寄生蟲病的實驗室檢查方法

蔡 祺， 王劍飚

（上海交通大學醫學院附屬瑞金醫院檢驗科，上海 200025）

寄生蟲病的實驗室檢查包括病原學檢查、免疫學檢查和分子生物學檢查[1-3]，在寄生蟲病的診斷中起著重要的作用。病原學檢查是指通過采集患者的血液、組織液、組織、糞便等標本，通過顯微鏡等直接觀察，或在處理、染色后觀察，以發現寄生蟲蟲體或蟲卵作為診斷依據，有時還需進行寄生蟲體外培養或動物接種后再行病原學檢查。寄生蟲病原學檢查存在一定的局限性，往往由于寄生蟲感染階段的不同、寄生部位的不同以及標本采集的方法、操作、部位不同等各種因素影響，未能發現蟲體或蟲卵而漏診，且檢查過程耗時、費力，重復性不佳，結果完全由檢查者主觀判斷，需要檢查者具有豐富的寄生蟲學知識和檢測經驗。免疫學檢查和分子生物學檢查是寄生蟲病實驗室診斷的重要組成部分，相較于傳統的病原學檢查，免疫學檢查和分子生物學檢查有更高的敏感性和特異性，且操作相對簡便、易行，結果客觀、準確，重復性好，結合病原學檢查結果，可以極大地提高寄生蟲的檢測效率。本文就寄生蟲病的實驗室檢查方法進行介紹。

1 病原學檢查

1.1 直接觀察法

1.1.1 薄血膜法 取1滴血滴于1張清潔的載玻片上，另選1張邊緣平整、光滑的載玻片作推片。用左手拇指與中指夾持載玻片2端，右手持推片使其邊緣中點與血滴接觸，并與載玻片呈30°～45°夾角。待血滴沿推片邊緣向兩側展開后，向前勻速推成薄血膜。理想的薄血膜要求紅細胞均勻地鋪成1層，且無裂痕，其末端凸出成舌形。涂片制作完成后采用吉姆薩染色或瑞氏染色等方法染色后，行顯微鏡檢查，常用于檢查血液內的瘧原蟲、微絲蚴、錐蟲、弓形蟲、巴貝西蟲等。

1.1.2 厚血膜法 取2滴血滴于載玻片上，另取1張載玻片作推片，用推片的1個角接觸血滴，從里向外旋轉涂片，使其形成直徑約為0.8 cm、厚薄均勻的圓形血膜，然后平置，待其自然干燥。厚血膜片干燥后，在染色前先用蒸餾水溶血，干燥后再進行染色鏡檢。相較于薄血膜法，厚血膜法對蟲體的檢出率更高。

1.1.3 組織取材檢查 收集患者的組織標本，包括活檢標本、手術或尸檢標本，以切片、染色的載玻片、組織塊或保存的高度懷疑含有寄生蟲的病例的組織等形式送至病理科進行鑒別診斷。這些組織標本通常采用蘇木精-伊紅染色檢查寄生蟲。本法可用于旋毛蟲、盤尾絲蟲、羅阿絲蟲及其他蟲體的檢查[4-5]。

1.1.4 糞便0.9%氯化鈉溶液直接涂片法 滴加1滴0.9%氯化鈉溶液在載玻片的中間，用竹簽挑取約1/2個米粒大小的糞粒，讓糞粒和0.9%氯化鈉溶液充分混合，并在載玻片上均勻地涂抹成一層糞膜，置于顯微鏡下觀察。此法需注意的是滴加0.9%氯化鈉溶液的量視糞便的稀稠情況而定。為了提高檢出率，可取不同部位的檢查結果是陰性的糞便標本復查3次。本法主要用于檢測大鼠、小鼠、豚鼠等實驗動物腸道鞭毛蟲和纖毛蟲。

1.1.5 糞便直接涂片染色法 本法主要為碘液染色。于載玻片中央滴加1滴碘液，用竹簽挑取少許糞便，在碘液中均勻地涂抹1層糞膜，蓋上蓋玻片，在顯微鏡下觀察。此法適用于犬、猴溶組織內阿米巴包囊和結腸內阿米巴包囊、藍氏賈第鞭毛蟲包囊等原蟲包囊的檢測，顯微鏡下發現包囊即可判為陽性。

