溫度對刀額新對蝦繁育的影響研

陳相峰，胡利華，羅 奎，張 敏，冀德偉

(浙江省海洋水產養殖研究所，浙江省近岸水域生物資源開發與保護重點實驗室，浙江 溫州 325005)

刀額新對蝦亦稱基圍蝦、泥蝦，隸屬于節肢動物門、甲殼綱、十足目、對蝦科、新對蝦屬，主要分布在中國東南沿海，是新對蝦屬中個體較大的品種。近年來的大量海底拖網捕撈作業對刀額新對蝦的種質資源造成了一定的破壞，刀額新對蝦的資源量大幅降低。因此，有必要對刀額新對蝦進行種質保護。

溫度是影響甲殼動物生長與繁殖的重要因素。趙玉超等(2019)研究顯示，溫度對凡納濱對蝦受精卵的孵化率有顯著的影響，隨溫度的上升，平均孵化率呈階梯式上升；而超出孵化適宜溫度，會導致胚胎發育異常甚至死亡(張彬等，2014)。本文以海區捕撈的自然成熟、性腺飽滿的刀額新對蝦雌蝦所產的受精卵為實驗材料，研究不同溫度下刀額新對蝦胚胎及幼體發育情況，為刀額新對蝦的人工繁育提供參考，以減少刀額新對蝦的海捕需求，對刀額新對蝦的種質資源進行保護。

一、材料與方法

1.實驗材料

親本取用從廣東饒平外海區捕撈的自然成熟、卵巢發育至4期左右的刀額新對蝦雌蝦，平均規格(15.0±1.0)克/尾，通過親蝦袋活水充氧運輸到浙江省海洋水產養殖研究所清江基地暫養。

卵巢發育期根據性腺發育進行分期：l期(01)的GSI 值為0.43±O.02，此時卵巢呈透明細線狀；2 期(02)的GSI 值為0.89±0.02，卵巢呈白濁色細帶狀；3 期(03)的GSI 值為2.45±0.33，卵巢體積繼續增大，呈白色；4 期(04)的GSI 值為6.30±0.31，卵巢體積明顯增大，呈淡黃色；5期(05)的GSI值為8.95±1.75，卵巢體積達到最大，呈灰綠色(賈錫偉等，2011)。

親蝦暫養：將親蝦放入水泥池中，養殖密度為8 尾/米2。池水為鹽度23 的自然海水經過沉淀、沙濾后用濃縮機濃縮調整到所需鹽度28，再用雙層濾水棉袋過濾入池，然后用消毒劑消毒，曝氣36 小時后潑灑10 毫克/升EDTA 溶液，絡合水中重金屬離子，溫度為(30±0.5)℃。

受精卵的獲得：從親蝦池中挑選性腺發育至5 期的雌蝦，將其放入200 升聚乙烯桶內，微充氣，產卵后移走雌蝦。

幼體的獲得及培育：對在聚乙烯桶內的受精卵繼續培養，到無節幼體期后進行燈誘收集，用水體比例法定量放入其他200升聚乙烯桶內，充氣養殖。所有養殖桶的養殖條件除溫度外均相同，從Z1(溞蝦1 期)開始喂食金藻，從M1(糠蝦1 期)開始喂食配合飼料，從M2開始用輪蟲(蛋羹)和配合飼料輪換喂食，日換水1/4，餌料量均為適當過量。

用水體比例法進行計數：將收集的受精卵放入裝有5升水體的水桶中，用500毫升的玻璃燒杯取樣，每個桶取兩次計數，再取平均值。

2.實驗設計

(1)不同溫度下受精卵孵化實驗。設置4 個溫度梯度(24、27、30、33℃)，同時設置3 個平行，共12 個實驗組。整個實驗都在控溫系統中進行，溫度誤差在±0.5℃，鹽度均為28。對移走產卵后雌蝦的養殖桶，每過1 小時用攪卵棒輕輕攪拌1 次，防止受精卵沉底和結塊。從第6 小時開始觀察受精卵孵化情況，每0.5小時計數1次，每次取50粒受精卵，記錄各個實驗組的孵化時間。

(2)不同水溫下幼體發育實驗。設置4 個溫度梯度(24、27、30、33℃)，同時設置3個平行，共12 個實驗組。整個實驗都在控溫系統中進行，溫度誤差在±0.5℃，鹽度均為28。每個實驗組放5 000 尾無節幼體于200 升聚乙烯桶內，充氣培育。從糠蝦期開始觀察記錄幼體的發育情況。

用水體比例法進行計數：用500毫升的玻璃燒杯從水體充氣“鼓沸”處取樣，每個桶取兩次計數，取平均值。

3.數據處理與統計分析

(1)數據處理。初孵時間(h0)為受精卵從胚胎發育開始到無節幼體(N)破膜而出所需最短時間。幼體集中孵化時間(h)為受精卵孵化60%～90%的平均用時。幼體生長時間為從N開始到60%～90%的幼體達仔蝦(P)的時間。

