血清AMH、FSH、InhB與精子參數的相關性分析

劉秀菊， 李高馳， 陽紅梅， 林建春

（深圳市龍崗區婦幼保健院，廣東 深圳 518100）

精子的發育是一個激素依賴性的精密過程。抗米勒管激素（anti-Müllerian hormone，AMH）、抑制素B（inhibin B，InhB）和卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone，FSH）參與了精子的生成和發育，在男性生育方面發揮著重要作用[1-2]。本研究擬探討男性血清AMH、FSH、InhB與精子參數的相關性，并對比血清AMH、FSH、InhB在梗阻性和非梗阻性無精子癥中的差異，為臨床決策提供參考。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2014年1月—2017年12月深圳市龍崗區婦幼保健院生殖健康科男性患者97例，參考文獻[3]，根據精子參數和睪丸活檢結果，分為梗阻性無精子癥組[15例，年齡（30.2±5.1）歲）]、非梗阻性無精子癥組[12例，年齡（31.2±6.7）歲]、少弱精子癥組[70例，年齡（29.3±6.2）歲]。以122名精液質量合格、正常生育后代的男性為對照組，年齡（32.1±7.3）歲。各組年齡差異無統計學意義（P>0.05）。

1.2 方法

1.2.1 精子參數分析 收集所有研究對象禁欲2～7 d后手淫獲得的精液，置于無菌干燥取精杯中，1 h內送檢，37 ℃溫育至液化后進行檢測。采用稱重法檢測精液量。采用CASAS-QH-Ⅲ精子動（靜）態圖像檢測系統（北京華方神火科技有限公司）進行精子參數（精子總數、精子濃度、精子活力、前向運動精子百分率）分析。無精子癥患者標本以3 000×g離心10 min，在沉渣中尋找精子，若3次檢測均未找到精子，則為“無精子”。

1.2.2 血清AMH、FSH、InhB檢測 采集所有研究對象清晨空腹靜脈血3 mL，使用ARCHITECT i2000化學發光免疫分析儀（美國雅培公司）及配套試劑、質控品檢測FSH。采用雙抗體酶聯免疫吸附試驗檢測InhB、AMH，InhB檢測試劑和質控品購自美國DSL公司，AMH檢測試劑和質控品購自深圳亞輝龍公司。

1.3 統計學方法

采用SPSS 19.0軟件進行統計分析。正態分布的計量數據以±s表示，組間比較采用單因素方差分析。各項指標之間的相關性采用Pearson相關分析。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組血清AMH、FSH、InhB比較

與對照組和梗阻性無精子癥組比較，非梗阻性無精子癥組、少弱精子癥組血清AMH、FSH水平顯著降低（P<0.05），血清InhB水平顯著升高（P<0.05）。對照組與梗阻性無精子癥組之間各項指標差異均無統計學意義（P>0.05）。見表1。

表1 各組血清AMH、FSH、InhB水平比較 ±s

表1 各組血清AMH、FSH、InhB水平比較 ±s

注：與對照組和梗阻性無精子癥組比較，*P<0.05。

images/BZ_61_261_1604_2215_1661.png梗阻性無精子癥組 15 8.91±3.75 4.21±2.15 135.65±41.25非梗阻性無精子癥組 12 6.23±2.95* 5.94±2.55* 86.54±27.65*少弱精子癥組 70 7.45±3.14* 5.26±2.98* 95.39±31.45*對照組 122 9.13±3.15 4.15±2.37 157.76±57.23

2.2 AMH、FSH、InhB與精子參數的相關性

AMH與精子總數、精子濃度、精子活力和前向運動精子百分率均呈正相關（P<0.05）；InhB、FSH與精子總數、精子濃度呈正相關（P<0.05），與精子活力、前向運行精子率無相關性（P>0.05）。見表2。