1.1.6 糞便厚涂片法 世界衛生組織推薦使用改良加藤法（Kato-Katz厚涂片法）蟲卵計數進行定量檢查。該方法適用于多種蠕蟲卵的定量檢測。操作時首先將100目/寸的尼龍網或金屬篩網覆蓋于待檢糞便上，再用塑料刮片輕壓篩網，輕輕刮取透過篩網的細糞渣。將40 mm×30 mm×1.37 mm的聚苯乙烯定量板置于載玻片中間，并用刮片將細糞渣填入定量板的中央孔內（孔徑為8 mm×4 mm，可容納41.7 mg糞便）。小心移去定量板，使標本留在載玻片上。將浸透甘油-孔雀綠溶液（甘油100 mL+3%孔雀綠水溶液1 mL+水100 mL）的玻璃紙（5.0 cm×2.5 cm）覆蓋在標本上，用膠塞輕輕加壓，使標本展平鋪成1個長橢圓形。25 ℃環境下放置1～2 h，糞便透明后即可進行鏡檢。觀察并記錄全部蟲卵數，每克糞便的蟲卵數（egg per gram，EPG）=全部蟲卵數×24×糞便性狀系數（成形便為1、半成形便為1.5、軟濕便為2、粥樣便為3、水瀉便為4）。在操作過程中需注意保證標本新鮮、足量；掌握糞膜的厚度和透明時間對蟲卵的辨認非常重要，鉤蟲卵不易透明過久；親水性玻璃紙剪成30 mm×22 mm的小片，浸于甘油-孔雀綠溶液中至少24 h，直至玻璃紙呈綠色。

1.2 蟲卵濃集法

1.2.1 重力沉淀法 利用各種蠕蟲卵和原蟲包囊比重大于水而自然下沉的原理達到富集目的（此法對較小的薄殼蟲卵效果較差）。具體操作步驟為：取糞便10～30 g，置于玻璃容器中，加水調成混懸液，用40～60目的不銹鋼篩網濾入500 mL錐形量杯中。靜置30 min（如收集原蟲包囊，需靜置6～8 h）后，去上清液，加等量水清洗沉淀，反復多次至上清液不混濁，最后取沉渣鏡檢。

1.2.2 醛醚沉淀法 取糞便約1 g，加水15 mL混勻，過濾至離心管中。1 050×g離心水洗2～3次，去除上清液后，加甲醛固定液10 mL，5 min后加乙醚3 mL，用橡皮塞塞住離心管，用力搖動使其充分混合。隨后168×g離心約5 min，此時管內自上而下分為乙醚層、綠色糞渣層、甲醛層、細渣層4層。取細渣層鏡檢（查包囊時加1滴碘液）。

1.2.3 碘醛液離心沉淀法 配制MIF液[（甘油5 mL+甲醛25 mL+硫柳汞酊（1：1 000）200 mL+蒸餾水250 mL]和盧戈碘液（碘片5 g+碘化鉀10 g+蒸餾水100 mL）。取MIF液10 mL于試管中，加入糞便1 g，充分攪勻。經2層脫脂紗布過濾，濾液中加入冰冷乙醚4 mL，置離心管中，塞住管口后用力振蕩混勻。取下管塞，靜置2 min后，430×g離心1 min。此時管內物自上而下分為乙醚層、糞渣層、汞碘層、沉淀層4層。用竹簽剝離管內上3層，迅速傾去，取沉淀層行鏡檢。此法適用于檢查蠕蟲卵、原蟲包囊、滋養體。

1.3 蟲卵漂浮法

1.3.1 飽和氯化鈉溶液漂浮法 在100 mL沸水中加入30～40 g氯化鈉，攪拌至飽和。取1塊黃豆大小的糞便粒，置于小玻璃瓶中，加少許飽和氯化鈉溶液。用竹簽將糞便調勻，再加入飽和氯化鈉溶液至瓶口，但不能溢出。在瓶口放置1塊潔凈載玻片，避免產生氣泡，放置15 min后，將載玻片迅速翻轉，立即鏡檢。

1.3.2 硫酸鋅離心漂浮法 取糞便約1 g，放入小燒杯內，加10～15倍水，攪勻。用2層濕紗布將糞便濾入離心管內。以（670～1 050）×g離心1 min，棄去上清液，加入清水2～3 mL，攪勻，再加清水至8～10 mL，離心，如此反復3～4次，至水清為止。傾去上清液，加入33%硫酸鋅液3～4 mL，近管口，搖動離心管使沉淀物浮起與硫酸鋅混勻，離心1 min后靜置。用白金圈蘸取表層液膜2～3次，置載玻片上，鏡檢。

