市售食用植物油中玉米赤霉烯酮的檢測與分析

◎ 劉 正，李 婧

（天津市乳品食品監測中心有限公司，天津 300381）

玉米赤霉烯酮（ZEN）是真菌毒素的一種，又稱F-2毒素，主要是由禾谷鐮刀菌、尖孢鐮刀菌、木賊鐮刀菌、雪腐鐮刀菌等真菌菌種產生的有毒代謝產物。ZEN具有類雌激素作用，不僅影響生殖機能，還會產生免疫毒性、細胞毒性、遺傳毒性，損傷肝、腎等器官[1]，中毒癥狀會有惡心、發冷、頭痛、抑郁等現象。在極低濃度下，ZEN能促進細胞增殖、菌落形成和細胞遷移，且ZEN可導致DNA損傷[2]。

玉米赤霉烯酮污染范圍廣、危害大，主要分布于中國、日本、韓國、北歐、中歐等國家、地區，存在于小麥、玉米、高粱、大米等糧油作物中[3]。存儲加工環境、加工方式、制品類型、包裝方式等因素均對食用植物油的ZEN污染情況有影響，我國針對不同環節糧油作物中ZEN的污染情況持續進行監測。根據污染現狀和消費習慣各國制定了玉米赤霉烯酮在食品中的限量標準。我國根據人群膳食結構制定的《食品安全國家標準 食品中真菌毒素限量》（GB 2761—2017）對ZEN在小麥、小麥粉和玉米、玉米面（渣、片）中的限量均為60 μg·kg-1[4]。為了掌握食用植物油中玉米赤霉烯酮的污染狀況，因此設計本試驗，初步調查分析M市市場此產品的質量安全水平，指導消費者合理消費。

基于前期調查工作，本試驗隨機抽取M市市場、超市食用油樣品共計24批次，對食用植物油中ZEN污染進行液相色譜檢測，并對結果進行分析。

1 材料與方法

1.1 材料

隨機抽取M市市售食用植物油24批次，玉米油、花生油、大豆油、調和油樣品抽取比例為5∶3∶2∶2；玉米赤霉烯酮標準品。

1.2 儀器

島津LC-20AD液相色譜儀，配RF-20A熒光檢測器；氮吹儀；高速均質器。

1.3 試劑

PBS/吐溫-20緩沖液（稱取8.0 g氯化鈉、1.2 g磷酸氫二鈉、0.2 g磷酸氫二鉀、0.2 g氯化鉀，用900 mL水溶解，用鹽酸調節pH至7.0，加入1 mL吐溫-20,用水定容至1 L）；乙腈、甲醇；免疫親和柱。

1.4 樣品提取與凈化

1.4.1 提取

稱取油樣40.0 g于均質杯中,加入4.0 g氯化鈉和100 mL提取液,以高速均質器高速攪拌提取1 min,4 500 r·min-1離心10 min。移取10.0 mL上清液并加入40 mL水稀釋,混勻后4 500 r·min-1離心10 min，上清液備用。

1.4.2 凈化

將免疫親和柱連接于玻璃注射器下,準確移取10.0 mL上清液,注入玻璃注射器中。調節泵壓以1～2滴·s-1的流速通過免疫親和柱,直至有部分空氣進入親和柱中。依次用10 mLPBS/吐溫-20緩沖液和10 mL水淋洗免疫親和柱,流速為1～2 滴·s-1,直至空氣進入親和柱中,棄去全部流出液。準確加入1.5 mL甲醇洗脫,流速約為1 滴·s-1。收集洗脫液于干凈的玻璃試管中,于55 ℃以下氮氣吹干后,用1.0 mL流動相溶解殘渣,過膜后供液相色譜測定。

1.5 高效液相色譜分析條件

色譜柱：C18柱，柱長150 mm，內徑4.6 mm，粒度4 μm，或等效柱；流動相：乙腈-水-甲醇(46∶46∶8體積比)；流速：1.0 mL·min-1；檢測波長：激發波長274 nm，發射波長440 nm；進樣量：100 μL；柱溫：35 ℃。

2 結果與分析

2.1 標準曲線

準確吸取100 μg·mL-1的標準儲備液,用流動相稀 釋,配 制 成10 ng·mL-1、20 ng·mL-1、50 ng·mL-1、80 ng·mL-1和100 ng·mL-1的系列標準工作液。玉米赤霉烯酮標準曲線見圖1。由圖1可知，其標準曲線為Y=234.915*X+197.825，R2=0.999 930 3。

圖1 玉米赤霉烯酮標準曲線圖

2.2 質控樣品加標回收率

稱取空白食用油樣品40.0 g，設計3個濃度水平加標試驗，混勻提取凈化，上機測定。質控樣品回收率結果見表1。

表1 質控樣品加標回收率表

2.3 樣品檢測結果

對市場、超市抽取的24批次食用植物油樣品進行檢測，結果顯示ZEN全部未檢出。結果見表2。

表2 食用植物油抽檢結果統計表

3 結論與討論

通過對M市市場、超市的食用植物油的隨機抽樣檢測結果看，此環節污染物ZEN全部未檢出，說明M市ZEN超標風險較低，生產廠家對食用植物油原料和工藝管控較好。然而不同地區、不同氣候真菌毒素分布不同，且目前污染嚴重[5]。下一步結合真菌毒素之間的關聯性，分析不同地區的糧油作物真菌毒素污染情況，提高抽樣基數，擴大調查范圍，進一步提高試驗的科學性、代表性。