佛山地區輸血患者紅細胞血型不規則抗體分布特點及分析

吳敏華，蔡 葵，朱琳睿，黎裕元

佛山市第一人民醫院輸血科，廣東 佛山 528000

輸血前檢測是保證臨床用血安全的重要手段，隨著輸血技術的不斷完善和發展，輸血前ABO血型鑒定已避免了極大一部分的輸血不良反應的發生，現隨著不規則抗體篩查的普及，使由于不規則抗體引起的臨床輸血不良反應逐漸得到重視［1］。血型不規則抗體是指ABO血型系統以外的其他血型系統抗體，如Rh、MNS、Lewis等血型系統的抗體，是引起免疫性溶血性輸血反應、新生兒溶血病、血型鑒定以及交叉配血困難的主要因素之一［2］，把不規則抗體篩查作為擬輸血患者輸血前檢測的常規項目，進一步保障臨床用血安全。由于抗體分布有地域差異，收治不同患者不同醫院存在差異［3-4］，特別是綜合性醫院和專科。佛山市第一人民醫院屬于南方綜合性三甲醫院，人群分布會導致抗體分布有所不同，故現對本地區人群不規則抗體的分布特征和頻率進行調查分析，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

從臨床輸血安全與血液管理軟件（廣州創惠信息科技有限公司，2.0版）選擇2020年1月—11月佛山市第一人民醫院擬進行輸血患者的不規則抗體檢查結果共10 423例，陽性結果共112例。（1）陽性納入標準：①不同方法學復查確定陽性標本者；②譜細胞鑒定陽性標本者。（2）排除標準：①復查后陰性標本者；②譜細胞無法鑒定標本者；③使用抗CD38等用藥干擾實驗結果標本者。（3）符合納入/排除標準112名患者入組研究對象，年齡1天～78歲，其中男性40名、女性72名，見表1。

表1 紅細胞不規則抗體陽性結果比較 例

1.2 設備與儀器

不規則抗體檢測紅細胞試劑盒[奧森多醫療器械貿易（中國）有限公司、上海血液生物醫藥有限責任公司]；抗人球蛋白試劑卡[奧森多醫療器械貿易（中國）有限公司、達亞美有限責任公司]、AUTOVUE innova全自動血型配血分析儀[奧森多醫療器械貿易（中國）有限公司]；抗體鑒定譜細胞（Reagens公司）；孵育器；離心機。以上所有試劑均在有效期內使用。

1.3 實驗方法

（1）收集患者靜脈血2～5 ml于EDTA-K2抗凝管中，離心后利用全自動血型分析儀進行不規則抗體篩查，具體操作按照科室SOP文件進行，質控在控。結果由系統自動判讀，以任何一系或多系細胞出現凝集在凝膠上層或中間為抗體陽性。（2）對抗體篩查初步陽性患者標本進行復檢：采用不同試劑、不同試劑卡、試管法進行復查，復查結果仍為陽性的標本進一步用抗體鑒定譜細胞進行抗體特異性鑒定。（3）血型不規則抗體特異性鑒定：采用譜細胞使用微住凝膠法進行進一步鑒定，同時加做自身對照試驗，根據反應格局明確抗體性質。當受檢血漿與所有譜細胞以及自身細胞的凝集強度一致時判斷為非特異性自身抗體；對存在同種抗體的患者血清分別采用鹽水法、不同標準紅細胞的微住凝膠法檢測后對照標準細胞譜采用陰性排除法判斷抗體類型。

1.4 統計學方法

使用IBM SPSSStatistics V22.0.0軟件對數據做統計學分析，計數資料以例數和百分比（%）表示，采用χ2檢驗，納入標準和剔除標準分別為0.05和0.10；以P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 紅細胞血型不規則抗體分布特點

10 423例檢測不規則抗體的患者中共鑒定出特異性抗體112例，總體檢出率1.07%，男性患者不規則抗體檢出率為0.73%，女性患者不規則抗體檢出率為1.47%，男性顯著低于女性（P＜0.001）；此外有輸血史患者陽性檢出率為1.47%，明顯高于無輸血史患者的0.85%（P＜0.005）；72例不規則抗體陽性女性患者中有61例有妊娠史，其陽性率明顯高于無妊娠史患者（P＜0.001），見表1。