1.3.3 蔗糖離心浮聚法 取糞便約5 g，加水20 mL，以260目尼龍袋或4層紗布過濾。將濾液1 509×g離心5～10 min，吸棄上清液，加蔗糖溶液再離心，參照飽和氯化鈉溶液漂浮法，取載玻片表面膜鏡檢。鑒于1 h后卵囊會脫水變形不易辨認，標本制備完成后應立即鏡檢。此法適用于檢查糞便中隱孢子蟲卵囊。

1.3.4 氯化鋅溶液漂浮法 將1塊黃豆大小的糞便粒放入5 mL離心管中，加入4 mL氯化鋅溶液（氯化鋅13.5 g+蒸餾水1 000 mL，溶解后備用）混勻。670×g離心3 min，靜置5 min。取1滴上清液滴在載玻片上，蓋上蓋玻片，鏡檢。此法適用于犬、貓等動物細粒棘球絳蟲的檢測。

1.4 幼蟲孵化法

1.4.1 毛蚴孵化法 此法是診斷日本血吸蟲及華支睪吸蟲的方法之一。取30 g新鮮糞便，處理方法同重力沉淀法，在燒瓶內放入已經洗凈的糞渣，加清水或氨水至燒瓶瓶口處，于25～30 ℃培養箱或室溫孵化，2 h后多次觀察有無毛蚴孵出。如果有毛蚴孵出，在瓶口水面下可見梭狀白色小點做直線運動。毛蚴孵化法又可改良為常規沉孵法和棉析毛蚴孵化法。

1.4.2 常規沉孵法 常規沉孵法又稱沉孵法。取糞便約100 g，放入500 mL燒杯中，將糞便加水調至糊狀，然后再加水至300～400 mL，混勻，用50目的糞篩過濾到另一個燒杯內，加水沉淀，靜置約20 min后棄去上清液，再加水混勻，繼續沉淀；反復3～4次，直至上清液澄清為止。棄去上清液，將上述沉淀糞渣加溫水置于三角燒杯中，水量為離杯口2 cm為宜，并使玻璃管中有一段露出的水柱，瓶口用中央插有玻璃管的膠塞塞上，開始孵化。30 min后觀察水柱內是否有毛蚴孵出，若無，每隔1 h觀察1次，直到發現毛蚴為止。

1.4.3 棉析毛蚴孵化法 棉析毛蚴孵化法簡稱棉析法。取新鮮糞便約50 g，漂洗后，將糞渣放入300 mL平底孵化瓶中，加入25 ℃清水到瓶頸下部，為了使瓶頸下部不浮動，可以在液面上方放1層薄脫脂棉，再緩慢加入溫水至瓶口1～3 cm處。如棉花層上面水中有糞便浮動，可將這部分水吸去，再加清水孵化。這種方法比較簡便，只需漂洗或不漂洗直接裝瓶孵化。毛蚴只集中在棉層上方的清水域中，與下層糞液隔開，有利于毛蚴的觀察。

1.4.4 鉤蚴培養法 鉤蚴培養法主要用于檢查鉤蟲卵。取15 mL潔凈試管1支，加入蒸餾水1～2 mL，將濾紙剪成與試管等寬但較試管稍短的T字形紙條，取黃豆大小糞粒，均勻地涂抹在紙條2/3處，將紙條插入試管，使下端剛剛與水接觸，以糞便不接觸水面為宜，于25～30 ℃培養箱孵育，3 d后（需每天補充蒸發的水分）用肉眼或放大鏡觀察管底水中有無鉤蚴。無色透明的鉤蚴在水中經常呈蛇形游動，蟲體透明。如未發現鉤蚴，繼續培養、觀察至第5天方可結束。

1.5 肛門拭子法

1.5.1 透明膠帶法 透明膠帶法用于檢測蟯蟲卵。雌性的蟯蟲在宿主肛門周圍的皮膚上產卵，蟯蟲卵通常在常規的糞檢中無法檢出，因此可以用2 cm寬的透明膠帶剪成3～6 cm長的小段，貼在肛門周圍，取下并粘在載玻片上，置顯微鏡下檢查。此法也適用于檢測小鼠蟯蟲（隱藏管狀線蟲）卵和大鼠蟯蟲（大鼠管狀線蟲）卵。

