長(zhǎng)壽花組織培養(yǎng)快繁技術(shù)

盧玫璇

（吉林市園林管理中心 吉林·吉林 132108）

長(zhǎng)壽花為景天科伽藍(lán)菜屬中一種草本植物，又名圣誕伽藍(lán)菜等，是一種常見草本花卉，可露地栽植及盆栽，觀賞價(jià)值非常好。長(zhǎng)壽花觀賞效果、開花時(shí)節(jié)及觀賞期極具特點(diǎn)，是園林綠化、室內(nèi)美化應(yīng)用中非常好的花材。長(zhǎng)壽花常用繁殖方法為扦插繁殖和組培繁殖。扦插繁殖應(yīng)用較早，技術(shù)比較成熟，組培繁殖技術(shù)應(yīng)用較晚，還有開發(fā)空間，結(jié)合花卉生產(chǎn)實(shí)踐介紹組織培養(yǎng)快繁技術(shù)。

1 長(zhǎng)壽花組培外植體的處理

長(zhǎng)壽花的莖頂、葉、莖、花芽和花均可以作為外植體，在作者實(shí)踐中，以莖段做為外植體的效果最好。采集長(zhǎng)壽花莖段，帶回組培實(shí)驗(yàn)室，清水洗凈截小段，裝進(jìn)廣口瓶，無(wú)菌紗布封瓶口，流水沖洗15分鐘，瀝干水分將截成小段嫩枝再進(jìn)一步截成2～3厘米長(zhǎng)短段，在0.1%升汞（HgCl2）溶液中浸泡3分鐘，再用無(wú)菌水沖洗4～5次，瀝干水分，帶入接種室中，放入已經(jīng)消過(guò)毒的超凈工作臺(tái)上。在接種前，外植體還需在75%的酒精溶液中浸泡30分鐘，用無(wú)菌水沖4～5次后，再用無(wú)菌的藥棉拭干水分，放在培養(yǎng)皿（墊上無(wú)菌濾紙）中。莖段用酒精燈灼燒過(guò)的手術(shù)刀切割成0.5厘米的小段后再接種，首次接種每瓶只接1塊原材料，這樣可以降低它的污染率。接種時(shí)使莖段保持橫臥狀態(tài)會(huì)有較好的效果，保持橫臥時(shí)，莖段側(cè)面兩個(gè)切口都能夠生成愈傷組織，最后會(huì)連到一起，保證產(chǎn)生較大面積的愈傷組織塊，為形成大量不定芽做好基礎(chǔ)。

2 長(zhǎng)壽花組培培養(yǎng)基配方選取

長(zhǎng)壽花整個(gè)室內(nèi)組培過(guò)程分為初代培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)和生根培養(yǎng)三個(gè)階段。前兩個(gè)階段基本培養(yǎng)基選取MS，生根培養(yǎng)階段基本培養(yǎng)基選取1/2MS，然后往基本培養(yǎng)基中添加不同種類和濃度的激素。各配方的培養(yǎng)基均采用固體培養(yǎng)基，添加瓊脂量為6g/L，蔗糖量為30g/L，各配方pH值均調(diào)整為5.8。所有培養(yǎng)基都要用高壓滅菌鍋高壓滅菌，條件為121℃、131kPa、30分鐘。初代培養(yǎng)主要以誘導(dǎo)為目的，可選用MS+6-BA1.0毫克/升+NAA0.1毫克/升配方，在實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)該配方除了污染之外，每個(gè)組培瓶中均能夠100%的形成愈傷組織，而且愈傷組織能夠較好地誘導(dǎo)出不定芽。增殖培養(yǎng)主要以擴(kuò)繁為目的，實(shí)踐中在基本培養(yǎng)基MS中添加不同配比的細(xì)胞分裂素KT和生長(zhǎng)素IAA、NAA，結(jié)果發(fā)現(xiàn)KT添加量為1.0毫克/升時(shí)，生長(zhǎng)素NAA量增加有利于增殖，但影響苗高生長(zhǎng)。另外，玻璃化比率處于上升狀態(tài)，說(shuō)明添加生長(zhǎng)素NAA，增殖倍數(shù)和苗高較IAA效果好，但易導(dǎo)致苗木玻璃化。經(jīng)多次實(shí)踐比較，在培養(yǎng)基中添加1.0毫克/升的GA3，可減少玻璃化現(xiàn)象。增殖培養(yǎng)基的配方選取MS+KT1.0毫克/升+NAA0.02毫克/升+GA31.0毫克/升效果最好。生根培養(yǎng)主要以促進(jìn)增殖苗生根為目的，生根培養(yǎng)基配方可以選用1/2MS+IBA0.5毫克/升，生根率達(dá)到100%，且生成的根基部無(wú)愈傷組織，根較粗壯。

3 長(zhǎng)壽花組培過(guò)程及培養(yǎng)條件

外植體莖段以保持橫臥狀態(tài)接種到初代培養(yǎng)基上，為降低污染率，初次接種每瓶只接1塊原材料，接種后7天開始形成愈傷組織，到第15天愈傷組織生長(zhǎng)達(dá)到最旺盛時(shí)期，此時(shí)愈傷組織上面開始分化出不定芽，經(jīng)過(guò)25天時(shí)間，大部分愈傷組織上形成7～8個(gè)不定芽，待不定芽長(zhǎng)成3～4厘米，將其切成1～2厘米小段轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基配方中，增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)20天將會(huì)長(zhǎng)成小叢苗，然后再次切割小叢苗進(jìn)行第二代增殖，總共增殖培養(yǎng)3代，然后進(jìn)行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)時(shí)間為20～25天。

三個(gè)階段培養(yǎng)過(guò)程均在培養(yǎng)室進(jìn)行，接種、轉(zhuǎn)瓶過(guò)程均需無(wú)菌條件，培養(yǎng)室、接種室要保證無(wú)菌環(huán)境。初代階段，溫度控制20～25℃，光照度1000～2000Lx，每天光照8小時(shí)；增殖階段溫度控制在 25～28℃，光照度 2000～3000Lx，每天光照時(shí)間 8～12 小時(shí)；生根階段溫度前期階段控制25℃，后期階段控制25～28℃，光照強(qiáng)度先低后高，控制在1500～4000Lx，光照時(shí)間14小時(shí)。

4 組培苗出瓶移栽及養(yǎng)護(hù)

長(zhǎng)壽花在生根培養(yǎng)基上長(zhǎng)到苗木高達(dá)3厘米、具有3～4條1～2厘米長(zhǎng)根系時(shí)進(jìn)行出瓶移栽操作。出瓶前煉苗3～5天，出瓶基質(zhì)可采用蛭石、沙子、草碳、園土等，實(shí)踐表明采用蛭石∶沙子=2∶1效果較好，出瓶成活率達(dá)到98%，苗木生長(zhǎng)狀況好，葉濃綠，苗健壯，新根粗壯。出瓶后需在大棚溫室進(jìn)行培養(yǎng)1個(gè)月，環(huán)境隨正常大棚環(huán)境。在大棚培養(yǎng)前期階段，需要覆蓋塑料薄膜，保證膜內(nèi)濕度在80%～85%，大棚的遮蔭率在50%，另注意病蟲害的防治。