2.2 112例不規則抗體陽性患者鑒定

112例不規則抗體陽性患者鑒定出107例，占87.70%（107/112），主要為Rh血型系統60例，占56.07%，其中以抗-E抗體檢出率最高，占35.51%；其次為MNS血型系統26例，占24.30%，其中以抗-M檢出率最高，占19.63%；P血型抗體檢出2例、Lewis 9例、Kidd血型5例、Duffy血型1例、Diego血型1例，混合抗體3例，見表2。

表2 紅細胞血型特異性抗體分布

3 討論

本研究對10 423例預輸血患者進行了抗體篩查試驗，共檢出不規則抗體陽性112例，陽性檢出率為1.07%，我國擬輸血患者中不規則抗體陽性檢出率不同地區不同種族之間存在較大區別，大概在0.3%～2.0%之間，與研究的實驗結果接近［5-7］。不規則抗體是免疫血液學中被廣泛熟知的紅細胞抗體，目前已發現其能與ABO以外的32種血液系統的紅細胞抗原發生反應，可能導致機體出現紅細胞輸注無效、新生兒溶血病、免疫性溶血性輸血反應、自身免疫性溶血反應等輸血不良反應，極大地危害患者生命安全［8］。因此，輸血前進行紅細胞血型不規則抗體的檢查對于確保輸血安全十分重要。

本研究檢出的112例不規則抗體陽性患者中，男性患者的陽性率為0.73%，明顯低于女性患者的陽性率1.47%；有輸血史患者陽性率為1.47%，明顯高于無輸血史患者的陽性率0.85%；有妊娠史患者陽性率4.97%，明顯高于無妊娠史患者的0.30%；輸血和妊娠兩者差異均具有統計學意義。輸血和妊娠是導致患者產生不規則抗體的主要原因［9-10］，而女性同時存在輸血和妊娠雙重免疫機會，這使女性獲得不規則抗體幾率比男性更大，這與本次研究的結果相符合。這也提示我們輸血醫務工作人員要嚴格遵循《臨床輸血技術規范》的規定，對有輸血史、妊娠史或短期內需要輸血者必須做抗體篩查試驗和抗體鑒定試驗，對抗體陽性者要選擇適當的方法對不規則抗體進行鑒定。有報道顯示，每輸注1 U血液制品產生不規則抗體的概率為1.0%～1.6%，多次輸血則紅細胞致敏風險高達15%～20%［11］，說明多次輸血患者做抗體篩查試驗意義十分重大。此外這也提示有輸血史或妊娠史的孕婦及其丈夫進行產前抗體篩查試驗，以減少新生兒溶血病的發生率。

112例不規則抗體陽性患者中共鑒定出了107例不規則抗體，檢出率87.70%。分布結果表示，Rh血型系統占大部分，其次是MNS血型系統和P血型系統。這提示Rh血型系統可能是造成遲發性溶血反應的重要原因之一，大多數Rh血型抗體為免疫性IgG抗體，此類抗體可結合輸入患者體內的或表面具有此相應抗原的紅細胞，進而破壞紅細胞縮短紅細胞的壽命，引起溶血性輸血不良反應。如果母嬰Rh血型不合，母親體內可能會產生相應不規則抗體進入胎兒血液循環，導致嚴重的新生兒溶血病［12］。本次研究中Rh血型系統中又以抗-E抗體分布為主，這可能的原因如下：E抗原在我國漢族人群中分布頻率為47%［5］，研究表明，抗原陽性與陰性百分率越接近，產生的抗體機會也越多。并且由于臨床輸血中，對患者E抗原的檢測普及程度較低，故E抗原陰性的患者基本上是隨機輸血，患者通過輸血獲得E抗原刺激產生抗-E抗體的概率明顯增加［13-14］。對比之下，抗-D抗體雖是Rh血型系統中免疫原性最強的抗原，且我國漢族人群D抗原分布頻率高達99.6%，但本次研究產生的抗-D抗體僅2例，這與目前國內普遍開展了D抗原檢測有關，對RhD陰性的患者確保盡量輸注RhD陰性血制品。此外，本研究發現抗-M抗體與抗-Lea抗體也是臨床相對較常見的抗體，多為IgM類抗體。由于抗-M抗體容易造成新生兒溶血病，對于抗-M為陽性的孕婦或者兒童，輸血時應特別注意預防溶血反應的發生，有條件的可采取輸注相應抗原陰性的紅細胞。

