急重癥胰腺炎合并肝損傷患者IL-10、TGFβ及其mRNA水平與肝功能指標的相關性

焦芳芳 張偉 武云珍

急重癥胰腺炎(SAP)是一種發生于腹部的常見外科急癥，患者早期發病隱匿，但可較為迅速發展導致器官功能損害，使得患者院內死亡率增加[1]。肝損傷是SAP患者較常見表現，影響機體代謝進而增加其病死風險[2]。目前研究表明，SAP多由胰腺組織自身消化出現局部炎癥反應而引起，因而促炎細胞因子和炎癥介質在其中發揮舉足輕重的作用[3-4]。本研究分析SAP合并肝損傷患者外周血中白細胞介素10(IL-10)、轉化生長因子β(TGFβ)及其轉錄物(mRNA)與肝功能指標的相關性，結果如下。

資料與方法

一、基礎資料

收集東營市人民醫院2018年10月至2020年10月60例SAP患者，根據其有無合并肝損傷分為合并組(合并肝損傷)及SAP(未合并肝損傷)組，每組30例，另納入同期體格者30名(對照組)；其中合并組：男、女分別為17、13例；年紀48～72(54.34±8.67)歲；體質量指數17～26(22.45±2.23)kg/m2；SAP組：男、女分別為19、11例；年紀47～71(52.86±7.74)歲；BMI 17～25(22.67±2.18)kg/m2；對照組：男、女分別為18、12名；年紀44～70(55.10±7.96)歲；BMI 17～26(23.05±2.64)kg/m2；對比兩組人口學及病理信息特征，差異無統計學意義(P>0.05)，本研究在倫理審核后方通知患者進行相關操作。

二、納入與排除標準

(一)納入標準 (1)參照指南[5]確診，對照組經檢查無明顯異常；(2)44～72歲；(3)SAP患者病程<72 h；(4)患者(或志愿者)和家屬知曉試驗方法和目的且簽字同意。

(二)排除標準 (1)既往存在慢性肝炎、肝硬化或其他類型慢性肝?。?2)腦、心、腎器質性受損；(3)外部能量損傷或因手術操作不當引起的SAP；(4)患有惡性腫瘤，生存時間少于3個月；(5)院外已使用生長抑素或免疫抑制劑類藥物。

三、方法

(一)血液采集 在所有患者(或志愿者)入院時即刻采集空腹靜脈血，收取5 mL血液后以2 000 r/min速度離心，ELISA檢測血清IL-10、TGFβ 水平，電化學發光免疫分析法檢測肝功能，儀器為Beckman LX-20全自動生化分析儀及配套試劑盒；IL-10 mRNA、TGFβmRNA水平在提取靜脈血轉錄物后進行反轉錄，采用PCR進行基因擴增，通過軟件分析其擴增情況并取平均值作為測量結果。

(二)肝損傷測定 肝損傷測定主要通過SAP患者ALT、AST水平測量結果進行區分，當ALT或(和)AST>40 U/L時可判定為合并肝損傷，ALT和AST均≤40 U/L時則未合并肝損傷[6]。

(三)觀察指標 (1)比較三組IL-10、TGFβ、IL-10mRNA、TGFβmRNA檢測結果；(2)比較三組AST、ALT、TBil、GGT、ALP水平；(3)通過Spearman系數分析SAP合并肝損傷患者肝功能指標AST、ALT、TBil、GGT、ALP與IL-10、IL-10 mRNA、TGFβ、TGFβ mRNA水平的相關性。

四、統計學方法

結 果

一、三組IL-10、TGFβ及其mRNA水平比較

三組IL-10、TGFβ及其mRNA水平比較呈遞減趨勢，合并組最高(P<0.05)。見表1。

表1 三組IL-10、TGFβ及其mRNA水平比較(±s)

二、三組肝功能指標比較

三組肝功能相關指標呈遞減趨勢，合并組肝功能指標水平高于SAP組、對照組(P<0.05)。見表2。

表2 三組肝功能比較(±s)

三、肝功能與IL-10、TGFβ及其mRNA的關系

SAP合并肝損傷患者IL-10、IL-10mRNA、TGFβ、TGFβ mRNA水平與AST、ALT、GGT、ALP、TBil水平呈明顯正相關(P<0.05)。見表3。

表3 肝功能與IL-10、TGFβ及其mRNA的關系

討 論

炎癥介質會在全身發生炎性反應時被大量釋放于外周血，抗炎因子在對抗炎性反應時會在一定程度上阻撓機體對病原體所造成的免疫作用，因而發生代償性抗炎癥反應綜合征[7-8]。SAP患者肝臟會在IL-10、TGFβ的引導下合成纖連蛋白及成纖維細胞調節膠原，促進組織纖維化的發生、發展[9]。

本研究結果顯示，三組IL-10、IL-10mRNA水平比較合并組>SAP組>對照組，同時合并組TGFβ、TGFβmRNA更高，提示SAP合并肝損傷患者以上指標異常表達。IL-10有抗炎和誘導免疫的作用。既往研究顯示，患者在肝臟發生損傷時IL-10mRNA表達增加從而使得單核巨噬細胞失去活動，抑制T細胞的分化及增生，免疫監視功能被削弱，同時IL-10過量分泌反而增強其負向調節功能，使機體免疫平衡受到破壞[10]。TGFβ能在促進細胞外基質生成的同時阻撓其降解，使得肝細胞的再生和損傷受到抑制[11]。患者因SAP而引起肝臟損傷時，壞死的細胞在細胞膜破裂和激活的炎癥細胞分泌細胞因子作用下引起肝臟炎性反應，重大損傷發生后肝細胞重新進入增殖模式，而TGFβmRNA參與其中并精密調控肝再生，這與于寧[12]等的研究相一致。

合并組肝功能指標水平顯著高于另2組，提示SAP合并肝損傷患者外周血中肝細胞指標均會出現明顯異常。當患者發生急性胰腺炎時，胰腺水腫繼而堵塞膽道，使得肝細胞受到損害，長時間的梗阻使得轉氨酶活性變化規律發生異常，釋放各種酶類、氧自由基等[13-14]。GGT分泌于肝細胞的胞漿毛細血管一側和整個膽管系統，肝細胞因為炎癥因子腫脹或膽汁壓迫刺激影響下而增加分泌[15]。

SAP合并肝損傷患者IL-10、IL-10mRNA、TGFβ、TGFβ mRNA水平與肝功能水平呈明顯正相關，提示SAP合并肝損傷患者者IL-10、TGFβ及其mRNA水平與肝功能指標相關?？紤]因SAP引起肝損傷，而人體免疫調控機制通過分泌IL-10、TGFβ來進行肝臟免疫調控，但仍需進一步研究證實。