子宮內膜癌中SOX11 表達及其與血管新生的相關研究

徐曉冬

近年來,我國子宮內膜癌的發病率不斷攀升。血管新生與子宮內膜癌的生長和轉移密切相關。血管生成不僅可以判斷腫瘤預后,也成為腫瘤治療新的靶點。然而血管新生與子宮內膜癌之間的相關機制并不明確,能否將抗血管生成應用于腫瘤的治療尚需進一步探討［1］。一系列與性別決定區Y 框基因［sex-determining Y(Sry) box-containing gene］同源、編碼轉錄因子的基因統稱SOX 家族,其共同特點是具有高度保守的HMG框(high-mobility group box,HMG-box)。SOX 家族近年來被廣泛關注,它與胚胎的早期發育有關。在腫瘤的發生發展中,SOX 基因的變異起到了至關重要的作用。SOX11 是SOX 家族中非常重要的干細胞標志蛋白,已被證實與多種惡性腫瘤的發生和發展有關,例如乳腺癌、胃癌、子宮內膜癌,SOX11 與這些惡性腫瘤的生物學行為密切相關。本研究通過檢測子宮內膜癌組織中SOX11 的表達與血管新生的相關性,探討SOX11在子宮內膜癌發病中的作用機制和診治前景。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016 年1 月～2019 年12 月本院收治的182例子宮內膜癌、子宮內膜癌前病變、子宮附件無病變的子宮脫垂或無器質性病變的異常子宮出血患者的病理組織標本。依據子宮內膜癌臨床分期(2015 FIGO 分期)分為子宮內膜癌組(62例)、子宮內膜癌前病變組(60例)、正常子宮內膜組(60例)。所有入組患者術前均未行激素、放化療。

1.2 染色方法 采用PV-9002 二步法免疫組化法進行免疫組化染色。采用SOX11 鼠多克隆抗體(ab154138,工作濃度1∶200)。所有實驗步驟嚴格遵守說明書進行。

1.3 觀察指標及判定標準 比較SOX11 在正常子宮內膜組、子宮內膜癌前病變組及子宮內膜癌組中的表達情況,采用免疫組化檢測在10×40 倍顯微鏡下觀察SOX11 蛋白的表達,評分參照Fromowitz 綜合計分法［1］。在統計分析中除外陰性均視為陽性。分析子宮內膜癌中SOX11 陽性表達與子宮內膜癌臨床特征的關系。比較正常子宮內膜組、子宮內膜癌前病變組、子宮內膜癌組的MVD 水平,MVD 計數遵從Weidner［2］推薦的測量方法。分析SOX11 的陽性表達與MVD 之間的關系。

1.4 統計學方法 采用SPSS23.0 統計學軟件處理數據。計量資料以均數±標準差(±s)表示,采用t檢驗；計數資料以率(%)表示,采用χ2檢驗；相關分析采用Spearman 相關分析。P<0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 SOX11 在正常子宮內膜組、子宮內膜癌前病變組及子宮內膜癌組中的表達比較 子宮內膜癌前病變組與子宮內膜癌組SOX11 表達陽性率比較,差異無統計學意義(χ2=0.270,P=0.604>0.05)。正常子宮內膜組的SOX11 表達陽性率低于子宮內膜癌前病變組和子宮內膜癌組,差異具有統計學意義(χ2=43.926、49.842,P=0.000、0.000<0.05)。見表1。

表1 SOX11 在正常子宮內膜組、子宮內膜癌前病變組及子宮內膜癌組中的表達比較 (n,%)

2.2 SOX11 陽性表達與子宮內膜癌臨床病理特征的關系 不同年齡子宮內膜癌患者SOX11 表達陽性率比較差異無統計學意義(P>0.05)；不同病理組織學分級、淋巴結轉移、癌組織浸潤深度及臨床分期子宮內膜癌患者SOX11 表達陽性率比較差異具有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 SOX11 陽性表達與子宮內膜癌臨床病理特征的關系 (n,%,n=62)

2.3 正常子宮內膜組、子宮內膜癌前病變組、子宮內膜癌組的MVD 比較 子宮內膜癌組的平均 MVD 明顯高于子宮內膜癌前病變組及正常子宮內膜組,差異具有統計學意義(t=10.601、26.225,P=0.000、0.000<0.05)。子宮內膜癌前病變組的平均 MVD 明顯高于正常子宮內膜組,差異具有統計學意義(t=11.690,P=0.000<0.05)。見表3。