本研究檢出Kidd血型系統抗體共4例，其中抗-Jka抗體3例，抗-Jkb抗體1例，抗體產生率為0.047%，構成比為4.67%，比例高于其他同類型的研究［15］，可能與Kidd血型系統的抗體產生快，消失快，沒有免疫刺激，抗體強度迅速下降至檢測閾值以下的特點，以及本研究單位屬于三甲醫院，重癥患者，反復輸血患者較多，因此抗體檢出相對較容易等原因有關。Kidd血型系統抗體不容易檢出，卻容易導致嚴重的遲發性溶血性輸血反應，因此對于一旦產生這類型抗體的患者，后期無論抗體是否減弱至無法檢出，都要盡量選擇抗原陰性的紅細胞為其進行交叉配血，避免因為免疫回憶反應，導致溶血［16］。

在本研究中，還發現一例罕見的抗-Fya抗體。由于國內Fya抗原屬于高頻抗原，在我國抗原頻率達到99.85%［17］，在佛山地區的獻血員中，找到Fya抗原陰性的個體極其困難。因此本院通過在患者家系中尋找，以及求助稀有血型庫等方法，為該患者選擇合適的獻血者。這要求我們在應對高頻抗原抗體時，要有更廣闊的思路。各地區的輸血醫學醫務工作者也應通力合作，盡快建立針對不同抗原的稀有血型庫。

由于本單位在抗體鑒定譜細胞（Reagens公司）、抗體篩查細胞（美國強生公司奧森多公司、上海血液生物醫藥責任有限公司）所有批次的細胞中，均沒有標注是否包含Mur抗原。而Mur抗原在我國南方地區抗原頻率相當高，廣州地區無償獻血者中Mur抗原陽性的頻率為6.59%，番禺地區為7.16%，香港地區為6.28%，臺灣地區平均頻率高達7.3%。香港地區的研究更顯示，抗-Mur在患者和孕婦中出現的頻率分別為0.34%和0.46%，是該地區最常見的同種不規則抗體［18-19］。因此不排除本研究有漏檢抗-Mur抗體的可能性，這為本次研究的局限性。在后續研究中，應針對本地區抗原分布的特點，在抗體篩查細胞中，增加具有Mur表型的紅細胞，使本研究中抗體分布的數據，更加真實客觀，也更能保障患者輸血的安全。

綜上所述，臨床對于擬輸血的患者進行紅細胞不規則抗體的篩查和鑒定具有重要臨床意義，選擇輸注對應抗原陰性的血液制品能夠有效減少輸血反應的發生，提高臨床輸血安全性和有效性。對此輸血科于2020年開始對擬輸血患者普及了Rh血型鑒定，給與輸血患者輸注相應抗原陰性的血液制品，減少輸血不良反應的發生，保證醫療安全、保障患者利益。同時應加強不規則抗體記錄管理，一旦患者檢出不規則抗體陽性，應提前備血，避免患者需急用輸血時無法提供合適血制品；并及時記錄避免隨時間推移患者體內抗體滴度減弱至無法檢測而導致記憶性免疫反應。本研究的局限性在于只是針對一家醫院一段時間的紅細胞不規則抗體篩查病例所作的回顧性分析，是否能代表該地區的紅細胞不規則抗體的現狀，尚需更大范圍、更長時間以及更多的病例數，對紅細胞不規則抗體陽性患者進行抗體鑒定并輸注對應抗體陰性血液具有重要臨床意義。