表2 AMH、FSH、InhB與精子參數的相關性分析

3 討論

精子發育主要受下丘腦-垂體-性腺軸精密調控，也受睪丸內微環境影響，FSH、AMH、InhB是重要的影響因素[4]。FSH是垂體分泌的糖蛋白激素，與睪丸生精小管支持細胞上的FSH受體結合，啟動G蛋白耦聯機制，通過磷酸蛋白酶A、B、C等信號轉導途徑發揮作用[5]。AMH、InhB在成年男性體內均由睪丸支持細胞分泌。AMH結合AMH Ⅱ型受體后，可激活SMAD 1，SMAD 5和SMAD 8信號通路，發揮作用。InhB由睪丸支持細胞直接分泌，不受促性腺激素釋放激素、雌激素、雄激素等影響，可更直接地反映睪丸內精子發生情況[6-7]。在睪丸中，FSH能提高支持細胞雄激素結合蛋白水平，同時分泌抑制素。InhB可選擇性地抑制垂體分泌FSH。AMH受雄激素負向調節和FSH正向調節[8]。

成年男性AMH經多因素調控后，可恒定維持在一個較低水平。AMH和男性生精能力的關系及其在男性生殖相關疾病中的差異是目前研究的熱點，也是一個頗有爭議的課題。彭龍平等[8]發現血清AMH與精子發生有關，能作為睪丸支持細胞功能的標志物。但ANDERSEN等[8]提出精子減少癥患者和正常精子濃度者，或不育男性和可育男性血清AMH差異無統計學意義。這些爭議可能是由研究對象、研究方法和病例數不同造成的。本研究結果顯示，非梗阻性無精子癥組血清AMH明顯低于其他3組（P<0.05）；AMH與精子總數、精子濃度、精子活力和前向運動精子百分率均呈正相關（r值分別為0.227、0.215、0.111、0.120，P<0.05）。與ALFANO等[6]、熊哲等[10]的研究結果一致。AMH在睪丸生精過程中通過旁分泌方式調節支持細胞功能，也能直接反映生精小管上皮細胞的功能狀態。有研究發現，AMH只存在于生精小管和未成熟精子細胞中[11]，證實了這一觀點。LIU等[12]認為精漿AMH水平與精子濃度、活率和前向運動精子百分率成正比。NERY等[13]發現，精漿AMH有助于維持精子活力，可預測弱精子癥患者精子冷凍保存后精子活力恢復的情況。ANDERSEN等[8]、LIU等[12]和NERY等[13]均認為血清AMH與精子參數無相關性。

本研究還發現，FSH與精子總數、精子濃度呈負相關（r值分別為-0.125、-0.236，P<0.05），InhB與精子總數、精子濃度呈正相關（r值分別為0.232、0.166，P<0.05），與楊昊等[14]、TUNC等[15]的研究結果一致，且已得到普遍認可。FSH基因和FSHR基因存在的單核苷酸多態性可能會影響FSH的表達和FSHR活性，導致男性精子發生障礙[5]。楊昊等[14]的研究結果顯示，精子參數不僅與睪丸功能有關，還與附睪、輸精管等附屬性腺功能有關。因此，在評價男性生精能力時，要綜合各指標多方位、多層次衡量。

無精子癥分為梗阻性無精子癥和非梗阻性無精子癥。傳統的鑒別方法為輸精管造影、睪丸活檢等創傷性檢查。選用合適的生物標志物進行無創性鑒別無精子癥是目前的研究熱點[4]。本研究發現，非梗阻性無精子癥組血清AMH、FSH、InhB水平顯著低于梗阻性無精子癥組（P<0.05）。熊哲等[10]指出，將AMH、FSH、InhB和睪丸體積綜合起來分析，能更好地判斷梗阻性和非梗阻性無精子癥，也能為無精子癥顯微取精提供有益指導。

綜上所述，血清AMH、FSH、InhB水平與精子參數有一定相關性，能為男性不育癥診治提供有價值的信息。但AMH、FSH和InhB都不能非常全面、精確地評價睪丸及其他附屬性腺功能。在評價男性生精能力時，要綜合各指標進行全方位、多層次的評估，以免單一指標造成偏差和失誤。