食品中沙門氏菌使用不同分離培養基檢測的效果比較

高珮（天津市河西區疾病預防控制中心,天津 300211）

沙門氏菌屬于常見的腸道致病菌群，可寄生于人類和動物的腸道中，是引發食源性疾病的主要致病菌之一。有研究表明[1]，沙門氏菌引發的食物中毒事件數量位于世界食物中毒前列，沙門氏菌引發的食物中毒事件占我國食物中毒事件發生數量的70%-80%。沙門氏菌的主要傳播媒介是食品和飲用水，誤食含有沙門氏菌的食品和水源，會引發患者產生食物中毒癥狀，并發傷寒、胃腸炎、腸熱癥、敗血癥等疾病，若使用量較大，治療不及時，會危及患者生命安全[2-3]。鼠傷寒沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌、甲型副傷寒沙門氏菌是三種食物中毒發病率較高的沙門氏菌。此次研究主要為觀察食品中沙門氏菌使用不同分離培養基檢測的效果，現報告如下。

1 材料和方法

1.1 實驗菌株來源 鼠傷寒沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌、甲型副傷寒沙門氏菌三種沙門氏菌均由上海質量監督檢驗技術研究院食化所微生物實驗室提供。

1.2 培養基和試劑 沙門氏菌顯色培養基（CAS）（法國科瑪嘉公司）；木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂（XLD）、亞硫酸鉍瓊脂（BS）、酚紅煌綠瓊脂（BGA）、HE瓊脂（HE）（OXOID公司）。試劑均經有效性驗證合格。

1.3 實驗方法

1.3.1 沙門氏菌的復蘇 分別從鼠傷寒沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌、甲型副傷寒沙門氏菌菌株管中挑取小的環狀菌苔，接種到5ml營養肉湯中，置于37℃培養箱中培養20h。

1.3.2 沙門氏菌的接種 復蘇后的沙門氏菌菌株劃線，取出沙門氏菌顯色培養基（CAS）、木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂（XLD）、亞硫酸鉍瓊脂（BS）、酚紅煌綠瓊脂（BGA）、HE瓊脂（HE）五種培養基，將沙門氏菌分別接種到五種分離培養基和顯色培養板上，置于37℃培養箱中培養48h。

1.3.3 生化實驗 挑取沙門氏菌菌落，取出三糖鐵瓊脂（TSI）、尿素酶瓊脂（URE）、賴氨酸脫羧酶瓊脂（LIA）、蛋白胨水培養基（SAA）生化管，將沙門氏菌分別接種到四種生化管中，置于37℃培養箱中培養24h。

1.4 生化實驗結果判定 ①H2S：三糖鐵瓊脂（TSI）生化管變黑為“+”，不變黑為“-”；②尿素酶瓊脂（URE）：培養基變紅為“+”，變黃為“-”；③賴氨酸脫羧酶瓊脂（LIA）：生化管變紫色為“+”，變黃色為“-”；④蛋白胨水培養基（SAA）：加入靛基質，生化管內有紅環產生為“+”，無紅環產生為“-”。

1.5 統計學方法 采用SPSS22.0軟件進行數據統計分析，計數資料以率（%）表示，采用χ2檢驗，計量單位用（±s），P＜0.05顯示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 三種沙門氏菌在不同分離培養基上的生長情況及顯色情況比較 三種沙門氏菌分別在沙門氏菌顯色培養基（CAS）、木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂（XLD）、亞硫酸鉍瓊脂（BS）、酚紅煌綠瓊脂（BGA）、HE瓊脂（HE）五種不同的分離培養基上生長，經過24-48h后，觀察其生長情況發現，鼠傷寒沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌在五種分離培養基的生長菌落大致相同。其中，木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂（XLD）、亞硫酸鉍瓊脂（BS）、HE瓊脂（HE）分離培養基上的菌落中心均有黑色菌落出現，即H2S產生；沙門氏菌顯色培養基（CAS）、酚紅煌綠瓊脂（BGA）分離培養基上均無黑色菌落出現。甲型副傷寒沙門氏菌在培養24h后，菌落生長情況良好，但菌落中心沒有黑色菌落出現；培養48h后，在木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂（XLD）、HE瓊脂（HE）分離培養基上的菌落中心均有黑色菌落出現，即H2S產生；沙門氏菌顯色培養基（CAS）、亞硫酸鉍瓊脂（BS）、酚紅煌綠瓊脂（BGA）分離培養基上均無黑色菌落出現。結果表明，甲型副傷寒沙門氏菌具有延遲產生H2S的特性。同時，三種沙門氏菌在沙門氏菌顯色培養基（CAS）上的菌落均為紫紅色菌落，均無黑色菌落出現，詳見表1。

表1 三種沙門氏菌在不同分離培養基上的生長情況及顯色情況對比

2.2 三種沙門氏菌的生化試驗結果比較 三種沙門氏菌分別在三糖鐵瓊脂（TSI）、尿素酶瓊脂（URE）、賴氨酸脫羧酶瓊脂（LIA）、蛋白胨水培養基（SAA）四種不同的生化管中生長，經過24-48h后，觀察其生長情況發現，甲型副傷寒沙門氏菌具有延遲產生H2S的現象，詳見表2。

表2 三種沙門氏菌的生化試驗結果對比

3 討論

沙門氏菌屬于常見的腸道致病菌群，是引發食源性疾病的主要致病菌之一。沙門氏菌感染患者產生食物中毒癥狀，并發傷寒、胃腸炎、腸熱癥、敗血癥等疾病，嚴重者會危及患者生命安全。沙門氏菌屬于人畜共患疾病，尤其是生鮮食品中容易檢測到沙門氏菌[4-6]；雖然經過熱加工后的熟制食品含量較低，但在包裝、運輸過程中，很有可能受到沙門氏菌的污染[7-8]。因此，提高沙門氏菌檢測的精確度，是保障食品安全的關鍵。

本次實驗結果表明：鼠傷寒沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌在XLD、BS、HE分離培養基上的菌落中心均有黑色菌落出現，即H2S產生；CAS、BGA分離培養基上均無黑色菌落出現。甲型副傷寒沙門氏菌在培養24h后，菌落生長情況良好，但菌落中心沒有黑色菌落出現；培養48h后，在XLD、HE分離培養基上的菌落中心均有黑色菌落出現，即H2S產生；CAS、BS、BGA分離培養基上均無黑色菌落出現。結果表明，甲型副傷寒沙門氏菌具有延遲產生H2S的特性。同時，三種沙門氏菌在CAS上的菌落均為紫紅色菌落，均無黑色菌落出現。三種沙門氏菌分別在TSI、URE、LIA、SAA四種不同的生化管中生長，經過24-48h后，觀察其生長情況發現，甲型副傷寒沙門氏菌具有延遲產生H2S的現象。證明了沙門氏菌顯色培養基（CAS）能夠有效檢測出食品中的沙門氏菌，避免了單純檢測H2S產生的誤差。分析其原因為：產生H2S是沙門氏菌的典型特性，但甲型副傷寒沙門氏菌具有延遲產生H2S的現象，因此，并不能以檢測H2S作為檢測沙門氏菌的唯一手段。沙門氏菌顯色培養基（CAS）能夠有效檢測出甲型副傷寒沙門氏菌，大大提高了檢測準確率，降低了假陰性的發生。

綜上所述，沙門氏菌顯色培養基（CAS）對食品中沙門氏菌的分離檢測效果最好，可以有效提高檢測精度和檢測效率，值得推廣應用。