支氣管鏡刷檢標本液基細胞學聯合細胞塊技術對肺癌診斷及分型的價值分析

聶 進，周 亮，蘭遠波，張建勇

遵義醫科大學附屬醫院呼吸與危重癥醫學科呼吸二病區，貴州遵義 563000

肺癌是發病率、病死率均較高的惡性腫瘤之一。臨床發現肺癌早期患者多無癥狀或典型癥狀不明顯，確診時大多已發展至中、晚期，臨床治療相對較困難。因此，肺癌的早期診斷顯得尤為重要。支氣管鏡下刷取脫落細胞檢查是臨床診斷肺癌的重要手段之一，主要包括傳統細胞學涂片和液基細胞學檢查[1]。其中液基細胞學檢查能清晰顯示三維立體結構，且染色質量高，已逐漸取代傳統細胞學涂片，在肺癌診斷中具有重要意義[2]。但由于部分患者細胞分化差，僅通過液基細胞學形態可能不能進行準確的病理分型，尚需聯合其他方法輔助診斷[3]。而細胞塊技術簡便，離心后石蠟包埋制成的切片，可清晰展現細胞內部的細微結構，診斷準確性較高，且有利于病理分型[4]。但單獨應用支氣管鏡下刷檢標本液基細胞學、細胞塊技術診斷肺癌可能造成漏診或誤診[5]。因此，本研究聯合使用支氣管鏡刷檢標本液基細胞學和細胞塊技術進行肺癌診斷及分型，為肺癌的早期診療提供依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年6月至2019年11月本院收治的可疑肺癌患者185例作為研究對象，其中男133例，女52例；年齡35～76歲，中位年齡62歲。納入標準：(1)均經胸部CT等影像學檢查為可疑肺癌；(2)均接受組織病理學檢查；(3)加入本研究前均未行放、化療。排除標準：(1)臨床資料缺失患者；(2)合并其他惡性腫瘤；(3)拒絕支氣管鏡檢查者；(4)有支氣管鏡檢查禁忌證；(5)留取標本過少無法檢測。本研究經本院醫學倫理委員會批準，且患者及其家屬均知情同意，并簽署同意書。

1.2方法

1.2.1支氣管鏡下液基細胞學檢查 所有患者可疑病變部位均在支氣管鏡下刷取標本，并及時洗入液基保存液中，室溫靜置10 min，經全自動液基薄層細胞制片儀(ThinPrep 5000 Processor)進行制片，每例患者3張。制成的液基薄片應以95%乙醇固定15 min，再行巴氏染色。液基保存液及巴氏染色液均購自麥克奧迪醫療診斷系統有限公司。

1.2.2細胞塊技術 將液基保存液中剩余的標本倒入離心管中，2 500 r/min離心10 min，離心后棄上清液。加入10%中性甲醛固定液，2 500 r/min再次離心5 min，固定至少3 h。待試管底部沉渣質地變硬，用小棉棒將沉淀物取出，并小心置于包埋盒中，經脫水、石蠟包埋制成細胞塊切片，厚約4 μm，采用蘇木精-伊紅(HE)染色。HE染色液購自金華力升實驗器材有限公司。

1.3統計學處理 運用統計學軟件SPSS 20.0處理數據。計數資料采用例數或百分率進行描述，組間數據比較行χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1液基細胞學及細胞塊技術對肺癌的診斷價值 185例可疑肺癌患者經組織病理學診斷為肺癌157例，良性病變28例。液基細胞學聯合細胞塊技術診斷肺癌的靈敏度、特異度及準確率均明顯高于液基細胞學、細胞塊技術單項檢測(P<0.05)。見表1、2。

表1 液基細胞學及細胞塊技術對肺癌的檢測結果(n)

表2 液基細胞學及細胞塊技術對肺癌的診斷價值(%)

2.2液基細胞學形態和細胞塊切片分析 液基細胞學形態特征：鱗癌細胞多散在分布，細胞核大、深染，胞質角化；腺癌細胞成群排列，細胞核大、深染，可見腺腔樣結構，且立體感突出；小細胞癌細胞擁擠成群，呈鑲嵌狀或桑葚狀結構，核深染、染色質細膩，近似裸核。見圖1。

細胞塊切片形態特征：鱗癌細胞呈多角形或卵圓形；腺癌細胞形狀不一，大小不等，多呈乳頭狀或腺樣結構；小細胞癌細胞片狀分布，細胞間易受擠壓，細胞質少，呈卵圓形、圓形或燕麥型。見圖2。

