動物衣原體病疫苗研究技術及應用進展

王磊，王俊菊，史艷艷，康福忠，張浩

（天津市農業生態環境監測與農產品質量檢測中心天津 300402）

動物衣原體病是指動物由于感染動物源性衣原體而導致的疾病。根據傳染對象可以分為禽類衣原體病和哺乳動物衣原體病。研究發現，動物衣原體病可以導致人感染，屬于一種人畜共患病。如何阻斷或治療動物感染的衣原體病是畜牧養殖業面臨的當務之急的問題。

動物衣原體寄生于細胞內，它屬于的科只有一個屬，含有12個已知的種。流產衣原體流傳甚廣，在世界范圍內都有分布，是危害畜牧業的一種嚴重疾病。流產衣原體能引起綿羊的流產，在世界上很多羊的飼養區，可以造成很大的資產損失。除了綿羊，還可能引起很多的動物流產，例如牛、馬等。因為除了流產外流產衣原體其他病癥不是很顯著，這會造成對該病的忽略?，F在還沒有針對該病的商業化疫苗，所以說早期的鑒別和診斷能防控該疾病的流行。

迄今為止，關于動物衣原體的案例并不少見，只是局限在血清流行病調查以及個別的動物案例的報道，對區域范圍內的研究和流行情況并不是很清楚，這種情況妨礙了國家對流產衣原體在家畜體中的具體情況的分析，進一步妨礙了國家具體防治措施的制定。不同地區、不同物種在衣原體菌株的遺傳進化方面存在一定的區別，這些差異會導致致病能力不同。

衣原體病多見抗生素治療的報道。但抗生素治療易產生抗生素殘留超標且易產生耐藥性。針對衣原體類似于病毒的結構特點，用于抵抗衣原體病的疫苗發展迅速。由于衣原體病疫苗具有抗生素無法替代的優勢，越來越受到研究者的矚目。本文綜述了研究衣原體病各類疫苗的特點，以期為衣原體疫苗研究提供參考。

1 弱毒活疫苗

此種疫苗研究的原理為利用物理誘變獲得在35℃低培養溫度和39.5℃高培養溫度下的衣原體變異株，使這類變異衣原體的毒性減弱。對毒性減弱的衣原體變異株進行培養，加入必要的保護措施制成疫苗。用弱毒活疫苗對懷孕山羊實驗后發現：羊源衣原體弱毒疫苗對懷孕山羊的流產有很好的抑制效果。

2 滅活疫苗

滅活疫苗的制備是把衣原體分離出來后加入特定培養皿中，利用甲醛等物質，對衣原體進行滅活。選取一定的試驗體進行對比試驗，比較對照組和免疫組的感染效果。如果感染率或者致病率降低，那么滅活疫苗就具有免疫效果。俄羅斯的科學家用羊的胚胎細胞來培養病原體，研制了衣原體白油佐劑滅活疫苗。在該衣原體流行病發生地，通過接種制備滅活疫苗，統計牛、羊的免疫效果，發現這種滅活疫苗可以使接種過疫苗的90%以上的動物免于流產。而且，跟蹤試驗對象還發現這種疫苗的免疫期限是1 年。這說明滅活疫苗治療效果比較理想。

能夠引起反芻動物流產，羊傳染性流產和該衣原體有很大的關系。這種衣原體造成羊流產的原因是會感染其胎盤，會給養殖戶帶來很大的經濟損失。這種衣原體有時會感染給人類，造成孕婦流產。第一次感染這種微生物的羊流產率為35%～75%。

國外報道了從流產的母羊胎盤上分離得到衣原體，結合試驗進一步證明了該衣原體是流產嗜衣原體[1]，是導致牛、羊流產的原因之一。通過胎盤或雞胚黃囊膜培養致病支原體，之后用甲醛進行滅活。用這種方法制成滅活疫苗后，對羊群進行接種，結果發現：免疫組發生流產的比例在10%以下，而未進行疫苗接種的對照組50%以上都會發生流產。證明了這種滅活支原體病疫苗對造成牛羊流產有很好的免疫作用。

有科學家從豬的流產胎盤中分離出了衣原體菌株[2]，對致病菌株進行培養，用甲醛滅活，制成滅活疫苗。該疫苗經過一次注射3mL，可以有效的保護豬不流產。經大面積推廣，使牛和羊的流產率大大降低，對牛羊的養殖起到了良好的促進作用。

3 利用基因工程研制疫苗

隨著科技的發展，基因工程的應用也越來越廣泛，運用基因工程制成的疫苗具有安全性好、容易大批量生產等特點。國內外大量的研究和試驗證明衣原體外膜蛋白是特異性抗原。研究人員的注意力主要在衣原體的外膜蛋白上，利用這一點，運用基因工程表達rCps-MOMP 蛋白，制成疫苗后對預防各種哺乳動物和肉禽類動物的衣原體感染有很好的效果。

有學者運用不同的抗原劑量接種授精25d 前的羊，試驗表明抗原免疫劑量為0.5mg，注射后1 個月左右抗體在羊體內含量會達到最高，兩個月后抗體含量基本不變?？贵w的作用會一直持續到羊分娩。

4 亞單位疫苗

亞單位疫苗是運用衣原體主要保護免疫原組分制成的疫苗。這種疫苗會選用致病衣原體的特異性抗原蛋白包括外膜蛋白、多肽膜蛋白等作為合成對象。有學者用鸚鵡熱衣原體的表達產物，運用基因工程做成亞單位疫苗。給4 萬余只肉雞注射該疫苗，保護率為95%左右，對照組為85%。該疫苗還有非常安全、保護效果好、沒有副作用的優點，可以有效地保護肉雞免于鸚鵡熱衣原體的感染。

5 疫苗研究技術方向

5.1 利用DNA 技術制成的疫苗

利用DNA 技術制成的疫苗也叫核酸疫苗，這種疫苗是運用DNA 重組技術，直接注射到體內，機體會對被誘導產生免疫。這種方式安全性高，效率也高。國外有報道，利用噬菌體為介質的DNA疫苗，有效的免疫仔豬流產衣原體。

5.2 利用活載體的疫苗

可以利用基因工程這項比較高端的技術，操控病原的基因。通過感染把疫苗運輸到各個組織，誘使機體產生免疫應答。

6 動物衣原體病疫苗存在問題與展望

通過以上總結，滅活疫苗還存在生產周期長，免疫的效果不理想，疫苗活性還不穩定等缺陷。此外，由于衣原體是人類和動物共同感染的疾病。所以滅活疫苗的使用也存在風險。隨著社會的發展，科技的進步，基因工程越來越被用于衣原體疫苗的研發生產制造方面。運用基因工程生產疫苗可以不用接觸衣原體，最大程度的保證了人的安全。國內外都已經允許運用生物學技術生產和研發疫苗，市場上已經可以見到大量的這種疫苗。DNA 疫苗和活載體疫苗的研究剛剛開始，技術有待于實踐的考驗。

動物衣原體病盛行，阻礙了動物的繁殖，損害了養殖戶的利益。所以阻止動物衣原體病的發生和流行勢在必行。養殖人員應加強培訓飼養和防護技術，讓其在養殖時避免感染衣原體。但由于這項工作需要專業的知識，在平時生產生活中難免出紕漏。所以完全遏制住衣原體病的發生傳染可能性非常小，疫苗就顯得的十分重要。各類疫苗各有特點，要謹慎地選擇用以上哪一種方法研究和制作疫苗。