1.5.2 棉簽拭子法 將10～11 cm長的竹簽的一端包以脫脂棉，在0.9%氯化鈉溶液中浸濕，然后擠去多余水分，放入試管，蓋上紗布防塵，用時取出。將棉簽于肛周皺襞表面順一個方向滾動揩拭，然后將棉簽放入試管內，并在試管的1/2處加入飽和氯化鈉溶液，用力振蕩數分鐘，然后迅速將棉簽提起放在試管壁上，擠去多余的水分，棄之。試管內加滿飽和氯化鈉溶液，靜置20 min后，用蓋玻片輕輕接觸管口液面，迅速取下，蓋于載玻片上鏡檢。

2 免疫學檢查

2.1 側流免疫層析檢測（lateral flow immunochromatographic assay，LFIA）

LFIA的以條狀纖維層析材料為反應基質，通過毛細作用力使標本溶液在層析條上泳動，與纖維材料上相應的抗體相結合，產生高特異、高親和性的免疫反應，并富集在檢測區域（檢測帶），形成可目測結果的條帶的檢測方法，具有檢測時間短、成本低等優點，極為適合即時檢驗，在寄生蟲檢測領域被廣泛使用。但其也存在特異性不佳、容易產生交叉反應等問題[6]。因此，僅適合作為快速篩查的輔助方法。石峰等[7]建立了快速檢測美洲鉤蟲特異抗體的膠體金免疫層析試條方法，特異性為94.9%，敏感性為88.7%，與酶聯免疫吸附試驗的特異性、敏感性均無差異。GAO等[8]對快速細粒棘球蚴、泡狀棘球蚴的LFIA試劑與包蟲病的檢驗金標準——超聲檢查進行比較，發現LFIA的敏感性和特異性均良好，適合作為包蟲病疫區的篩查工具。TACHIBANA等[9]發現，溶組織內阿米巴半乳糖和N-乙酰-D-半乳糖胺抑制凝集素中間亞基的C末端區域可用于阿米巴病血清學診斷，并利用熒光二氧化硅納米顆粒開發了一種免疫層析檢測試劑，其檢測敏感性和特異性分別為100%和97.6%，是阿米巴病血清學快速診斷的理想方法。

2.2 免疫熒光檢測

免疫熒光檢測是結合免疫學技術和熒光染色法的檢測方法，包括間接免疫熒光技術（indirect fluorescent antibody，IFA）、直接免疫熒光技術（direct fluorescent antibody，DFA）、時間分辨熒光免疫分析法（timeresolved fluoroimmunoassay，TRFIA）和補體法，檢測原理是用已標記了熒光素的熒光抗體或抗原作為探針，與組織或細胞標本內相應的抗原或抗體結合成的抗原-抗體復合物，可在熒光顯微鏡下進行肉眼觀察，標本中受激發光照射而發出的熒光還可以被定量檢測。作為一種成熟的方法，免疫熒光檢測具有可靠、快速、靈敏、適應性好等優點，常用于臨床寄生蟲病的診斷、流行病學調查和治療后的復查，目前弓形蟲病等許多人體寄生蟲病均已用免疫熒光檢測進行常規臨床診斷。孟慶東等[10]用抗惡性瘧原蟲/間日瘧原蟲乳酸脫氫酶抗體1H12作為捕獲抗體包被96孔板，以Sm3+標記抗惡性瘧原蟲乳酸脫氫酶抗體2A5和Eu3+標記抗間日瘧原蟲乳酸脫氫酶抗體4F6作為檢測抗體，建立惡性瘧原蟲與間日瘧原蟲雙標記TRFIA，可同時檢測惡性瘧原蟲、間日瘧原蟲及二者混合感染，陽性率為95.28%，高于鏡檢法的92.45%和Optimal法的51.89%。YLLMAZ等[11]使用DFA檢查糞便標本中的藍氏賈第鞭毛蟲，并與直接顯微鏡觀察法作比較，直接顯微鏡觀察法的敏感性僅為DFA的44.4%。

2.3 免疫磁珠酶聯免疫分析法

免疫磁珠酶聯免疫分析法的原理是抗原或抗體與包被人造超順磁性磁核的抗體或抗原結合，在外界電場的作用下定向移動，達到篩選檢測的目的，常作為大型全自動免疫分析儀的檢測方法，其耗時短、穩定性強、特異性高，但需要較完善的實驗室環境，不適合即時檢驗和快速臨床篩查。