注： A為鱗癌細胞(巴氏染色，×400)；B為腺癌細胞(巴氏染色，×400)；C為小細胞癌細胞(巴氏染色，×400)。

注：A為鱗癌細胞(HE染色，×400)；B為腺癌細胞(HE染色，×400)；C為小細胞癌細胞(HE染色，×400)。

2.3液基細胞學及細胞塊技術對肺癌分型的診斷價值 組織病理學診斷腺癌70例、鱗癌56例、小細胞癌31例。以組織病理學診斷為金標準，液基細胞學聯合細胞塊技術診斷腺癌的準確率為97.45%，明顯高于兩者單獨檢測(χ2=39.348、31.774，P<0.001)；診斷鱗癌的準確率為91.72%，明顯高于兩者單獨檢測(χ2=26.046、8.564，P<0.001)；診斷小細胞癌的準確率為90.45%，明顯高于兩者單獨檢測(χ2=14.692、11.155，P<0.001)。見表3、4。

表3 液基細胞學及細胞塊技術對肺癌分型的檢測結果(n)

續表3 液基細胞學及細胞塊技術對肺癌分型的檢測結果(n)

表4 液基細胞學及細胞塊技術對肺癌分型的診斷價值(%)

3 討 論

近年來，隨著臨床腫瘤診療技術的快速發展，肺癌的治療越來越規范化和精細化，因此肺癌確診后明確病理分型至關重要。有研究報道，因在支氣管鏡檢查黏膜容易出血或見不到腫物等原因而無法刮取活檢組織的患者，支氣管鏡下刷檢細胞學檢查可取代活檢用于診斷肺癌，且與其他檢查方法聯合，對判斷肺癌的病理分型具有很大幫助[6-7]。

支氣管鏡下液基細胞學制片技術是廣泛應用于細胞學診斷的一項新技術，臨床應用具有如下優勢：(1)可直接窺見病灶，取的材料大多可制片觀察；(2)細胞形態保存完好，細胞分布均勻且背景干凈，細胞結構清晰、立體，能夠有效剔除異常細胞；(3)制片過程中可除去過多的血液和黏液，使涂片細胞單層平鋪，避免細胞重疊，便于觀察細胞形態；(4)涂片范圍小，可明顯縮短細胞學醫師閱片時間；(5)剩余標本可繼續保存，用于免疫組化等其他生化檢查[8-11]。林靜等[12]在肺腫瘤診斷研究中發現，纖支鏡下液基細胞學檢測在肺腫瘤中的診斷價值高于傳統涂片檢測。而王學敏等[13]研究發現，纖支鏡下刷檢標本液基細胞學檢查在肺癌診斷及其病理分型中的特異度相對較高，具有一定臨床應用價值。趙琳琳等[14]研究報道，細胞形態學檢查可用于肺癌病理分型診斷，包括鱗癌、腺癌和小細胞癌，但分型診斷符合率低于細胞形態學聯合免疫細胞化學診斷。本研究中，支氣管鏡刷檢標本液基細胞學診斷肺癌的準確率為82.16%，診斷肺癌分型腺癌、鱗癌、小細胞癌的準確率分別為71.97%、68.79%、73.89%，靈敏度、特異度均不高。考慮原因可能是腺癌、鱗癌、小細胞肺癌部分細胞均出現細胞核型不規則、排列平鋪等現象，在細胞形態學上難以區分。因此，臨床應用支氣管鏡下刷檢液基細胞學判斷肺癌分型時應聯合其他檢測技術。

近年來，細胞塊技術診斷肺癌及其分型的符合率明顯提高，已得到廣泛認可，更重要的是可進一步使用細胞塊切片進行免疫細胞化學染色，在肺癌診斷及評估中具有重要意義[15]。細胞蠟塊切片經HE染色后，核質結構更加清晰，可有效識別異型細胞[16]。陳一峰等[17]研究發現，胸腔積液細胞蠟塊可有助于明確診斷腫瘤的類型，且在肺癌EGFR基因突變檢測中發揮重要作用。趙業等[18]研究報道，細胞塊切片診斷惡性腫瘤的符合率明顯高于常規細胞學涂片，且可用于診斷腫瘤的具體類型。本研究結果發現，細胞塊技術診斷肺癌的準確率為85.95%，診斷肺癌分型腺癌、鱗癌、小細胞癌的準確率分別為75.80%、80.25%、76.43%，在肺癌及其分型中具有一定診斷價值，但診斷靈敏度較低，臨床應用易導致漏診。因此，本研究將液基細胞學和細胞塊技術聯合用于診斷肺癌及其分型，結果發現診斷肺癌的準確率高達97.30%，診斷腺癌、鱗癌、小細胞癌的準確率分別為97.45%、91.72%、90.45%，兩者聯合診斷肺癌及其分型腺癌、鱗癌、小細胞癌的準確率均明顯高于兩者單獨診斷，臨床應用價值可能更高。

綜上所述，支氣管鏡下刷檢標本液基細胞學聯合細胞塊技術能明顯提高肺癌的診斷準確率，且有較高的分型準確率，可能為肺癌及其分型提供更加客觀的診斷結果。但本研究樣本量相對較少，且未在細胞塊技術基礎上加做免疫組織化學檢測，下一步應擴大樣本量進行更深入的研究。