雛番鴨鴨3型腺病毒與鴨圓環病毒共感染診斷報告

王秀娟 福清市農業綜合執法大隊 福建福清 350300

鴨3型腺病毒（Duck adenovirus 3，DAdV-3）屬于腺病毒科（Adenoviridae）I群腺病毒屬成員[1]，是2014年以來在我國流行的一種引起番鴨肝臟腫大、出血和壞死為特征的新發疫病病原[2]，最早由張新珩等在廣東的番鴨養殖場報道發生該病[3]，現已在我國的安徽、福建、浙江、江西、河南、云南等大部分地區流行，對我國番鴨養殖業造成了重大的經濟損失[4-5]。鴨圓環病毒（Duck circovirus，DuCV）病是近些年來新發現的一種高度接觸性傳染病，主要侵害鴨的免疫系統，臨床上以鴨生長遲緩、器官萎縮和淋巴細胞減少為主要致病特征，可感染各品種、各日齡鴨。臨床上由于鴨圓環病毒感染多呈亞臨床狀態，患鴨常因機體免疫應答能力下降，易導致其它疫病并發或繼發感染，從而造成更大的經濟損失[6-7]。現將2021年5月福清市漁溪鎮郭某番鴨養殖場雛番鴨鴨3型腺病毒與鴨圓環病毒共感染的診斷情況報道如下，以期為同行提供參考。

1 發病情況

2021年5月，該養殖場飼養的番鴨14日齡時發病，鴨群采食量和飲水量下降、喜扎堆蹲伏、體溫升高、排水樣稀糞，隨后陸續出現死亡，至21日齡時，鴨群發病率為45%左右，病死率約25%；就診時患鴨體況消瘦、羽毛雜亂、翅尖和尾部被毛斷裂嚴重、背部皮膚外露。

2 剖檢病變

剖檢病死鴨，可見肝臟腫大、出血，質地變脆；脾臟呈大理石樣外觀，腎臟腫大、出血；胰腺有彌散性出血點；腸道充盈，腸壁稀薄。

3 實驗室檢測

無菌采集病死鴨肝臟、脾臟、腎臟和腦組織進行實驗室檢測。采集的樣品分成2份，一份用于細菌分離，另一份用于鴨常見病毒檢測。

無菌取病死鴨肝臟和腦組織等病料分別接種于麥康凱瓊脂平板和血瓊脂平板上，于37℃恒溫培養24~48 h。以病毒DNA/RNA抽提試劑盒，按照產品說明書提取樣品中的核酸，以提取的核酸作為模板，開展禽流感病毒、水禽細小病毒、鴨3型腺病毒、鴨甲肝病毒、鴨呼腸孤病毒、鴨圓環病毒、水禽禽1型副黏病毒等雛番鴨常見病毒核酸檢測，(RT-)PCR擴增產物經1%瓊脂糖凝膠進行電泳。

采集的樣品經平板劃線培養未分離到細菌。

針對7種病毒的核酸(RT-)PCR檢測發現，從樣品中檢測到鴨3型腺病毒和鴨圓環病毒核酸雙陽性（見圖1），其余病原均呈陰性。將（RT-）PCR陽性擴增產物送福州尚亞生物科技有限公司進行測序，對獲得序列編輯后使用NCBI blast進行在線比對。結果，兩組序列分別與NCBI數據庫中的鴨3型腺病毒和鴨圓環病毒核苷酸序列同源性分別為100%和98.6%。

圖1 樣品PCR產物電泳圖

根據以上發病情況、臨床癥狀、剖檢病變及實驗室檢測結果，初步判定該群雛鴨發生鴨3型腺病毒與鴨圓環病毒共感染。

4 討論與體會

禽腺病毒是一類侵害禽類的病毒群，根據其抗原結構不同分為3個群，即Ⅰ群禽腺病毒、Ⅱ群禽腺病毒和Ⅲ群禽腺病毒。危害鴨群的腺病毒主要包括Ⅰ群腺病毒屬的Ⅰ群腺病毒血清4型、鴨腺病毒2型（DAdV-2）、鴨腺病毒3型（DAdV-3）和III群腺病毒屬的鴨腺病毒1型[DAdV-1，即產蛋下降綜合征病毒（EDSV）][1-2]。鴨3型腺病毒是近年來我國鴨群新出現的一種鴨源腺病毒，臨床上鴨感染該病毒后引起實質性臟器尤其是肝臟腫大、局灶性散狀出血，脾臟腫大，腎臟腫大、出血。該病發病率20%~50%、病死率40%~60%[2]。該病毒最早由張新衍等[3]從廣東地區表現為精神沉郁，剖檢肝臟黃化和出血的20~30 d番鴨組織中分離發現，經血凝試驗、理化試驗、透射電鏡觀察及基因組序列測定及分析，確定該病病原為鴨3型腺病毒。隨后萬春和等[4]、程龍飛等[5]先后報道了鴨腺病毒病的發生和流行。

鴨圓環病毒最早由Hattermann等[6]于2003年發現并報道。2008年，傅光華等[7]在我國大陸地區鴨群中首次檢測到鴨圓環病毒感染。該病臨床上主要表現為鴨免疫器官萎縮和生長受阻等，在鴨群中感染該病十分普遍，已成為威脅我國養鴨業的重要免疫抑制性疫病之一[2]。

近年來，養禽業發展迅猛，涌現出許多不同規模養禽企業、養殖合作社及大量散養戶，各自的飼養條件、設施、技術力量參差不齊。鴨場多數仍沿用傳統水面養殖，環境調控能力差、生產性能不穩定，導致鴨病頻發，疫病發生常呈亞臨床癥狀或多病原共感染情況，防疫形勢日益復雜，常出現老病未除新病不斷的局面。鴨圓環病毒和鴨3型腺病毒都是DNA病毒[1]，隨著養殖規模和密度的增加，鴨病的發生愈發頻繁，我國鴨群感染這兩種病毒較為普遍，臨床上二者單獨感染的病例較多，且嚴重阻礙鴨的生長發育，極大降低了鴨肉的產品質量，嚴重損害養殖生產企業的市場競爭力和經濟效益。鴨3型腺病毒與鴨圓環病毒共感染的病例報道較少，共感染病例的出現給臨床診斷帶來一些困難，容易造成誤診或漏診，因此，在診斷時除了要了解患鴨臨床癥狀和剖檢病變，還應結合病原流行病學、利用實驗室檢測等手段，以提高診斷的準確性。