苦蕎黃酮對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)、消化性能及血清指標(biāo)的影響

縱 瑞 ，王 強(qiáng) ，崔 凱 ，曾國(guó)茂 ，張乃鋒 ＊

（1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，北京 100081；2.四川省涼山州畜牧獸醫(yī)科學(xué)研究所，四川 西昌 615042；3.安徽科技學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，安徽 滁州 233100）

仔豬的健康生長(zhǎng)是豬場(chǎng)養(yǎng)殖效益的重要保障，但其消化和免疫系統(tǒng)均未發(fā)育健全，斷奶后容易受到外界不良因素如病原菌、溫度變化等的刺激，導(dǎo)致腹瀉、生長(zhǎng)抑制等一系列問題。隨著農(nóng)業(yè)農(nóng)村部194號(hào)公告文件于2020年7月1日的生效與實(shí)施，飼料禁抗的新時(shí)代已經(jīng)到來，如何尋找有效的抗生素替代物，保障仔豬健康并促進(jìn)生長(zhǎng)成為當(dāng)前尤為重要的課題。

黃酮類物質(zhì)是一類具有多酚結(jié)構(gòu)的植物次生代謝物，廣泛存在于水果、蔬菜和谷物中，具有良好的抗炎、抗氧化、抑制耐藥菌[1]以及調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能[2]、提高動(dòng)物生長(zhǎng)性能[3]等作用，展現(xiàn)出其成為替抗添加劑的巨大潛力。目前黃酮類物質(zhì)在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用研究主要集中在苜蓿黃酮[4]、大豆異黃酮[5]、桑葉黃酮[6]等。苦蕎黃酮（Buckwheat f lavone,BF）是苦蕎麥中的主要活性物質(zhì)，可改善機(jī)體抗氧化能力和免疫功能[7]。已有研究發(fā)現(xiàn)苦蕎黃酮具有促進(jìn)斷奶仔豬的生長(zhǎng)，改善其免疫功能以及提高仔豬抗氧化力的功能，作用效果與抗生素組效果接近[8]。然而，苦蕎黃酮在仔豬飼糧中的適宜添加劑量仍不明確，因此本研究以抗生素組作為陽(yáng)性對(duì)照，旨在探究不同劑量苦蕎黃酮在促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)、改善消化以及血液指標(biāo)方面的效果，為苦蕎黃酮在仔豬飼糧中的應(yīng)用提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)基于單因素設(shè)計(jì)方法，選擇（35±3）日齡、平均體重為（8.88±1.36）kg的三元雜交斷奶仔豬32頭，隨機(jī)分為4組，每組8個(gè)重復(fù)。對(duì)照組（CON）仔豬飼喂添加40 mg/kg硫酸黏桿菌素的基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)BF20、BF40、BF60組分別飼喂添加了20、40、60 mg/kg的苦蕎黃酮的基礎(chǔ)飼糧。試驗(yàn)期共35 d，全程記錄采食量，試驗(yàn)始末晨飼前空腹稱量體重，于試驗(yàn)第26~35天進(jìn)行消化試驗(yàn)，于試驗(yàn)?zāi)┎裳獪y(cè)定血清指標(biāo)。

1.2 試驗(yàn)飼糧、動(dòng)物及飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)用苦蕎黃酮制劑的有效含量≥70%。參照美國(guó)國(guó)家科學(xué)研究委員會(huì)（National Research Council，NRC）2012年出版的豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)第11版（Nutrient Requirements of Swine，11threvised edition，2012）配制玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，其原料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗(yàn)基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)） %

試驗(yàn)豬在試驗(yàn)期間飼養(yǎng)于漏縫式高床上，全程自由采食、自由飲水，試驗(yàn)豬舍保持通風(fēng)良好，舍內(nèi)溫度控制在20～25 ℃之間。試驗(yàn)期間每日舍內(nèi)清糞1次，保持豬床及舍內(nèi)清潔，每周進(jìn)行豬舍消毒2次。其他管理參照豬場(chǎng)要求進(jìn)行。

1.3 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.3.1 生長(zhǎng)性能

試驗(yàn)仔豬的生長(zhǎng)性能指標(biāo)包括日增重（ADG）、采食量（DMI）和料重比（F/G）。于試驗(yàn)的第1 天和第36 天晨飼前對(duì)每頭仔豬進(jìn)行空腹稱重（BW），基于始末體重計(jì)算仔豬ADG；每天記錄每個(gè)處理組仔豬的給料量，于試驗(yàn)第36 天早晨稱剩料量，計(jì)算DMI。根據(jù)ADG和DMI計(jì)算F/G。

1.3.2 消化試驗(yàn)

于試驗(yàn)第26天開始進(jìn)行，參照王強(qiáng)等[8]的方法開展消化試驗(yàn)并計(jì)算營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率，外源指示劑為二氧化鈦（TiO2）。消化試驗(yàn)結(jié)束后，將飼料樣和糞便樣烘干至恒重（65 ℃）、粉碎，參照張麗英[9]的方法檢測(cè)其能量和常規(guī)成分，參照鄧雪娟等[10]的方法測(cè)定鈦（Ti）含量。