幼體孵化率(%)＝N/總卵數×100

幼體存活率(%)＝P/N×100

(2)統計分析。實驗結果數據均采用“平均值±標準差”表示，借助SPSS 17.0軟件進行數據處理，利用單因子方差分析(one-way ANOVA)比較不同處理間的差異，利用LSD 法進行多重比較，P＜0.05為差異顯著。

二、結果

1.溫度對胚胎發育的影響

實驗結果表明，在實驗溫度范圍內溫度影響平均孵化率，不同溫度下平均孵化率呈峰值變化。24～33℃條件下，隨溫度的上升，平均孵化率先上升、后下降；30℃時平均孵化率明顯高于24℃(P＜0.05)；27、33℃時平均孵化率雖然比24℃高，但差別不明顯(P＞0.05)。刀額新對蝦平均孵化率隨溫度的升高而升高，在超出一定溫度后下降，在30℃時平均孵化率最高，為91.7%。刀額新對蝦受精卵的孵化時間，24℃和27℃時明顯長于30、33℃(P＜0.05)；30℃與33℃時的孵化時間相當，無顯著差異(P＞0.05)。在實驗范圍內，隨溫度的升高所需孵化時間縮短，孵化率先升高、后降低。

2.溫度對刀額新對蝦幼體發育的影響

實驗結果表明，24℃時與27、30、33℃時刀額新對蝦幼體發育時間相比顯著延長(P＜0.05)，存活率明顯降低(P＜0.05)。由此看出，24℃及以下溫度對刀額新對蝦幼體的發育有較大的影響，不適合幼體培育；27、30、33℃時刀額新對蝦幼體發育時間差別不明顯(P＞0.05)；幼體存活率在33℃時明顯低于27℃和30℃(P＜0.05)而高于24℃(P＜0.05)，雖然30℃時的存活率高于27℃，但差別不明顯(P＞0.05)。這表明實驗中刀額新對蝦幼體適宜的培育溫度為27～30℃，而最適溫度應為30℃，刀額新對蝦的平均存活率為81.0%，幼體平均發育時間為7.7天。

三、討論

1.刀額新對蝦胚胎的發育

溫度是影響刀額新對蝦胚胎和幼體發育的重要因素。刀額新對蝦受精卵在不同溫度下，所需的孵化時間不同，孵化率也不同。30℃時刀額新對蝦受精卵的孵化率明顯高于24℃時(P＜0.05)，而24℃時的孵化率雖然低于27、33℃，但卻沒有顯著性差異(P＞0.05)，這說明在30℃左右，刀額新對蝦受精卵的孵化率達到了最高。溫度影響孵化率，在一定范圍內升高溫度可以提高孵化率，這與薛素燕等(2012)的研究結果相似。但溫度過高，則會導致胚胎發育異常，孵化率降低(林偉雄等，1991)。

刀額新對蝦受精卵的孵化時間在24℃和27℃時與30、33℃有顯著性差異(P＜0.05)，前兩者孵化時間顯著長于后兩者；30℃和33℃之間孵化時間相當，無顯著性差異(P＞0.05)。這說明在一定溫度范圍內，升高溫度會縮短胚胎發育時間。實驗結果表明適當提高孵化溫度，有利于受精卵的孵化。刀額新對蝦受精卵的初孵時間最短在30～33℃，結合溫度對刀額新對蝦孵化率和孵化時間的影響，可得出理想的孵化水溫是30℃左右，這應該與相關胚胎發育酶的活力有關，適宜的溫度有助于提高相關胚胎發育酶的活力，而過高或者較低的溫度則會降低相關胚胎發育酶活力(楊世平等，2014)，導致孵化率降低，孵化時間變長。在本次實驗中，溫度為30℃時，刀額新對蝦受精卵的孵化率最高，孵化時間最短，而在33℃和27℃時，受精卵孵化率降低，孵化時間變長，所以最適孵化溫度在30℃左右。

2.刀額新對蝦幼體的發育

不同溫度下刀額新對蝦幼體的發育情況不同，在24℃的條件下平均存活率為44.3%，平均生長時間10.2 天，其存活率明顯低于27、30、33℃時(P＜0.05)，生長時間顯著長于27、30、33℃時(P＜0.05)。升高溫度會減少幼體發育時間，但過高的溫度也會導致幼體存活率下降。33℃時刀額新對蝦幼體存活率62.0%，明顯低于27℃時的75.3%和30℃時的81.0%(P＜0.05)，這可能是溫度超過一定范圍時，對蝦消化酶活力降低，攝食能力減弱，從而影響了幼體的健康和抗病力，導致其存活率下降。從實驗結果可以看出，溫度過低或過高都不適合幼體的培育，27～30℃是刀額新對蝦幼體發育的適宜溫度范圍。結合實驗結果中刀額新對蝦幼體的生長時間和存活率，在溫度為30℃時，刀額新對蝦幼體的存活率為81.0%，生長時間為7.7 天，優于24、27、33℃時，可得出30℃左右是刀額新對蝦幼體發育的最適宜溫度。