過高會使機器出現噪音、基線不穩等情況，因此選擇負高壓為290 V。

圖3 負高壓對熒光信號的影響

2.4 燈電流的選擇

固定硒的標準溶液濃度為8.0 ng/mL，其他測定條件不變，探究燈電流在50～100 mA范圍內的變化情況，見圖4，實驗數據表明燈電流越高所測熒光強度越大，但在測量過程中燈電流太高會影響空心陰極燈的使用壽命，因此選擇燈電流為80 mA。

圖4 燈電流對熒光信號的影響

2.5 標準曲線的繪制

在上述實驗條件的優化后，在最佳的實驗條件下采用HG-AFS對標準系列溶液進行測量，得出相應的熒光值，建立相應的標準曲線。由表1可知，該方法在0.00～40.00 μg/L呈現良好的線性關系，相關系數為0.999 8。

表1 HG-AFS測Se的標準曲線相關數據

2.6 精密度和檢出限

對硒標準空白溶液連續測量11次，以空白溶液濃度的3倍標準偏差除以工作曲線的斜率作為儀器最低檢出限為0.012 3 μg/L。對20.00 ng/ml硒標準溶液樣品進行11次平行測定，測得儀器精密度為0.46%。

2.7 樣品中硒含量測定及加標回收率

采用上述方法（HG-AFS）按最佳實驗條件對上述水果樣品進行了含量測定，測定結果顯示樣品中硒元素含量由多到少依次是酥梨＞蘋果＞油桃，對樣品進行加標回收實驗。由表2可知，該方法有良好的回收率為90.0%～106.7%。本文建立的氫化物發生-原子熒光光度法測定碭山產地水果中硒含量效果良好。

表2 加標回收率實驗

3 結論

本文應用氫化物發生原子熒光光譜法測定碭山酥梨、蘋果和油桃中硒含量，具有操作簡單、快速、靈敏度高等特點，可滿足日常檢測的需要，為進一步研究和評價碭山水果中的硒水平提供依據。