表3 正常子宮內膜組、子宮內膜癌前病變組及子宮內膜癌組的 MVD 比較 (±s,個/HP)

表3 正常子宮內膜組、子宮內膜癌前病變組及子宮內膜癌組的 MVD 比較 (±s,個/HP)

注：與子宮內膜癌組比較,aP<0.05；與子宮內膜癌前病變組比較,bP<0.05

2.4 SOX11 的陽性表達與MVD 之間的關系 根據每例癌組織標本中每個標本SOX11 的免疫組化計分及MVD 計數行Spearman 相關分析,子宮內膜癌中SOX11陽性表達與MVD 顯著相關(r=0.869,P<0.05)。

3 討論

在女性生殖道三大惡性腫瘤中,子宮內膜癌近年來發病率逐年上升。探索子宮內膜癌的發病機制,尋找對腫瘤有效的治療辦法已經迫在眉睫［3］。相關研究表明,在血管生成前,實體腫瘤的平均直徑約為1.0～1.3 mm,從而保持腫瘤生長的平衡狀態,腫瘤處于休眠階段。一旦新生血管開始生長,腫瘤細胞將加速生長［4］。由于該理論的形成,在腫瘤治療的研究中,越來越多的研究者將目光聚焦到了抗血管生成治療中［5］。相關研究發現,血管新生是腫瘤組織生長所必須的［6,7］。Weidner 等［2］認為,在腫瘤組織中一些具有較高水平血管新生活性的腫瘤細胞成為了腫瘤生成和轉移的源頭。因此在腫瘤中對MVD 的相關研究成為熱點,通常采用對內皮細胞能夠進行特異性抗原染色的蛋白進行研究。

SOX11 屬于SOX 基因家族C 亞群編碼轉錄因子,在胚胎分化、神經細胞存活和細胞變異中起重要作用［8］。SOX11 的致癌潛力已在異種移植模型中得到證實,但其促進功能的具體機制仍不清楚［9］。研究結果證實,SOX11 可以促進腫瘤血管生成并使其生長和擴散［9］。Chang 等［10］發現,在子宮內膜癌組織中SOX11的表達較癌旁組織的表達明顯增高,SOX11 低表達的患者總生存期和無病生存期明顯高于SOX11 高表達的患者。敲除SOX11 基因后,子宮內膜癌細胞增殖和遷徙明顯受到抑制。Inoue 等［11］發現,在Ishikawa 細胞中SOX11 促進ALK 基因表達,進而通過NF-κB 和pAkt 通路促進上皮間質轉化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)、抑制細胞凋亡,提示SOX11 可以促進子宮內膜癌的進展。血管新生是腫瘤細胞生成的最重要機制之一［12］。Palomero 等［13］在研究中發現,與敲除SOX11 基因相比較,更多的血管生成基因富集在SOX11 中從而使MVD 增加。血小板衍生生成因子A(platelet-derived growth factor A,PDGFA)是一種唯一以SOX11 為靶點的染色質免疫沉淀反應因子。PDGFA參與腫瘤血管生成,促進內皮細胞的形成和招募間充質基質細胞。熒光素酶標記檢測顯示,SOX11 能夠通過旁分泌增加PDGFA 的轉錄。研究發現［14］,PDGFA分泌的條件是SOX11 陽性的細胞系中血管的增殖和遷移。因此,腫瘤中的血管新生是依靠PDGFA-SOX11而實現的。本研究中發現,SOX11 在正常子宮內膜組織中低表達,在子宮內膜癌組織中表達明顯增高,在子宮內膜癌中SOX11 的陽性表達和MVD 呈正相關(P<0.05)。SOX11 在子宮內膜癌中導致新生血管增加的機制可能是復雜的。在腫瘤的發生、發展和轉移中新生血管的生成起到重要的作用。

綜上所述,隨著子宮內膜癌的分期增加,血管新生逐漸增加,SOX11 的陽性表達增加。因此檢測SOX11蛋白表達可能為子宮內膜癌的發生、發展及診治提供關鍵線索。