1.3.3 血清指標(biāo)

試驗(yàn)第36天早晨8點(diǎn)開始，從每組隨機(jī)選6頭仔豬，通過前腔靜脈采集血液10 mL，連同離心管放入離心機(jī)以3 000 r/min的速度離心20 min，分離血清保存于-20 ℃冰箱中。用全自動(dòng)生化儀（KHB-1280）測(cè)定血清TP、ALB、B U N、G L U、N E FA、G H和IGF-Ⅰ含量；用全自動(dòng)放免計(jì)數(shù)儀（GC-1200）測(cè)定血清IgG等指標(biāo)含量；用半自動(dòng)生化分析儀（L-3180）測(cè)定血清T-AOC等抗氧化指標(biāo)的含量。

1.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

首先用Excel 2019軟件整理數(shù)據(jù)，然后用SPSS V26.0統(tǒng)計(jì)軟件的單因素方差分析程序統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)，并進(jìn)行線性、二次曲線分析，多重比較則用鄧肯氏法。P＜0.05為差異顯著，0.05＜P＜0.10判定為趨于顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 生長(zhǎng)性能

苦蕎黃酮對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響見表2。

由表2可知，仔豬初重?zé)o顯著 的 組 間 差 異（P＞0.05），符合 試 驗(yàn) 要 求。BF40、BF60組 仔豬末重較BF20組有增高的趨勢(shì)（0.05＜P＜0.10）；仔 豬 采 食 量與苦蕎黃酮添加量呈二次相關(guān)關(guān)系（P＜0.05），BF60組 顯 著 高 于 其他三組（P＜0.05）；ADG隨苦蕎黃酮添加量的增加呈線性相關(guān)關(guān)系（P＜0.05），BF40、BF60組ADG顯 著 高 于BF20組（P＜0.05）；F/G各組差異不顯著（P＞0.05）。

表2 苦蕎黃酮對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

2.2 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率

苦蕎黃酮對(duì)斷奶仔豬營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響見表3。

由表3可知，飼糧GE、DM、OM的消化率與苦蕎黃酮的添加量呈二次相關(guān)關(guān)系（P＜0.05），BF60組顯著低于BF20組（P＜0.05）；CP的消化率與苦蕎黃酮的添加量呈二次相關(guān)關(guān)系（P＜0.05），BF20組CP消化率顯著高于CON組（P<0.05），BF60組顯著低于BF20組（P＜0.05）；Ca的消化率與苦蕎黃酮的添加量呈線性相關(guān)關(guān)系（P＜0.05），BF60組顯著低于CON組（P＜0.05）；試驗(yàn)各組EE和P的消化率差異不顯著（P＞0.05）。

表3 苦蕎黃酮對(duì)斷奶仔豬營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響 %

2.3 苦蕎黃酮對(duì)斷奶仔豬血清指標(biāo)的影響

苦蕎黃酮對(duì)斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響見表4。

由表4可知，各組血清GLB、ALB/GLB、BUN和GLU含 量 差異不顯著（P＞0.05），但BF60組血清ALB較其他三組有上升趨勢(shì)（0.05＜P＜0.1）；血 清TP含 量與苦蕎黃酮的添加量呈二次相關(guān)關(guān)系（P＜0.05），BF60組顯著高于BF20組（P＜0.05）；血 清NEFA含量與苦蕎黃酮添加量呈線性相關(guān)關(guān)系（P＜0.05），IGF-Ⅰ含量與苦蕎黃酮添加量呈線性相關(guān)和二次相關(guān)關(guān)系（P＜0.05），BF60組顯著高于其他3組（P＜0.05）；血清GH含量與苦蕎黃酮添加量呈線性相關(guān)關(guān)系（P＜0.05），BF40組 顯 著 高 于CON組 和BF20組（P＜0.05）。

表4 苦蕎黃酮對(duì)斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響

苦蕎黃酮對(duì)斷奶仔豬血清免疫及抗氧化指標(biāo)的影響見表5。

由表5可知，各組血清IgG含量差異不顯著（P＞0.05），各組IgA與苦蕎黃酮添加量呈線性和二次相關(guān)關(guān)系（P＜0.05），BF60組顯著高于其他3組（P＜0.05），BF40組顯著低于BF20組（P＜0.05）；各組IgM與苦蕎黃酮添加量呈線性相關(guān)和二次相關(guān)關(guān)系（P＜<0.05），BF60組顯著高于其他3組（P<＜0.05）。BF40組血清T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT含量顯著高于其他3組（P＜0.05），MDA含量顯著低于其他3組（P＜0.05）。

