高效液相色譜法測定蔬菜中氨基甲酸酯類農藥殘留分析

◎ 李婷婷，李 玲，朱 璐

（1.淄博市疾病預防控制中心，山東 淄博 255000；2.濟寧市任城區疾病預防控制中心，山東 濟寧 272100）

在我國，隨著《中華人民共和國農產品質量安全法》的頒布與實施，蔬菜、水果中氨基甲酸酯類農藥殘留量的快速檢測備受關注。實踐中普遍采取氣相色譜儀氮磷檢測器，使用條件、樣品前處理及檢測器的相關要求特別嚴格，且檢測靈敏度較低。同時，由于氨基甲酸酯類農藥具有熱不穩定性，氣相色譜法的測定值較低。再加上蔬菜生長期相對較短，且流通速度快，對農藥殘留檢測的靈敏度、準確性、快速性要求較高。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 供試材料

從當地農貿市場購買重約3 kg的白菜為研究對象。

1.1.2 標準溶液

甲醇、乙腈和二氯甲烷，色譜純；丙酮，分析純（重蒸）；柱后衍生試劑鄰苯二甲醛（OPA）；巰基乙醇；氯化鈉，140 ℃烘烤4 h；農藥標準品由農業部環境保護科研中心提供，各濃度農藥標準品均使用甲醇稀釋，并將其放在-18 ℃環境中保存；超純水用Milli-Q超純水系統制備。

1.2 儀器與設備

安捷倫1200型高效液相色譜儀，配有柱后衍生反應裝置和熒光檢測器[2]；T-25basic勻漿機；3-30k高速冷凍離心機；N-EVAP-24氮吹儀，A10超純水純化系統；氨基固相萃取小柱（SPE柱）：300 mg。

1.3 試驗方法

1.3.1 樣品制備和提取

切開白菜樣品，取1 000 g，并切碎能夠食用的部分，將其置入到食物調理機中迅速粉碎，放入到容器中備用[3]。準確稱取25.0 g樣品，將其置入到勻漿機中，添加50 mL乙腈，高速勻漿2 min，過濾后將濾液置入50 mL具塞量筒，在量筒中提前放入5～7 g烘烤后的氯化鈉，過濾結束后將塞子蓋上，大幅度振蕩1 min，在室內常溫狀態下靜置分層，時間不得低于15 min[4]。

1.3.2 凈化

從具塞量筒中迅速抽取10.0 mL乙腈相溶液，將其置入100 mL燒杯中，并把燒杯放置在80 ℃水浴鍋中，持續加熱，并慢慢地向杯中輸入空氣流或氮氣，促使乙腈迅速蒸發近干。將2.0 mL的甲醇+二氯甲烷（5+95）的混合液加入殘渣中，溶解并蓋上鋁箔備用。使用4.0 mL甲醇+二氯甲烷（5+95）的混合液預洗氨基柱，預洗溶液面抵達吸附層表面時迅速添加樣品溶液，使用15 mL離心管對洗脫液進行收集，并使用3 mL甲醇+二氯甲烷（5+95）對燒杯洗滌1次，重復上述步驟。把洗脫液離心管放在氮吹儀上，水浴溫度50 ℃，氮吹蒸發近干，使用甲醇+水（15+85）的混合溶液精準定容到2.5 mL，混勻后過0.2 μm有機濾膜待測[5]。

2 結果與分析

2.1 萃取液體積條件的選擇

為了提高回收效果，需反復開展多次對比試驗，在整個凈化過程中分別選擇使用甲醇+二氯甲烷（1+99)和（5+95)兩個不一樣的萃取體積比凈化樣品，回收率結果詳見表1。

表1 回收率結果分析表（單位：%）

在本研究所采取的條件下，7種氨基甲酸酯類農藥能夠迅速分離，出峰順序分別是涕滅威亞砜、涕滅威砜、滅多威、3-羥基克百威、涕滅威、克百威、甲萘威。

2.2 各個標準物質分離情況

2.3 添加回收率和精密度

在白菜中加入 0.10 μg·mL-1和 0.50 μg·mL-1的 7 種氨基甲酸酯類農藥標準樣品，其回收率和相對標準偏差結果詳見表2。7種農藥回收率為90%～110%，滿足行業相關標準及要求；精密度保持在10%以內，表明方法精密度良好，可滿足此類農藥殘留分析相關要求。

表2 回收率及精密度表

3 結果與討論

本研究以市場上銷售的白菜為研究對象，采取高效液相色譜儀（配有熒光檢測器和柱后衍生系統）對7種氨基甲酸酯類農藥的殘留量進行準確測定。通過不同甲醇與二氯甲烷洗脫體積比對比得知，體積比為5+95時，標準物質添加回收率明顯高于1+99的溶劑比例，最大提高幅度大于5%；對標準物質添加濃度進行改變可知，添加量為0.50 μg·mL-1時，回收率均超過添加量為0.10 μg·mL-1，最大提高幅度為9%。通過對以上兩個關鍵的前處理步驟進行優化可知，優化后的前處理分離效果較好，檢測回收率和精密度能夠滿足農藥殘留分析要求。