2.4 免疫傳感器技術

生物傳感器借助固定化的生物識別分子和能量轉換器，將生化信號轉化為電信號，可達到直接檢測的目的[12]。相較于傳統免疫檢測方法，其準確度和靈敏度更高，且操作簡單，便于推廣。近年來，隨著納米材料的應用，石墨烯/納米金復合材料的免疫傳感器使檢測靈敏度和特異性有了進一步的提升，已被廣泛用于臨床診斷和寄生蟲實驗室診斷[13]。張玉娟等[14]克隆了表達弓形蟲主要表面抗原1截短型片段——tSAG1，構建了tSAG1納米金免疫傳感器，用于檢測人血清弓形蟲抗體，其敏感性為80.9%、特異性為90.9%、陽性預測值為90.2%，陰性預測值為80.6%，診斷效率為85.2%。付益修等[15]將抗日本血吸蟲可溶性蟲卵抗原納米抗體固定于鍍金的石墨烯薄膜上，制備阻抗型免疫傳感器，用于檢測日本血吸蟲循環抗原，最低檢測限可達0.01 ng/mL，對于血吸蟲病患者血清的陽性檢出率為66.7%，優于酶聯免疫吸附試驗56.7%的檢出率。免疫傳感器檢測的靈敏度、特異性相較于傳統免疫學檢測有一定優勢，但對檢測結果的觀察仍需要較昂貴的儀器來輔助，目前僅適用于實驗室檢查。

2.5 酶聯免疫吸附試驗

酶聯免疫吸附試驗是經典的檢測方法，其基本原理是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行，然后將液相中的多余游離成分洗除。常用的酶聯免疫吸附試驗包括雙抗體夾心法和間接法，前者用于檢測大分子抗原，后者用于測定特異抗體。目前，寄生蟲相關抗原抗體檢測的酶聯免疫吸附試驗檢測試劑盒多采用高純度新式抗原或抗體，操作方便、靈敏度高、特異性強，臨床常用于囊蟲病、包蟲病、肺吸蟲病和曼氏裂頭蚴病等寄生蟲病的快速檢測[16-18]。

3 分子生物學檢查

目前，聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）技術已有了長足的發展，成為分子生物學領域最常用的方法之一。PCR可以將微量的目標DNA片段經變性-退火-延伸的多次循環，在體外擴增100萬倍以上。PCR技術的優點是能直接檢測寄生蟲病原體的DNA或RNA片段，敏感性高、特異性強、重復性好，但是由于其反應原理的關系，實驗需要較為精密、昂貴的儀器，且需要較長的高溫循環反應時間。在其后誕生的等溫擴增技術可在恒定溫度下，通過一些特殊的蛋白（酶）使DNA雙鏈解旋，并促使特異性DNA片段擴增，以達到核酸體外擴增的效果。相較于PCR技術，等溫擴增技術大大縮短了反應時間，降低了對儀器的依賴，同時檢測的靈敏度、特異性都有不同程度的提高。

3.1 PCR技術

近幾十年來，在PCR技術的基礎上衍生出的技術有很多[19]，包括以巢式PCR引物來增強反應敏感性和特異性的巢式PCR；在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號的變化實時監測整個PCR進程，最后能對未知模板進行定量分析的實時定量聚合酶鏈反應（real-time quantitative polymerase chain reaction，qPCR）；在1個反應體系中使用多套引物，針對多個DNA模板或同一模板不同區域進行擴增的多重PCR[20]；在擴增結束后對每個反應單元的熒光信號進行采集，通過計算得到樣品原始濃度或含量的數字PCR[21]技術。從最初作為寄生蟲病原體的檢測方法[22]，到進一步研究寄生蟲各種分子標志物的工具，目前又開發出更簡便易行的核酸檢測方法，可同時尋找到治療和檢測的新靶點，PCR技術一直是近幾十年來寄生蟲學發展的基礎。王瑩等[23]采集細粒棘球蚴病患者外周血，分離血漿后提取游離DAN（cell free DNA，cfDNA），并測序，對測序數據進行生物信息學分析，并與人參考基因組和細粒棘球絳蟲基因組進行綜合比對，來篩選診斷標志物候選序列，他們分別以細粒棘球蚴病患者和健康人血漿cfDNA為模板，采用qPCR分析診斷標志物候選序列的特異性和敏感性，初步發現細粒棘球蚴病患者血漿中存在的蟲源性cfDNA可作為潛在的診斷標志物。WU等[24]發現了利什曼原蟲的動基體DNA微環，經qPCR分析，不僅可以用于皮膚和內臟利什曼病的診斷，且具有很高的敏感性和特異性；還可以用于評估利什曼病的嚴重程度和治療效果，具有快速診斷和病情監測的應用價值。SEILIE等[25]比較了瘧原蟲18SrRNA作為生物標志物用于qPCR檢測與傳統血涂片法檢測瘧原蟲的效果，發現PCR陽性檢出時間普遍早于血涂片法。瘧原蟲18SrRNA是一種敏感且特異的生物標志物，可以合理地代替血液涂片，用于實驗室檢測。