表5 苦蕎黃酮對(duì)斷奶仔豬血清免疫及抗氧化指標(biāo)的影響

3 討論

黃酮與雌激素分子結(jié)構(gòu)類似，可以調(diào)節(jié)下丘腦、垂體生長(zhǎng)軸，影響GH、IGF-Ⅰ的分泌，促進(jìn)仔豬腸道發(fā)育，有利于蛋白質(zhì)的合成與吸收，提高動(dòng)物生長(zhǎng)性能[11-12]。本研究在飼糧中添加40 mg/kg苦蕎黃酮顯著提高了斷奶仔豬的采食量和日增重。與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果類似，陳慶菊[13]研究結(jié)果顯示，柑橘黃酮可提高仔豬的采食和增重速度，還提高了仔豬飼料利用效率；孫志偉[14]在飼糧中添加大豆黃酮，結(jié)果顯著提高了生長(zhǎng)育肥豬的增重速度，表明適宜劑量的苦蕎黃酮可以替代抗生素作為促生長(zhǎng)劑使用。

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收與腸道健康有著密不可分的聯(lián)系，黃酮類物質(zhì)可以促進(jìn)腸道有益菌增殖，刺激腸道上皮絨毛的生長(zhǎng)及消化酶分泌，有利于養(yǎng)分的消化吸收[15-16]。與李方方等[17]在斷奶仔豬飼糧中添加大豆異黃酮的試驗(yàn)結(jié)果一致，本試驗(yàn)結(jié)果表明添加20 mg/kg苦蕎黃酮促進(jìn)了各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，其中CP消化率較對(duì)照組顯著提高，進(jìn)一步驗(yàn)證了黃酮類物質(zhì)可以提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化利用率。但營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率與苦蕎黃酮添加量呈現(xiàn)二次曲線相關(guān)關(guān)系。可能與過量的黃酮物質(zhì)有一定的抗?fàn)I養(yǎng)作用有關(guān)，過量添加會(huì)抑制腸道消化酶活性、破壞腸道組織結(jié)構(gòu)[18]。

本試驗(yàn)中，隨著苦蕎黃酮添加量的增加，仔豬血清總蛋白和白蛋白含量相應(yīng)提高，說明苦蕎黃酮促進(jìn)了仔豬機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的吸收，與生長(zhǎng)性能提高的結(jié)果相一致。與本試驗(yàn)結(jié)果相似，趙萌等[19]研究證明，在仔豬飼糧中添加藤茶總黃酮（AGF）可以提高其血清中總蛋白和白蛋白含量。NEFA濃度與甘油三酯的分解緊密相關(guān)[20]。本研究發(fā)現(xiàn)，苦蕎黃酮顯著提高了仔豬血清NEFA的含量，這表明苦蕎黃酮可能促進(jìn)了甘油三酯的分解，從而改善仔豬脂肪代謝。本試驗(yàn)中仔豬血清中GH、IGF-Ⅰ含量隨著苦蕎黃酮添加量的增加呈線性增長(zhǎng)。前人研究發(fā)現(xiàn)，桑葉黃酮和沙蔥黃酮均提高了動(dòng)物血清GH和IGF-Ⅰ含量[3,21]。黃酮類物質(zhì)具有雌激素樣作用，可與下丘腦、垂體等部位的雌激素受體結(jié)合，調(diào)控GH/IGF-Ⅰ軸，影響GH、IGF-Ⅰ激 素 分 泌[22-23]。IGF-Ⅰ通過促進(jìn)體細(xì)胞增殖，調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)合成，促進(jìn)仔豬組織器官發(fā)育和骨骼生長(zhǎng)[3]。

免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）在機(jī)體免疫中發(fā)揮著重要作用，其含量與機(jī)體免疫能功能相關(guān)。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，仔豬血清中IgA、IgM含量隨著苦蕎黃酮添加量的增加呈線性增長(zhǎng)，二者分別在黏膜免疫和體液免疫應(yīng)答中發(fā)揮十分重要的作用[24-25]。與本試驗(yàn)結(jié)果相似，陽(yáng)帆等[26]的研究結(jié)果顯示飛機(jī)草總黃酮顯著提高了免疫抑制小鼠血清中IgG、IgM的含量；周珊[27]則證明了大豆甙元顯著提高錦江黃牛血清中IgG、IgM的含量。由此可見，在飼糧中添加苦蕎黃酮可改善仔豬的免疫性能，使其健康生長(zhǎng)。

黃酮類物質(zhì)可通過直接與自由基發(fā)生反應(yīng)、抑制產(chǎn)自由基關(guān)鍵酶、刺激體內(nèi)抗氧化酶產(chǎn)生等方式發(fā)揮其抗氧化作用[28-29]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，當(dāng)苦蕎黃酮添加量為40 mg/kg時(shí)，仔 豬 血 清 中T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT含量較CON組顯著增加，MDA值顯著降低，抗氧化能力較CON組顯著增加。與本試驗(yàn)結(jié)果相一致，杜仲黃酮可以有效降低敵草快造成的仔豬氧化應(yīng)激反應(yīng)，減輕炎癥造成的腸道損傷[30]。

4 結(jié)論

該試驗(yàn)條件下，飼糧中添加苦蕎黃酮（有效含量≥70%）促進(jìn)了斷奶仔豬對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，改善了免疫功能和抗氧化能力，提高了斷奶仔豬采食量和日增重。綜合仔豬生長(zhǎng)性能及血清指標(biāo)，苦蕎黃酮的最適宜添加量為40 mg/kg。