血清NO、LXA4、Apelin表達水平對糖尿病視網膜病變嚴重程度的判定價值

丁紅萍，季曉燕，陳之陽，黃 江

蘇州大學附屬第二醫院眼科，江蘇蘇州 215000

糖尿病(DM)是臨床常見的代謝性疾病，其主要并發癥為微血管及大血管病變，其中微血管病變的發生率較高[1]。糖尿病視網膜病變(DR)是最常見的DM微血管并發癥之一，據統計，超過60%的DM患者會并發DR[2]。目前DR的發病機制尚未完全闡明，有研究表明，一氧化氮(NO)、脂氧素A4(LXA4)、脂肪因子(Apelin)可能與DM及其多種并發癥的嚴重程度相關[3-5]，但目前該3項指標與DR的關系仍鮮有報道。本研究通過檢測DR患者血清NO、LXA4、Apelin表達水平，分析其與DR嚴重程度之間的關系，旨在為DR的診斷及病情監控提供依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取本院2017年1月至2019年2月收治的85例DR患者作為觀察組，另選擇同期80例非DR的DM患者作為對照組，50例體檢健康者作為健康組。納入標準：(1)患者符合2型DM診斷標準；(2)入院前患者無眼部手術及外傷史；(3)DR患者經眼底熒光血管造影檢查確診為視網膜病變；(4)患者年齡≤70歲；(5)患者精神正常并配合本研究。排除標準：(1)患者合并惡性腫瘤疾病；(2)患者合并脈絡膜脫離、青光眼、角膜新生血管等眼部疾??；(3)存在嚴重心、肝、腎功能異常；(4)患者腦血流圖、CT掃描檢查發現視網膜之外的血管出現動脈粥樣硬化等并發癥；(5)存在嚴重代謝綜合征；(6)主動申請退出本研究。觀察組男39例，女46例，平均年齡(60.29±5.38)歲，平均DM病程(21.38±6.49)個月，平均體質量指數(BMI)為(24.73±2.09)kg/m2，平均收縮壓(124.38±13.28)mm Hg，平均舒張壓(76.59±6.94)mm Hg；對照組男36例，女44例，平均年齡(60.75±6.14)歲，平均DM病程(21.72±7.13)個月，平均BMI(24.71±2.13)kg/m2，平均收縮壓(125.23±14.19)mm Hg，平均舒張壓(77.19±7.43)mm Hg；健康組男22例，女28例，平均年齡(61.29±8.32)歲，平均BMI(24.12±1.93)kg/m2，平均收縮壓(121.89±15.12)mm Hg，平均舒張壓(78.19±8.97)mm Hg。受試者組間一般資料比較，差異無統計學意義，具有可比性(P>0.05)。本研究經醫院倫理委員會批準，所有研究對象均簽署知情同意書。

1.2方法 所有受試者在入組后采集空腹靜脈血，采用硝酸還原酶比色法檢測血中NO水平(試劑盒，意大利PANERA公司，批號：AAPR194-1)，采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測患者血中LXA4(試劑盒，德國IBL公司，批號：IC-LXA4-Ge)、Apelin(試劑盒，武漢CUSABIO公司，批號：CSB-E14334h-1)水平，檢測前遵照檢驗項目標準操作規程并使用原廠試劑進行操作和質控，嚴格遵照試劑盒說明書進行檢測操作并繪制標準曲線行定量分析。并在患者入組后對觀察組患者DR病情嚴重情況進行評估，包括Ⅰ期：后極部位中心出現小出血點及微血管瘤；Ⅱ期：出現出血斑及黃白色硬性滲出；Ⅲ期：有白色棉絨斑并伴隨出現出血斑；Ⅳ期：眼底出現纖維增殖和新生血管；Ⅴ期：眼底玻璃體出血，出現纖維增殖和新生血管；Ⅵ期：眼底有纖維增殖和新生血管，并出現視網膜脫離顯像。

2 結 果

2.13組各指標檢測結果比較 觀察組NO及Apelin水平明顯高于對照組和健康組，LXA4水平明顯低于對照組和健康組，且差異均有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 3組各指標檢測結果比較

2.2觀察組不同病情嚴重程度患者各指標檢測結果比較 Ⅰ～Ⅲ期DR患者NO及Apelin水平明顯低于Ⅳ～Ⅵ期患者，LXA4水平明顯高于Ⅳ～Ⅵ期患者，且差異均有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 觀察組不同病情嚴重程度患者各指標檢測結果比較

2.3DR嚴重程度與NO、Apelin及LXA4表達水平的相關性分析 DR嚴重程度與NO和Apelin的表達水平呈正相關(r=0.863、0.541，P<0.001)，與LXA4表達水平呈負相關(r=-0.869，P<0.001)，見表3。

表3 DR嚴重程度與NO、Apelin及LXA4表達水平的相關性分析

3 討 論

DR是常見的DM微血管并發癥之一，其臨床癥狀主要有視物模糊、視力下降等，嚴重者會出現失明[6]。眼底檢查是臨床常用的確診方法，但普及率較低[7]。隨著血清學檢查技術在疾病診斷中的應用越來越廣泛，探尋與DR病情相關的血清特異性指標對DR的篩查具有重要意義[8]。

DR病情的發展主要體現為微血管內皮基底膜變厚以及微循環發生障礙。研究表明，毛細血管管腔變窄會導致血流改變，從而使視網膜出現缺氧缺血狀態并促進新生血管的形成[9-10]。有研究發現，抑制NO可以避免視網膜出現缺血損傷，提示NO可能參與DR的發生發展[11]。Apelin在葡萄糖穩態維持、免疫調節等方面均發揮重要作用，而LXA4具有較強的抗炎作用[12-13]。

本研究結果顯示，與對照組和健康組相比，觀察組NO及Apelin水平升高，而LXA4水平顯著降低，提示患者NO、Apelin以及LXA4水平對DR的發生發展具有一定的影響。進一步對DR患者進行分析發現，隨著患者病情加重，其血清NO及Apelin水平逐漸升高，而LXA4水平則明顯降低，相關性分析結果顯示，DR嚴重程度與血清NO及Apelin水平呈正相關(r=0.863、0.541，P<0.001)，而與LXA4水平呈負相關(r=-0.869，P<0.001)。NO作為血管活性物質，屬于內皮依賴性血管收縮因子和血管舒張因子，有研究表明，DR患者血清NO水平異常升高可能導致患者體內一氧化氮合酶活性增加，加速患者視網膜出現缺血性損傷[14]。有研究報道，血清Apelin與血管緊張素Ⅱ通過影響氧化應激對血管內皮造成損傷，導致血管腔狹窄，限制視網膜組織血流，最終導致DR的發生以及病情加重[15]，與本研究結果一致。此外，有研究報道，LXA4水平的降低則可能導致核因子κB水平被有效抑制，導致血管生成相關細胞因子被進一步調控，進而使患者病情加重[16]。有學者指出，LXA4可有效調節體內多種物質的釋放和表達，對DM的發生發展起到重要的調節作用[17]。本研究結果顯示，隨著患者病情加重，其血清LXA4水平也顯著降低，與既往研究結果一致。

綜上所述，DR嚴重程度與血清NO及Apelin水平呈正相關，而與LXA4水平呈負相關，臨床上可通過檢測患者血清NO、LXA4、Apelin水平對患者病情進行評估。但本研究臨床樣本量較小，且并未對患者進行長期隨訪，有待后續進一步研究。