3.2 等溫擴增技術

目前較常用的等溫擴增技術包括環介導等溫擴增（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）、依賴核苷酸序列的擴增（nucleic acid sequence-based amplification，NASBA）[26]和連接酶鏈反應（1igase chain reaction，LCR）。LAMP是日本學者Notomi等發明的一種新型的體外擴增DNA的方法，與傳統PCR不同，該方法利用鏈置換反應和環介導進行基因擴增，用4個或6個引物對DNA的6個或8個區域進行目的片段擴增[27]。NASBA已在病毒學、寄生蟲學等領域得到廣泛應用，其可以擴增DNA和RNA，是在1對含有T7啟動子序列的引物引導下，進行連續41℃恒溫的酶聚合反應，反應原料為模板DNA或RNA、逆轉錄酶、噬菌體T7核糖核酸聚合酶、核糖核酸酶H和2條寡核苷酸引物；其中上游引物5'末端含有噬菌體T7的依賴于DNA的RNA聚合酶的啟動子序列，下游引物的5'端包含與檢測探針互補的序列，這樣既能為噬菌體T核糖核酸聚合酶提供識別位點，又能運用探針標記技術進行檢測。LCR是指在連接酶的作用下，將與模板鏈互補的相鄰寡核苷酸片段與磷酸二酯鍵連接，形成1條新鏈，這條新鏈可作為模板參與反應，經過反復循環，使模板呈指數增長；將引物事先作抗原標記，擴增后產物就可通過酶聯免疫吸附試驗進行分析。

等溫擴增技術在恒溫下進行，可以使用簡單的加熱模塊或者水浴，不需要熱循環儀等昂貴儀器，比傳統PCR操作更簡便，且成本較低，還保留了PCR技術特異性好、敏感性高、結果準確等優點。等溫擴增技術克服了傳統PCR不能在實驗室外操作的不足，在寄生蟲病快速檢測領域具有廣泛的應用價值[28]。ORDó?EZ等[29]利用LAMP技術檢測血液中克氏錐蟲的高同源衛星重復序列（231 bp），證實了其不俗的檢測效能，和更方便、快捷、準確的優勢，特別在資源有限的地區，可以作為快速診斷錐蟲病的即時檢測方法；GRAB等[30]利用LAMP技術檢測布魯氏錐蟲病患者腦脊液中的錐蟲pan-T多拷貝基因，發現通過檢測腦脊液中的錐蟲DNA，能監測錐蟲病的嚴重程度，適合臨床一線作為錐蟲病病情監測的即時檢測方法。CHAOUCH等[31]采用LAMP方法檢測皮膚利什曼病患者利什曼原蟲的半胱氨酸蛋白酶B基因的敏感性為84%，特異性為100%，可區分蟲種。MORRIS等[32]詳細比較了LAMP技術與其他瘧原蟲檢測方法的差異，發現LAMP技術相較于傳統光學顯微鏡檢測、免疫學檢測和傳統PCR等方法，在敏感性和特異性方面均有較大的優勢，且檢測限普遍低于其他方法，不僅適合瘧疾流行區的臨床診斷，亦適合在瘧疾非流行區進行疾病的篩查。

4 總結和展望

經過60多年的努力，我國寄生蟲病的防治取得了巨大的成就，許多過去廣泛流行的寄生蟲病已經消除或接近消除。隨著社會和經濟的發展，國際間交流的日益頻繁，寄生蟲病的流行特點也發生了巨大改變。食源性寄生蟲病、輸入性寄生蟲病、機會性寄生蟲病等新型寄生蟲病成為目前寄生蟲病的主要發病因素[33]。因此，寄生蟲的實驗室檢測對于寄生蟲病的防治尤為重要。近年來，免疫學和分子生物學檢測技術的不斷突破，也為寄生蟲病的診斷和防治提供了強有力的支持。但目前，我國獲得寄生蟲病預防控制體系認證、認可的實驗室數量仍相對較少[34]，室均檢測項目數尚不足以覆蓋常見寄生蟲，有可用標準但未使用的檢測項目仍較多。在新的寄生蟲病流行環境下，有必要加強認證、認可實驗室的建立和能力提升，同時還應適應新的形勢，不斷學習和開展寄生蟲病檢測新技術，進一步提升我國寄生蟲病實驗室檢測能力。